HIV整合至CD4+T细胞、脾脏、淋巴结、胃肠相关淋巴组织中,成为HIV潜伏感染的储存库。学界提出“shock and kill”的治疗策略,即先激活释放再杀灭病毒。而实施该策略的前提是评估和测定HIV储存库的大小。本文介绍目前常用的测定HIV储...HIV整合至CD4+T细胞、脾脏、淋巴结、胃肠相关淋巴组织中,成为HIV潜伏感染的储存库。学界提出“shock and kill”的治疗策略,即先激活释放再杀灭病毒。而实施该策略的前提是评估和测定HIV储存库的大小。本文介绍目前常用的测定HIV储存库方法如Alu-gagPCR、定量病毒产物分析及tat/rev诱导有限稀释法。Alu.gagPCR可区别整合与未整合病毒基因,但不能区分缺陷与有功能的前病毒,因此易高估储存库。定量病毒产物分析在纯化静止CD4+T细胞中进行,被誉为HIV储存库检测的“金标准”,但实验成本高,技术要求高,所需标本量大,仅由一轮激活并不能完全诱导产物释放,因此会低估储存库。Tat/rev诱导有限稀释法主要测定经由刺激物诱导表达多拼接RNA等生物学标志的潜伏感染细胞频数,具有所需血标本少,不用抽提病毒RNA,实验时间短,对于不同大小储存库都适用等优点,但可能高估潜伏储存库。展开更多
文摘HIV整合至CD4+T细胞、脾脏、淋巴结、胃肠相关淋巴组织中,成为HIV潜伏感染的储存库。学界提出“shock and kill”的治疗策略,即先激活释放再杀灭病毒。而实施该策略的前提是评估和测定HIV储存库的大小。本文介绍目前常用的测定HIV储存库方法如Alu-gagPCR、定量病毒产物分析及tat/rev诱导有限稀释法。Alu.gagPCR可区别整合与未整合病毒基因,但不能区分缺陷与有功能的前病毒,因此易高估储存库。定量病毒产物分析在纯化静止CD4+T细胞中进行,被誉为HIV储存库检测的“金标准”,但实验成本高,技术要求高,所需标本量大,仅由一轮激活并不能完全诱导产物释放,因此会低估储存库。Tat/rev诱导有限稀释法主要测定经由刺激物诱导表达多拼接RNA等生物学标志的潜伏感染细胞频数,具有所需血标本少,不用抽提病毒RNA,实验时间短,对于不同大小储存库都适用等优点,但可能高估潜伏储存库。