GTF-PAc融合防龋DNA疫苗的研究(Ⅰ)携带GLU基因片段的真核表达质粒pGLU的构建

目的 :将变形链球菌葡糖基转移酶GTF I的编码葡聚糖结合区 (GLU)的序列克隆到真核载体 pCI中 ,为构建GTF PAc融合防龋DNA疫苗做准备。方法 :用PCR的方法扩增含gtfB基因的重组质粒 pYNB13的GLU区序列 ;将载体 pCI和GLU扩增片段分别酶切 ,体外连接 ,构建成真核表达质粒pGLU ,酶切电泳鉴定。 结果 :PCR获得了glu目的片段 ,质粒 pGLU含有 glu目的片段。 结论 :构建出了含有gtfB基因重要抗原决定簇区的真核表达质粒

绵羊GTF2A1基因多态性及其与产羔数的关联分析

本研究旨在探究绵羊GTF2A1基因g.89505005G>A位点多态性与产羔数之间的关系,以期寻找与绵羊产羔数有关的分子标记。基于前期利用全基因组选择信号分析获得的候选基因GTF2A1,采用Sequenom MassARRAY■SNP技术对多羔和单羔的绵羊群体及产羔数存在差异的小尾寒羊群体进行g.89505005G>A位点多态性检测,并与产羔数进行关联分析。结果表明:GTF2A1基因g.89505005G>A位点存在3种基因型:AA、AG和GG,且基因型频率和等位基因频率在单、多羔品种间差异均达到显著水平;该位点在小尾寒羊、滩羊、苏尼特羊、萨福克羊、杜泊羊以及草原藏羊6个品种中均处于哈代温伯格平衡状态;关联分析表明:g.89505005G>A位点多态性与小尾寒羊第1、第2以及第3胎产羔数均存在显著关联,AA型各胎产羔数均高于GG型(P<0.05)。综上,A等位基因可能是提高绵羊产羔数的一个潜在有效的DNA标记。

变形链球菌gtf基因研究近况

变形链球菌ｇｔｆ基因研究近况杜民权综述樊明文审校武汉市湖北医科大学口腔医学院（４３００７０）变形链球菌已被公认为主要致龋菌［１］．其致龋的机制在于该细菌利用蔗糖产生葡糖基转移酶（Ｇｌｕｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ；ＧＴＦ），合成有粘性的非水溶性葡...

GTF2IRD1基因多态性与先天性小耳畸形发病的关系

目的探讨GTF2IRD1基因突变是否与先天性小耳畸形有关。方法收集8岁左右小耳畸形患者328例(患者组)和30岁左右健康人群500例(对照组),分别采取静脉血2ml,采用候选基因关联研究的手段对GTF2IRD1基因在328例小耳畸形患者和500例对照者中进行比较分析,揭示同源盒基因GTF2IRD1与先天性小耳畸形之间的关系。结果通过飞行质谱法检测患者组与对照组GTF2IRD1基因中4个位点的基因型,关联研究在小儿畸形组发现了1个和小耳畸形显著关联的位点rs13244286[Bonferroni检验P=0.002 838 8,比值比(OR)=1.66],其位于GTF2IRD1基因编码HLH模体的关键序列附近。采用Impute2进行基因组填充后分析,又发现3个位点(rs13246861、rs34158545和rs73137122)与小耳畸形显著相关。结论本研究通过候选基因关联研究发现了4个可能的小耳畸形风险基因位点,证实GTF2IRD1基因与小耳畸形显著相关。

GTF2H2基因变异体与脊髓性肌萎缩症的相关性

目的基于MLPA的检测结果探讨GTF2H2基因的两个变异体与脊髓性肌萎缩症(SMA)的关系。方法利用MLPA技术对317例连续样本进行SMA的决定基因SMN1、修饰基因NAIP与SMN2以及位置相邻基因RAD17、SERF1B及GTF2H2拷贝数检测。根据有无基因转换,对纳入的数据利用相关与回归分析的统计方法进行探讨分析。结果 Spearman's相关性分析显示,纳入分析的223例连续样本的T-GTF2H2与NAIP基因的相关系数为0.694;线性回归显示,GTF2H2基因对NAIP基因的决定系数(R^2)为0.554,调整R^2为0.549,T-GTF2H2变异体的标准回归系数(β)为0.768,而C-GTF2H2变异体的β为-0.052。结论 T-GTF2H2变异体与NAIP基因呈正相关,进而说明T-GTF2H2变异体在SMA致病的分子机制过程中有一定的作用。

GTF2H1基因rs3802967多态性与肺癌易感性的关联性

目的探索GTF2 H1基因rs3802967位点多态性与肺癌相关性。方法采集肺癌及健康受试者外周血进行基因分型,非条件Logistic回归分析该位点多态性与肺癌易感性之间相关性。结果共收集上海及泰州地区885例肺癌患者和896例健康受试者外周血进行基因分型分析,结果显示rs3802967 CT+TTvs.CC总体上肺癌风险显著增加(OR=1.943,95%CI:1.559~2.426,P=3.989×10-9),吸烟患者(CT+TTvs.CC,OR=2.382,95%CI:1.798~3.167,P=1.813×10-9)、男性患者(CT+TT vs.CC,OR=2.141,95%CI:1.644~2.796,P=1.852×10-8)以及男性吸烟患者(CT+TTvs.CC,OR=2.283,95%CI:1.709~3.059,P=2.718×10-8)肺癌风险显著增加。结论 GTF2 H1基因rs3802967 C>T与肺癌患病风险正相关,尤其在男性、吸烟患者中显著,该位点有望成为肺癌易感个体筛查参考指标。

依博素生物合成基因ste22的异源置换研究

目的依博素是由链霉菌产生的一种新型胞外多糖,具有显著抗类风湿性关节炎的作用,我们研究已确定了该多糖的生物合成基因簇(ste)。为了对依博素结构进行改造以提高其生物活性,对其生物合成基因ste22进行了异源置换研究。方法采用PCR扩增方法从乳酸菌获得了编码葡萄糖糖基转移酶的基因gtf,通过基因同源重组双交换,从链霉菌中置换了ste22基因。采用白细胞介素-1合成酶活性测定方法及小鼠巴豆油急性炎症模型,初步确定了基因置换株的依博素衍生物生物活性。结果获得了葡萄糖糖基转移酶基因置换株Streptomyces sp.139(gtf-22),产生了依博素新衍生物EPS-22g。研究表明该衍生物与依博素相比,葡萄糖比例从2.14%显著上升到48.64%,体外活性实验显示,其对炎症细胞因子白细胞介素-1合成关键酶ICE抑制率高于依博素,小鼠巴豆油急性炎症体内活性分析结果证明,该衍生物抑制活性亦高于依博素。结论采用异源基因置换生物合成基因的方法改造依博素产生菌,可能是获得生物活性较好新多糖衍生物的一种有效手段。