IL-12基因修饰瘤苗治疗小鼠眼内移植性黑色素瘤疗效观察

目的观察白细胞介素12(IL-12)基因修饰瘤苗对移植性黑色素瘤的疗效。方法将荷瘤模型鼠分为PBS治疗组,野生型肿瘤细胞疫苗(WTV)治疗组,IL-12基因修饰肿瘤细胞疫苗(GTV)治疗组。模型建立后的第3d、10d分别在各组鼠结膜下注射30μlPBS、30μl(3.0×106个细胞)灭活的WTV及GTV,观察角膜溃破时间、淋巴结和肺的转移率及生存时间。结果PBS组及WTV组角膜溃破时间早于GTV组,前两组间差异无统计学意义;模型建立后的第18d,GTV组淋巴结转移瘤发生率低于PBS组及WTV组,后两组间差异无统计学意义;模型建立后第28d的各组间小鼠肺转移瘤发生率及各组间小鼠生存时间均无统计学意义。结论IL-12基因修饰瘤苗对实验模型鼠荷瘤早期起到了一定的抗肿瘤效应。

IL-12基因修饰瘤苗联合CpG-ODN治疗小鼠眼内黑色素瘤的研究

目的:观察白细胞介素-12(Interleukin-12,IL-12)基因修饰瘤苗联合含非甲基化的胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸(CpG)基序的寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucletide,ODN)即CpG-ODN治疗小鼠眼内黑色素瘤的疗效。方法:将荷瘤模型鼠分为磷酸盐缓冲液(phosphate-buffered saline,PBS)治疗组,IL-12基因修饰肿瘤细胞疫苗(gene modified tumor cell vaccine,GTV)治疗组及GTV联合CpG-ODN(GTVC)治疗组;鼠荷瘤模型建立后的第3d及第10d分别在各组鼠结膜下注射30μLPBS,30μL(3.0×106个细胞)灭活的GTV及含20μgCpG-ODN灭活的GTV,进行角膜溃破时间、淋巴结和肺部转移瘤发生率、生存时间及外周血CD4+和CD8+T细胞比例的观测。结果:GTV组及GTVC组角膜溃破晚于PBS组时间,前两组间差异无统计学意义;鼠荷瘤模型建立后的第18d,GTV组及GTVC组颈部淋巴结转移瘤发生率低于PBS组,前两组组间差异无统计学意义;鼠荷瘤模型建立后的第28d,GTVC组鼠肺转移瘤发生率低于PBS组及GTV组,后两组组间差异无统计学意义;PBS组及GTV组的外周血中CD4+与CD8+T细胞比值下降,GTVC组与阴性对照组组间差异无统计学意义;GTVC组小鼠生存时间长于另两组。结论:新型免疫佐剂CpG-ODN可增强IL-12基因修饰瘤苗的抗眼内黑色素瘤效应。

分泌不同水平IL-2的基因修饰瘤苗具有不同的治疗效果

通过一系列动物模型，已经对IL-2基因修饰的瘤苗的免疫调节作用和肿瘤治疗效果进行了广泛研究，并且IL-2基因修饰的瘤苗已进入临床试用阶段。本研究表明，此种瘤苗分泌IL-2水平不同会直接影响其治疗效果，为了进行实验，作者制备了体外分泌21种不同水平IL-2(0．01～7500U／10^5细胞／天)的M-3黑色素瘤细胞，此水平囊括了目前为止所有报道的IL-2基因转染瘤苗分泌IL-2的水平。

白细胞介素2基因修饰瘤苗治疗胃癌复发转移的初步临床研究

目的观察白细胞介素2(IL-2)基因修饰人胃癌细胞瘤苗(HG-1/IL-2)治疗胃癌术后复发和/或转移患者的临床安全性,并初步评价其对患者免疫指标的影响和疗效。方法应用基因工程技术,以逆转录病毒载体将人IL-2cDNA转导入HLA-A2阳性的人胃癌细胞株MKN-45,经60Co照射灭活后,制备成HG-1/IL-2。15例胃癌术后复发/转移患者入组。以5次接种为1疗程,接种时间分别在第1、8、15、29和58天,每次于一侧腹股沟和对侧腋部皮下注射。每次接种后严格观察不良反应,并在治疗开始前1周和治疗结束后进行免疫学指标和临床受益评价。结果除1例因疾病快速进展,在接种3次后死于多脏器功能衰竭外,余14例均完成5次接种。接种后发热和注射局部红肿、酸胀感是最常见的反应。治疗后未观察到患者血液、肝肾功能等指标的明显异常。部分患者治疗后血清转铁蛋白、免疫球蛋白(Ig)G、IgA、IgM、IL-2等体液免疫和CD3、CD4、CD8等细胞免疫指标有一定程度提高。4例获部分缓解,6例稳定,4例病情进展。结论IL-2基因修饰胃癌细胞瘤苗治疗耐受性好,部分患者体液和细胞免疫指标改善明显。该药物可作为辅助治疗手段,应用于胃癌术后复发转移的综合治疗。

IL-4基因修饰增强脑胶质瘤细胞毒性T淋巴细胞杀伤活性机制的探讨

目的 进一步探讨白细胞介素 4(IL 4)基因修饰瘤苗增强细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)杀伤活性的机制。方法 通过逆转录病毒载体PL IL 4 SN将人IL 4基因导入神经胶质瘤系SHG44细胞 ,以IL 4基因修饰瘤苗和野生型瘤细胞作刺激细胞诱导CTL反应 ,通过流式细胞仪检查瘤细胞表面分子的表达。结果 (1 )IL 4基因修饰诱导瘤细胞表达MHC Ⅱ类抗原、B7 1及ICAM 1等免疫刺激分子 ,对MHC I类抗原表达无影响 ,其瘤苗诱导的CTL杀伤活性为野生型瘤细胞的 7倍 (P <0 0 1 )。(2 )加入抗IL 4单抗可完全阻断IL 4诱导的细胞表面分子的表达 ,IL 4基因修饰瘤苗诱导CTL反应时培养上清可检测到大量IL 2的产生。抗IL 4或抗细胞表面分子单抗可降低IL 2产生及抑制CTL反应。结论 IL 4基因修饰可能是通过诱导MHC Ⅱ类抗原等表面分子表达 ,促进IL