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Axin基因对人肾母细胞瘤细胞生物学特性的影响 被引量:2
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作者 陈广生 安鲁 +2 位作者 李娟 张强 惠军朋 《陕西医学杂志》 CAS 2016年第5期619-622,共4页
目的:研究Axin基因对人肾母细胞瘤细胞G401生物学特性的影响为人肾母细胞瘤的分子病理机制及治疗、预后提供基础研究依据。方法:采用基因工程的方法构建含Axin基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-Axin,稳定转染G401细胞,建立高表达的G401细... 目的:研究Axin基因对人肾母细胞瘤细胞G401生物学特性的影响为人肾母细胞瘤的分子病理机制及治疗、预后提供基础研究依据。方法:采用基因工程的方法构建含Axin基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-Axin,稳定转染G401细胞,建立高表达的G401细胞系。用MTT实验、克隆形成能力实验、侵袭能力实验三种方法检测Axin基因对G401细胞生物学特性的影响。结果:重组载体pIRES2-EGFP-Axin经PCR和双酶切鉴定结果显示:在约2500bp大小处出现一条特异性条带,转染G401细胞后,经Western blotting结果显示:Axin蛋白在G401细胞中成功表达,同时,转染了pIRES2-EGFP-Axin质粒的G401细胞生长速度显著减慢(P<0.05);G401细胞的克隆形成能力和侵袭力均显著降低(P<0.05)。结论:我们成功构建了重组真核表达载体PIRES2–EGRP–Axin,且通过Western blotting检测筛选获得稳定转染的G401细胞系,最后Axin体外实验对G401细胞生物学特性影响表明:Axin基因与肾母细胞瘤的发生发展有一定关系。 展开更多
关键词 肾母细胞瘤/治疗 基因/治疗应用 细胞分裂 @Axin @G401
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基因工程腺病毒H101逆转A549/DDP细胞对顺铂耐药性的实验研究 被引量:9
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作者 徐瑞华 袁中玉 +1 位作者 管忠震 李苏 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第8期975-979,共5页
背景及目的:耐药性产生是化疗失败的主要原因之一,克服耐药性的方法之一是使用逆转剂。目前尚无一种理想的、可应用于临床的顺铂(DDP)耐药逆转剂。本研究探讨基因工程腺病毒H101对DDP耐药性的逆转作用及其机制。方法:体外利用人肺腺癌... 背景及目的:耐药性产生是化疗失败的主要原因之一,克服耐药性的方法之一是使用逆转剂。目前尚无一种理想的、可应用于临床的顺铂(DDP)耐药逆转剂。本研究探讨基因工程腺病毒H101对DDP耐药性的逆转作用及其机制。方法:体外利用人肺腺癌细胞株A549的DDP耐药模型A549/DDP,采用MTT法检测H101对A549/DDP细胞耐药性的逆转作用。用流式细胞仪(FCM)测定细胞多药耐药蛋白1(multidrugresistantprotein1,MRP1)、谷胱甘肽鄄S鄄转移酶(GST)及TOPO鄄Ⅱ蛋白表达量,荧光鄄考马斯亮蓝法检测细胞内GSH含量,原子吸收法测定细胞内铂浓度。结果:A549/DDP细胞对DDP的耐药指数为14.3。加入H101后,DDP对A549/DDP的半数抑制浓度(IC50)由352.4μmol/L降至61.6μmol/L,逆转倍数为5.7倍。FCM检测结果显示,A549/DDP细胞的GST和TOPO鄄Ⅱ蛋白水平均较A549细胞高,而两种细胞内均未检测到MRP1的表达,经H101处理后的A549/DDP细胞胞内GST蛋白和TOPO鄄Ⅱ蛋白水平均明显下降。A549/DDP胞内GSH含量比A549高2倍多;H101感染A549/DDP细胞后,胞内的GSH含量下降,随着H101剂量的增加,胞内GSH含量逐渐下降,达A549细胞内GSH水平。原子吸收法测定细胞内铂含量的结果显示,A549细胞内铂含量是A549/DDP细胞内铂含量的3倍,加入H101后,A549细胞内铂的含量无明显变化,但A549/DDP细胞内铂的含量明显增加。结论:H101能逆转A549/DDP对DDP的耐药性,H101逆转DDP耐药性的机制可能是减少A549/DDP细胞内GSH和TOPOⅡ蛋白的水平,增加了A549/DDP细胞内铂的蓄积。 展开更多
关键词 基因工程腺病毒/治疗应用 基因转染 肺肿瘤 A549/DDP细胞株 顺铂/药理学 耐药
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HSV1-tk自杀基因系统对小鼠黑色素瘤的杀伤和抑制效应 被引量:1
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作者 刘晶晶 杜标炎 +3 位作者 谭宇蕙 吴映雅 周瑶 刘喜娟 《广州中医药大学学报》 CAS 2010年第4期389-392,438,439,共6页
【目的】检测自杀基因系统单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV1-tk/GCV)对小鼠黑色素瘤的杀伤和抑制效应。【方法】将B16/tk(tk+)细胞和未经修饰的B16(tk-)细胞按tk+细胞占总细胞数的0%、10%、20%、40%、80%比例分别进行混合,各组... 【目的】检测自杀基因系统单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV1-tk/GCV)对小鼠黑色素瘤的杀伤和抑制效应。【方法】将B16/tk(tk+)细胞和未经修饰的B16(tk-)细胞按tk+细胞占总细胞数的0%、10%、20%、40%、80%比例分别进行混合,各组细胞于96孔板中培养,加入丙氧鸟苷(GCV)至15.7μmol/L,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同tk+细胞比例的HSV1-tk/GCV系统在体外对肿瘤细胞的杀伤率。各组混合细胞分别接种于小鼠腋下,以GCV注射液按100 mg.kg-1.d-1进行治疗,检测瘤体体积、湿质量,测定抑瘤效应。【结果】tk+比例10%以上治疗组,HSV1-tk/GCV系统对黑色素瘤B16细胞均有明显杀伤效应,但旁杀伤作用不明显;从移植瘤体积看,20%以上tk/GCV治疗组肿瘤呈现明显生长抑制状态(P<0.05),以80%tk/GCV治疗组作用最显著(P<0.01);从移植瘤质量看,80%tk/GCV治疗组肿瘤呈现明显生长抑制状态(P<0.01),其他组虽随着tk+细胞比例的增高瘤体平均质量下降,但差异无显著性意义。【结论】HSV1-tk/GCV系统对小鼠黑色素瘤的杀伤和抑制效应均随着B16/tk细胞比例的增高而增强,已建立显示出体外杀伤效应和体内抑瘤活性的小鼠黑色素瘤自杀基因系统。 展开更多
关键词 黑色素瘤 自杀基因系统/治疗应用 基因疗法 细胞培养
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PTEN基因对兔血管再狭窄的影响及其机制探讨
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作者 胡春梅 李淑梅 +2 位作者 赵雷 张基昌 曲荣锋 《陕西医学杂志》 CAS 2011年第5期537-538,604,共3页
目的:探讨联合应用PTEN基因转染兔预防血管再狭窄及其发生机制。方法:建立兔腹主动脉再狭窄模型;构建PTEN表达载体并在球囊损伤腹主动脉同时转染血管壁细胞。实验分3组。对照组:单纯行内膜剥脱术;实验组A:内膜剥脱术+PTEN真核质粒;实验... 目的:探讨联合应用PTEN基因转染兔预防血管再狭窄及其发生机制。方法:建立兔腹主动脉再狭窄模型;构建PTEN表达载体并在球囊损伤腹主动脉同时转染血管壁细胞。实验分3组。对照组:单纯行内膜剥脱术;实验组A:内膜剥脱术+PTEN真核质粒;实验组B:内膜剥脱术+空脂质体。采用常规病理、免疫组织化学、以及形态测量方法观察对再狭窄血管病变的影响及血管内膜细胞增殖细胞核抗原(PCNA)和MMP-9蛋白的表达。结果:成功转染PTEN基因组显著抑制损伤后4周内膜VSMCs表达PCNA,与对照组相比PCNA表达和MMP-9的水平明显受抑制(P<0.01);显著减少血管内膜厚度和面积。结论:PTEN基因转染在一定程度上可抑制实验性兔腹主动脉再狭窄。 展开更多
关键词 狭窄 病理性/预防和控制 血管 基因 肿瘤抑制/治疗应用 动物 实验
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miR-1202通过调控小鼠脑内的mGluR_4的表达在重度抑郁症中的作用 被引量:1
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作者 雷辉 顾乃兵 +1 位作者 刘志勤 常明则 《陕西医学杂志》 CAS 2015年第9期1109-1111,共3页
目的:探讨miR-1202在重度抑郁症中的作用及机制。方法:使用过表达miR-1202的腺相关病毒和慢性不可预见性应激模型的小鼠,通过旷场实验和强迫游泳实验等行为学实验来评估miR-1202的作用;通过Western-Blot实验来验证miR-1202的分子机制。... 目的:探讨miR-1202在重度抑郁症中的作用及机制。方法:使用过表达miR-1202的腺相关病毒和慢性不可预见性应激模型的小鼠,通过旷场实验和强迫游泳实验等行为学实验来评估miR-1202的作用;通过Western-Blot实验来验证miR-1202的分子机制。结果:在抑郁症模型小鼠海马区域中过表达miR-1202发现抑郁症症状有所缓解,WB检测实验验证miR-1202的靶基因为mGluR4。结论:在小鼠海马区域中的miR-1202通过mGluR4参与了重度抑郁症,这为未来治疗抑郁症提供了一个新的靶点。 展开更多
关键词 抑郁症/治疗 抑郁症/病理生理学 海马 基因/治疗应用 模型 动物 小鼠 @miR-1202 @mGluR4
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靶向RAD18的小干扰RNA对人食管鳞癌ECA-109细胞增殖和化疗敏感性的影响
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作者 娄鹏荣 孙晓南 +1 位作者 周俊东 邹士涛 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期364-370,共7页
目的:研究靶向RAD18基因的小干扰RNA ( siRNA )对食管鳞癌细胞ECA-109增殖和化疗敏感性的影响。方法:合成针对 RAD18基因的 siRNA ( RAD18-siRNA),通过脂质体将其转染人食管鳞癌ECA-109细胞株,采用荧光定量PCR方法检测ECA-109 R... 目的:研究靶向RAD18基因的小干扰RNA ( siRNA )对食管鳞癌细胞ECA-109增殖和化疗敏感性的影响。方法:合成针对 RAD18基因的 siRNA ( RAD18-siRNA),通过脂质体将其转染人食管鳞癌ECA-109细胞株,采用荧光定量PCR方法检测ECA-109 RAD18和CyclinD1 mRNA的表达,蛋白质印迹法检测其RAD18和CyclinD1蛋白的表达;应用CCK-8法检测ECA-109细胞的增殖和化疗药物对ECA-109细胞存活率的影响,流式细胞术检测ECA-109细胞周期;采用Pearson检验分析RAD18与CyclinD1基因表达的相关性。结果:与未转染组比较, RAD18-siRNA组RAD18表达明显降低(P<0.05)。 RAD18-siRNA组细胞增殖抑制(P<0.05),G1期细胞数增多,G2/M期细胞数减少(P<0.05)。不同浓度顺铂或5-氟尿嘧啶处理细胞后,两组细胞的存活率均下降(均P<0.05),但RAD18-siRNA组细胞半数抑制浓度较未转染组减少( P<0.05)。在食管鳞癌组织中, RAD18基因mRNA的表达与CyclinD1基因mRNA的表达呈正相关( r=0.478,P<0.01)。结论:下调RAD18表达能够抑制食管鳞癌细胞的增殖,提高其对化疗药物的敏感性;CyclinD1在食管鳞癌中的表达水平可能参与这一过程。 展开更多
关键词 食管肿瘤/药物疗法 鳞状细胞/药物疗法 RNA 小分子干扰/治疗应用 基因 肿瘤抑制/治疗应用 细胞增殖/药物作用 细胞周期蛋白D1/药物作用 细胞系 肿瘤
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Experimental Therapy for Solid Tumor by in situ Retroviral-mediated Gene Transfer
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作者 周中军 牛大地 +1 位作者 汤健 周爱儒 《Developmental and Reproductive Biology》 1995年第2期39-45,共7页
Although chemotherapy plays a main role in treatment for cancer, gene therapy is thought to be a promising approach of treatment for the future. Thymidine-Kinase gene was delivered into proliferating cells by a retrov... Although chemotherapy plays a main role in treatment for cancer, gene therapy is thought to be a promising approach of treatment for the future. Thymidine-Kinase gene was delivered into proliferating cells by a retroviral mediated gene transfer system in the culture cells. Later treatment with GCV showed definite cytotoxic effect on the HSV-tk modified cells and the effect correlated with the growth rate of cells. The rapid proliferating tumor cells, HR8348, were inhibited more efficiently than slow proliferating cells. In experiment in vivo , the introduced TK producer cells released virus particles continuously into their neighbor and, as compared with the control, GCV treatment exerted remarkable inhibitory effect on the growth of tumor. The inhibition also correlated with the number of injected TK producer cells. With administration of 0.2 ml of #795 tumor cell suspension(100 ng/ml), coinjection of 2 ×106 TK producer cells achieved 37% inhibition while that of 1 ×107 TK producer cells achieved 66% inhibition,though complete regression could not be achieved under such circumstances.Our result suggests that TK gene transfer followed by GCV treatment merits further evaluation as an effective antineoplastic approach. 展开更多
关键词 HSV-TK Gene therapy TUMOR
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Application of human bone marrow-derived mesenchymal stem cells in the treatment of radiation-induced gastrointestinal syndrome 被引量:4
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作者 YANG Chao DAI Wei Min +1 位作者 CHEN Hai Xu WU Ben Yan 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2014年第12期1177-1182,共6页
Nuclear accidents and terrorism present a serious threat for mass casualty.Accidental or intended radiation exposure leads to radiation-induced gastrointestinal(GI)syndrome.However,currently there are no approved medi... Nuclear accidents and terrorism present a serious threat for mass casualty.Accidental or intended radiation exposure leads to radiation-induced gastrointestinal(GI)syndrome.However,currently there are no approved medical countermeasures for GI syndrome.Thus,developing novel treatments for GI syndrome is urgent.Mesenchymal stem cells(MSCs)derived from bone marrow are a subset of multipotent adult somatic stem cells that have the ability to undergo self-renewal,proliferation and pluripotent differentiation.MSCs have advantages over other stem cells;they can be easily isolated from patients or donors,readily expanded ex vivo,and they possess reparative and immunomodulatory properties.Moreover,MSCs have been shown to be powerful tools in gene therapy and can be effectively transduced with vectors containing therapeutic genes.Therefore,the therapeutic potential of MSCs has been brought into the spotlight for the clinical treatment of GI syndrome.In this review,we discuss the possible role of MSCs in radiation-induced GI syndrome. 展开更多
关键词 mesenchymal stem cells radiation-induced gastrointestinal syndrome TREATMENT
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Dendrimer-based nanoparticles in cancer chemotherapy and gene therapy 被引量:1
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作者 Lei Jiang Sensen Zhou +2 位作者 Xiaoke Zhang Wei Wu Xiqun Jiang 《Science China Materials》 SCIE EI CSCD 2018年第11期1404-1419,共16页
This review discusses recent studies on dendrimer-based nanoparticles in cancer chemotherapy and gene therapy. In order to achieve the high efficacy and low side effects of chemotherapy and gene therapy, it is essenti... This review discusses recent studies on dendrimer-based nanoparticles in cancer chemotherapy and gene therapy. In order to achieve the high efficacy and low side effects of chemotherapy and gene therapy, it is essential to combine the unique features of dendrimers and the specific tumor microenvironment to target delivery and control release of therapeutic agents to tumor tissues and cells. Strategies to design the dendrimer-based delivery system in this review include non-modified dendrimers, dendrimer conjugates, assembled amphiphilic dendrimers, nanohybrid dendrimer carriers and dendrimers with inherent activity. In addition, specific functional groups on these dendrimers as stimuli-responsive system for targeting delivery and controlled release of therapeutic agents are discussed. 展开更多
关键词 dendrimer-based nanoparticles cancer chemotherapy gene therapy
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