培植牛黄中7种胆汁酸类成分含量测定方法的建立及验证

目的:基于分析方法质量源于设计理念,建立与优化同时测定培植牛黄中7种胆汁酸含量分析方法。方法:应用Plackett-Burman和全析因设计筛选和优化色谱参数;应用设计空间确定关键色谱参数的最优值和控制范围。最后,对所建立的分析方法进行方法学验证。结果:设计空间确定关键色谱参数范围和最优值:柱温可接受范围:30~40℃,最优值35℃;乙腈初始浓度范围可接受范围:38.8%~41.6%,最优值40%;乙腈终点浓度可接受范围:61.3%~64.60%,最优值63%。方法学验证各项指标均合要求。鹅去氧胆酸、去氧胆酸、牛黄脱氧胆酸钠、甘氨胆酸钠、甘氨脱氧胆酸钠的相对校正因子分别为1.15、1.19、1.29、1.54、1.49。结论:所建立的胆汁酸含量测定分析方法准确稳定,可用于同时测定培植牛黄中7种胆汁酸的含量。

天然牛黄、培植牛黄和鸡胆汁对大鼠足跖肿胀率及炎性组织中PGE_2含量的影响

采用大鼠足跖肿胀法和紫外可见分光光度法，研究了天然牛黄、胆红素含量不同的培植牛黄以及鸡胆汁对大鼠角叉菜胶性和甲醛性的足跖肿胀率和炎性组织中PGE2含量的影响。结果表明，天然牛黄，中胆红素培植牛黄、低胆红素培植牛黄和鸡胆汁均能显著地抑制角叉菜胶和甲醛致炎后的大鼠足跖肿胀和炎性组织中的PGE2含量。经F-检验，这4种中药的作用相互间差异无显著性。

化学发光法研究培植牛黄清除O_2^-的作用

应用化学发光法研究培植牛黄对碱性二甲基亚砜体系产生O_2~1清除作用。结果显示，培植牛黄对O_2~1有较强的清除作用，其50％清除率剂量为0．03μg／mL，清除活性远高于维生素E。

培植牛黄清除·OH自由基作用的研究

用光度分析法研究培植牛黄对· OH自由基的清除作用。结果显示培植牛黄对· OH自由基有显著的清除能力。其 5 0 %清除率剂量为 0 .0 2 μg/ m l,清除活性远远高于维生素 C。

牛体外牛黄发生器内培植牛黄技术研究

利用 4 8头健康黄牛同时施行胆总管结扎术、胆囊插管术、十二指肠插管术和体外安装牛黄发生器 ,将原胆汁流通径路改建为肝脏→胆管→胆囊→引胆汁管→牛黄发生器→十二指肠 ,在体外牛黄发生器内和胆囊内同时培植牛黄。结果表明 ,植黄牛胆汁 pH值降低 ,胆酸含量下降 ,牛黄发生器内胆汁粘度低于胆囊内胆汁粘度。胆囊内注入新洁尔灭 ,可减少胆汁中细菌数量 ,减轻胆囊炎症反应。全棉材料牛黄床的牛黄产量高于锦纶 6 6和涤纶材料牛黄床 ,以网眼状全腔充盈型牛黄床的牛黄产量高、质量好。在 5～ 7个月的培植期内 ,每头牛能生产牛黄 14 1～ 19.6 g ,牛黄胆红素含量为 2 9 0 5%± 7.51%。

人工培植牛黄抗炎作用及其机制的初步探讨

人工培植牛黄灌胃给药对巴豆油致小鼠耳肿胀 ,角叉菜胶致大鼠足肿胀 ,胸膜炎模型大鼠白细胞游走均有显著抑制作用 .对ACCB抗炎作用的机制进行了初步探讨 .结果显示 ,ACCB灌胃给药能显著降低大鼠角叉菜胶性炎症渗出物中丙二醛 (MDA)含量 ,降低胸膜炎模型大鼠胸积液中一氧化氮 (NO)含量 ,显著增强超氧化物岐化酶 (SOD)的活力 .

培植牛黄药理作用的研究

用比较药理学研究方法,对培植牛黄与天然牛黄的主要药效和毒性在同等条件下进行了比较研究。结果表明,两者均具有镇静、抗惊厥、解热、抗炎、强心、降压作用,其作用强度与毒性也相近似。

培植牛黄与天然牛黄中游离和结合胆汁酸含量的测定和比较

用薄层光密度法测定了十个生产单位的18批培植牛黄的游离和结合胆汁酸的含量,并与天然牛黄及牛胆粉比较,结果表明,培植牛黄含有与天然牛黄相同的胆汁酸成分,其中培植牛黄的游离胆汁酸比天然牛黄略高,结合胆汁酸含量多数样品与天然牛黄相当,总胆汁酸含量多数样品比天然牛黄略高。

天然牛黄和培植牛黄中胆红素胆酸含量的测定及分析比较

通过对１０例国内外产地不同的天然牛黄和５３例内蒙古不同地区生产的培植牛黄中胆红素、胆酸含量测定及含量分析表明，天然牛黄中胆红素的含量为３２．５５～６７．７０％，平均含量为４８．３９％；胆酸含量为０．９３～１５．１６％，平均含量为７．３５％。培植牛黄中胆红素的含量为１６．８～４４．３０％，平均含量为１１．４６％；胆酸含量为４．９８％～４９．１６％，平均为１６．７６％。天然牛黄中胆红素的含量高于培植牛黄中的含量，而胆酸含量则明显低于培植牛黄。

天然牛黄、人工培植牛黄与人工牛黄的鉴别

目的:对天然牛黄、人工培植牛黄、人工牛黄进行鉴定比较。方法:从性状、显微、理化、生物检定等几方面鉴别。结果与结论:天然牛黄与人工培植牛黄无明显差异,人工牛黄与天然牛黄差别较大。

培植牛黄与天然牛黄药理作用研究

本文用实验药理学方法,在同等条件下对牛体培植牛黄与天然牛黄进行了药理作用的比较研究,结果表明,二种牛黄均具有镇静、抗惊厥、解热及抗炎症作用,二者的作用强度与毒性也相仿,说明培植牛黄的药效与天然牛黄基本相似。

胆红素含量不同的培植牛黄对动物小肠平滑肌及胆汁分泌的影响

采用肠管运动实验的在体法和离体法研究证明，天然牛黄、胆红素含量不同的培植牛黄，对家兔在体肠管和离体肠管平滑肌的收缩强度和收缩频率均无显著影响，中胆红素培植牛黄、低胆红素培植牛黄与天然牛黄三者之间对肠管平滑肌的作用亦无显著性差异。采用大鼠胆管插管法，观察胆红素含量不同的培植牛黄对大鼠胆汁分泌量的影响，结果表明，中、低胆红素培植牛黄与天然牛黄相似，三者均能显著地增加大鼠胆汁的分泌量。从给药后不同时间的胆汁分泌量的平均增加率来看，三者相比，低胆红素培植牛黄最高，为38．19％；天然牛黄居中，为37．91％；中胆红素培植牛黄最低，为24．04％。

胆红素含量不同的培植牛黄抗炎作用研究

采用鼠耳肿胀法、毛细血管通透性实验法、棉球植入法观察了胆红素含量不同的培植牛黄的抗炎作用。结果表明，中胆红素培植牛黄和低胆红素培植牛黄对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀、小鼠皮肤毛细血管通透性及小鼠棉球肉芽肿均有显著的抑制作用，其作用强度与天然牛黄无显著性差异。

离体培植牛黄技术及成黄机理的研究

试验模拟牛体内牛黄形成机理设计牛黄发生器，在体外进行培植牛黄并对体外培植牛黄的形成机理加以探讨。结果表明：在大肠杆菌的作用下，正常胆汁在培育10h后即转化为成黄胆汁，胆汁颜色由草绿色变为墨绿色，继而变为黄绿色和桔黄色；胆汁pH值、胆汁黏度、胆红素、胆酸、糖蛋白和Ca^2＋的浓度逐渐下降；向胆汁中添加Ca^2＋，可促进成黄胆汁的形成；45～55℃是体外植黄的良好条件。

黄牛双胆囊培植牛黄期间胆道压力与成黄关系的研究

本文对２８头黄牛进行双胆囊植黄术，即在胆囊和模拟胆囊内同时培植牛黄。植黄期间测定了胆囊、模拟胆囊、胆总管内压力．４头黄牛进行胆囊插管、十二指肠插管后测定了胆囊、十二脂肠在常态下的压力．结果表明，胆囊、模拟胆囊、胆总管、十二指肠间存在着连续的静水压梯度．胆汁胆红素含量在术后３ｄ内升高（Ｐ＜０．００１），７ｄ以后与术前差异不大，胆汁酸、ｐＨ、粘度下降，Ｃａ２＋变化不大，双胆囊植黄术在１２２±１４ｄ内的产量为１７．７±４．７ｇ／头，牛黄中胆红素含量全部在１８％以上，其中胆红素含量超过３５％的占６２．５％。胆道压力与成黄关系密切．

胆红素含量不同的培植牛黄的解热作用研究

采用比较药理学研究方法，观察了中胆红素培植牛黄、低胆红素培植牛黄和天然牛黄对大肠杆菌内毒素及蛋白脓所致大鼠发热体温和正常体温的影响。结果表明，以上３种牛黄均能显著地降低大肠杆菌内毒素和蛋白胨所致大鼠的发热体温，其中，低胆红素培植牛黄的解热作用强于天然牛黄和中胆红素培植牛黄。此外，实验结果还表明，低胆红素培植牛黄在给药后６ｈ，天然牛黄在给药后５ｈ、６ｈ，还可显著地降低大鼠正常体温，而中胆红素培植牛黄对大鼠的正常体温则无显著影响。

化学发光法研究培植牛黄的活性氧自由基

运用化学发光技术研究了培植牛黄的活性氧自由基。结果表明 ,培植牛黄含有较多的活性氧自由基 ,其发光强度随着培植牛黄浓度的变化而改变。为研究培植牛黄清除活性氧自由基提供了有价值的重要信息。