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Smad3基因剔除小鼠的繁殖与基因型鉴定 被引量:5
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作者 孙岩松 吕雅歆 +4 位作者 时彦胜 战大伟 李文龙 张爱兰 杨晓 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第3期182-185,共4页
目的 为进一步深入研究Smad3基因在脊椎动物发育中的重要作用 ,对Smad3基因剔除小鼠进行保种和繁育研究。方法 采用基因剔除杂合子小鼠进行保种 ,通过PCR和Southern杂交对杂合子小鼠交配所产生的后代进行基因型鉴定 ,纯合子小鼠和野... 目的 为进一步深入研究Smad3基因在脊椎动物发育中的重要作用 ,对Smad3基因剔除小鼠进行保种和繁育研究。方法 采用基因剔除杂合子小鼠进行保种 ,通过PCR和Southern杂交对杂合子小鼠交配所产生的后代进行基因型鉴定 ,纯合子小鼠和野生型小鼠用于表型分析 ,杂合子小鼠用于留种和繁殖生产。结果 采用PCR方法对 2 78只子代小鼠进行了基因型鉴定 ,83只为野生型 ,133只为杂合子 ,6 2只为纯合子。结论 Smad3基因剔除突变能稳定遗传。采用杂合子小鼠保种 。 展开更多
关键词 Smad3基因剔除小鼠 杂合子 纯合子 SMAD3基因 子代 表型分析 野生型 保种 基因型鉴定 繁殖
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RIG-I基因剔除小鼠表型的初步分析 被引量:2
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作者 孙岳平 张丽君 +6 位作者 张梅 金月娥 柳子星 张洪信 陆顺元 孔辉 王铸钢 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期836-840,共5页
目的通过对视黄酸诱导基因Ⅰ(RIG-I基因)剔除小鼠表型的分析,在整体动物水平揭示RIG-Ⅰ的生物学功能。方法Northern blotting和半定量RT-PCR检测小鼠组织中RIG-I基因的表达;对小鼠的表型分析包括体质量的测量、外周血细胞分类计数、代... 目的通过对视黄酸诱导基因Ⅰ(RIG-I基因)剔除小鼠表型的分析,在整体动物水平揭示RIG-Ⅰ的生物学功能。方法Northern blotting和半定量RT-PCR检测小鼠组织中RIG-I基因的表达;对小鼠的表型分析包括体质量的测量、外周血细胞分类计数、代谢指标测定及病理组织学检查。结果RIG-Ⅰ在小鼠多种组织中广泛表达,但表达水平存在一定差异。RIG-Ⅰ基因剔除后,小鼠未见明显发育异常;无明显预期的粒系分化受阻表现;但RIG-Ⅰ基因剔除小鼠外周血相中的粒/淋比明显倒置,且对条件性致病菌易感。结论RIG-Ⅰ在小鼠抗细菌免疫过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 视黄酸诱导基因 细菌感染 基因剔除小鼠
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凝血因子Ⅸ基因剔除小鼠近交系的建立 被引量:1
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作者 郝光荣 孙伟 +4 位作者 胡卫江 陈立 崔淑芳 汤球 曹平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期200-202,共3页
目的 :建立可稳定遗传、临床症状显著的凝血因子 (F )基因剔除小鼠近交系。 方法 :以 PCR扩增检测小鼠尾组织 DNA,一期法检定小鼠血浆 F 活性和血浆凝血酶原时间 (PT)、白陶土部分凝血活酶时间 (KPTT)值 ;取以上结果为全阳性的小鼠以... 目的 :建立可稳定遗传、临床症状显著的凝血因子 (F )基因剔除小鼠近交系。 方法 :以 PCR扩增检测小鼠尾组织 DNA,一期法检定小鼠血浆 F 活性和血浆凝血酶原时间 (PT)、白陶土部分凝血活酶时间 (KPTT)值 ;取以上结果为全阳性的小鼠以选优法进行全同胞兄妹交配 ,每代选用第一胎小鼠留种 ,第 8代开始筛选纯合子。 结果 :F8代 F 基因剔除小鼠PCR检测阳性率 92 % ,到 F1 2 代小鼠阳性率达 10 0 % ;F 活性 (2 .4 7± 1.75 ) %较正常小鼠 (14 8.18± 4 6 .98) %明显降低 (P<0 .0 1) ;F 基因剔除小鼠已近交培育到第 12代 ,遗传性状稳定 ,并有自发出血倾向。结论 :成功建立了纯合子 F 基因剔除小鼠近交系 ,该小鼠符合人血友病 展开更多
关键词 凝血因子Ⅸ基因剔除小鼠 近交系 动物模型
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不同日龄Smad3基因剔除小鼠的脏器重量及脏器指数 被引量:16
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作者 李吉庆 李文龙 +7 位作者 王冬平 栾蓉晖 战大伟 孙岩松 时彦胜 杨晓 李桂军 张爱兰 《实验动物科学与管理》 2003年第1期11-13,共3页
实验选用不同年龄雌雄小鼠各 2 0只 ,剖检Smad3基因剔除小鼠 ,观察其大体解剖特征 ,测定其体重、脏器重量、脏器指数 ,统计比较结果。其结果是 35日龄Smad3基因剔除纯合型小鼠的体重及各脏器重量均低于其它两种表型 ,而心、肝、脾、胸... 实验选用不同年龄雌雄小鼠各 2 0只 ,剖检Smad3基因剔除小鼠 ,观察其大体解剖特征 ,测定其体重、脏器重量、脏器指数 ,统计比较结果。其结果是 35日龄Smad3基因剔除纯合型小鼠的体重及各脏器重量均低于其它两种表型 ,而心、肝、脾、胸腺的脏器指数高 ;70日龄Smad3基因剔除纯合型小鼠的体重、肝脏、脾脏、肾脏、卵巢、睾丸和附睾均低于其它两种基因型 ,而脏器指数是肝脏低 ,脾脏和胸腺高 ;Smad3基因剔除纯合型小鼠与野生型小鼠比较 ,具有其独特的特性 ,为该小鼠的应用提供一定的参考。 展开更多
关键词 Smad3基因剔除小鼠 脏器重量 脏器指数
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Smad3基因剔除小鼠的血液生理生化指标检测——35日龄Smad3基因剔除小鼠 被引量:8
5
作者 栾蓉晖 王冬平 +6 位作者 李吉庆 李文龙 战大伟 孙岩松 时彦胜 李桂军 张爱兰 《实验动物科学与管理》 2002年第2期10-14,共5页
对 35日龄的血液生理生化指标进行了检测 ,反映出日常生长繁殖中Smad3基因剔除小鼠性成熟时血液生理生化指标的变化。纯合型 (- - )小鼠的白细胞和血小板明显高于杂合型 (+ - )和野生型 (+ +)小鼠。各项生化指标三种表型之间方差分析CE... 对 35日龄的血液生理生化指标进行了检测 ,反映出日常生长繁殖中Smad3基因剔除小鼠性成熟时血液生理生化指标的变化。纯合型 (- - )小鼠的白细胞和血小板明显高于杂合型 (+ - )和野生型 (+ +)小鼠。各项生化指标三种表型之间方差分析CER、GPT、CL、CA、MC差异显著 ,其它指标均差异不显著。纯合型 (- - )的GLU、CK、UA、TG、GPT、GOT、BUN、LDH L指标高于野生型的小鼠 ;CRE、CA。 展开更多
关键词 Smad3基因剔除小鼠 血液生理生化指标 检测 35日龄
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凝血因子Ⅸ基因剔除小鼠的生长繁育和主要血液学指标观测 被引量:1
6
作者 孙伟 郝光荣 +5 位作者 崔淑芳 汤球 黄立志 曹平 卢大儒 王琪 《上海实验动物科学》 2002年第4期231-233,共3页
为研究凝血因子IX基因剔除小鼠的生长繁育和血液学指标等生物学特性,对种群中38窝母鼠所生仔鼠进行生长发育指标的测定,测其5、10、15、21、30、40、50、60日龄的体重、体长和尾长;测定交配种鼠的繁殖性能及发病时间和临床症状;部分小... 为研究凝血因子IX基因剔除小鼠的生长繁育和血液学指标等生物学特性,对种群中38窝母鼠所生仔鼠进行生长发育指标的测定,测其5、10、15、21、30、40、50、60日龄的体重、体长和尾长;测定交配种鼠的繁殖性能及发病时间和临床症状;部分小鼠的血液生理、生化值。结果表明,5、21日龄平均体重分别为3.70 g,3.44 g和11.12 g,10.35 g;初配至生产平均30.24d,产仔数5.39只,平均离乳率81.09%。小鼠发病时间30~90日龄不等,有出血症状;凝血因子IX基因剔除小鼠的血液成分指标与正常小鼠基本一致。 展开更多
关键词 血友病模型 凝血因子Ⅸ 基因剔除小鼠 生长 繁育 血液学指标
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Smad3基因剔除小鼠6月龄的生物学特性研究 被引量:1
7
作者 王冬平 李文龙 +7 位作者 孙岩松 栾蓉晖 战大伟 李吉庆 杨晓 时彦胜 李桂军 张爱兰 《实验动物科学与管理》 2002年第4期11-16,共6页
选用 6月龄Smad3基因剔除小鼠 ,称重、采血、解剖 ,检测其生理生化、体重、脏器重量及剖检的特性 ,其结果 :纯合型的MCH、CK、Tibil、GOT和LDH L ,及其肾上腺脏器指数差异显著 ;+ -的肾脏重量差异显著。不同基因型之间比较 :WBC、HCT、M... 选用 6月龄Smad3基因剔除小鼠 ,称重、采血、解剖 ,检测其生理生化、体重、脏器重量及剖检的特性 ,其结果 :纯合型的MCH、CK、Tibil、GOT和LDH L ,及其肾上腺脏器指数差异显著 ;+ -的肾脏重量差异显著。不同基因型之间比较 :WBC、HCT、MCHC、GLU、CHO、ALP、BUN、LDH L和CA ,及其体重、心脏、肝脏、肾脏、胸腺的脏器指数差异显著 ,并且纯合型的WBC、HCT、CK、CRE、GPT、GOT、ALP、BUN、LDH L较野生型和杂合型小鼠高 ,MCHC、GLU、CHO、MG、CA较野生型和杂合型小鼠低 ;杂合型的GOT、野生型的CK、ALP差异显著。 展开更多
关键词 Smad3基因剔除小鼠 6月龄 生物学特性 生理生化指标 脏器重量
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Smad3基因剔除小鼠的血液生理生化指标检测——70日龄Smad3小鼠 被引量:1
8
作者 战大伟 王冬平 +6 位作者 栾蓉晖 孙岩松 李吉庆 李文龙 时彦胜 李桂军 李爱兰 《实验动物科学与管理》 2002年第1期7-11,共5页
对成年 70日龄的Smad3基因剔除小鼠血液生理生化指标进行检测 ,结果只有少数指标雌雄之间差异显著 ,纯合型 (- - )小鼠的白细胞 (WBC)和血小板高于杂合型 (+ - )和野生型 (+ +)小鼠。各项生化指标三种表型之间方差分析CER、CK、UA、GOT... 对成年 70日龄的Smad3基因剔除小鼠血液生理生化指标进行检测 ,结果只有少数指标雌雄之间差异显著 ,纯合型 (- - )小鼠的白细胞 (WBC)和血小板高于杂合型 (+ - )和野生型 (+ +)小鼠。各项生化指标三种表型之间方差分析CER、CK、UA、GOT、TP、ALP、LDH L、MG、CA差异显著 ;纯合型 (- - )的CK、UA、TG、ALP、LDH L指标高于野生型的小鼠 ;GLU、P、MG、CA指标低。 展开更多
关键词 Smad3基因剔除小鼠 血液学 血液生化 指标
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γ-射线对Smad 3基因剔除小鼠免疫功能影响的初步分析 被引量:1
9
作者 崔玉芳 徐菡 +7 位作者 靳巍 姜竺君 董波 安晓霞 柳晓兰 吕雅歆 毛春明 孙启鸿 《感染.炎症.修复》 2006年第1期9-13,共5页
目的:观察5.0 Gyγ-射线全身照射对Smad 3基因剔除小鼠免疫组织和外周血淋巴细胞亚群的影响及其机制。方法:应用TUNEL和FCM方法观察照射后不同Smad 3基因型小鼠胸腺、脾脏、淋巴结和外周血淋巴细胞亚群和淋巴细胞凋亡率的变化。结果:(1... 目的:观察5.0 Gyγ-射线全身照射对Smad 3基因剔除小鼠免疫组织和外周血淋巴细胞亚群的影响及其机制。方法:应用TUNEL和FCM方法观察照射后不同Smad 3基因型小鼠胸腺、脾脏、淋巴结和外周血淋巴细胞亚群和淋巴细胞凋亡率的变化。结果:(1)照后Smad 3+/+、Smad 3+/-和Smad 3-/-三种基因型小鼠外周血WBC和淋巴细胞绝对数均迅速下降,直至照后10d均未恢复到对照组水平,而Smad 3-/-小鼠恢复速度较快。(2)三种基因型小鼠外周血CD3+细胞照后10d明显降低,分别约为对照组的40.2%、31.7%和49.3%,而CD8+细胞亚群的降低的更为明显,分别约为对照组的10.1%、10.6%和27.4%,Smad 3-/-小鼠降低的幅度小于Smad 3+/+和Smad 3+/-组。(3)小鼠胸腺和脾脏照射后T细胞亚群明显降低,而三种基因型小鼠中以Smad 3-/-小鼠各细胞亚群的降低幅度较小。(4)照后三种基因型小鼠CD19+细胞在免疫组织中降低的幅度不同,在淋巴结中CD19+细胞的降低更为明显。(5)照后小鼠淋巴细胞的凋亡率显著增加,然而无论是在外周血、胸腺,还是脾脏、淋巴结,三种基因型小鼠中均以Smad 3+/+淋巴细胞凋亡率的升高最为明显,而Smad 3-/-小鼠显示出相对的辐射不敏感性。结论:5.0 Gyγ-射线能诱发不同Smad 3基因型小鼠外周血和免疫组织淋巴细胞的明显凋亡,导致外周血WBC、淋巴细胞数量的明显减少和免疫细胞功能亚群的损伤;然而对多种指标观察的结果均首次表明, Smad 3基因敲除后导致了小鼠相对的辐射不敏感性,可能与TGF-β信号转导通路的抑制有关,其调节机制尚需进一步阐明。 展开更多
关键词 射线 基因剔除小鼠 免疫功能影响 外周血淋巴细胞亚群 基因 免疫组织 细胞凋亡率 淋巴结 对照组 小鼠胸腺 不敏感性 全身照射 信号转导通路 小鼠淋巴细胞 脾脏照射 免疫细胞功能 指标观察 细胞数量 基因敲除 恢复速度
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凝血因子IX基因剔除小鼠的遗传及血液学指标检测
10
作者 郝光荣 孙伟 +4 位作者 陈立 崔淑芳 汤球 黄立志 曹平 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2002年第4期233-235,共3页
目的 鉴定凝血因子IX基因剔除小鼠。方法 采用PCR扩增检测小鼠的DNA样品以及采用一期法检定小鼠血浆FIX活性和血浆凝血酶原时间 (plasmaprothrombintime ,PT)、白陶土部分凝血活酶时间 (Kaolinpartialthromboplastintime ,KPTT)值。... 目的 鉴定凝血因子IX基因剔除小鼠。方法 采用PCR扩增检测小鼠的DNA样品以及采用一期法检定小鼠血浆FIX活性和血浆凝血酶原时间 (plasmaprothrombintime ,PT)、白陶土部分凝血活酶时间 (Kaolinpartialthromboplastintime ,KPTT)值。结果 小鼠PCR检测为阳性 ,FIX活性 <5 %。结论 凝血因子IX基因剔除小鼠能稳定遗传 ,鉴定结果提示该小鼠符合人血友病B相应临床症状。 展开更多
关键词 白友病B 疾病模型 凝血因子Ⅸ 基因剔除小鼠 遗传 血液学指标 检测
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Smad3基因剔除小鼠特异性免疫功能的研究
11
作者 王冬平 栾蓉晖 +2 位作者 孙岩松 杨晓 李桂军 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2002年第3期148-150,共3页
目的 研究Smad3基因剔除小鼠的体液免疫和细胞免疫。方法 采用流式细胞仪对其细胞免疫和体液免疫进行检测 ;并且应用ELISA方法对IgG抗体的吸光度进行测定。结果 纯合型 (- - )小鼠CD8+ 、CD4 + CD8+ 、IgG雌雄之间差异有显著性 ;CD... 目的 研究Smad3基因剔除小鼠的体液免疫和细胞免疫。方法 采用流式细胞仪对其细胞免疫和体液免疫进行检测 ;并且应用ELISA方法对IgG抗体的吸光度进行测定。结果 纯合型 (- - )小鼠CD8+ 、CD4 + CD8+ 、IgG雌雄之间差异有显著性 ;CD4 + 、CD8+ 、CD3+ 、CD19+ 、IgG的值低于野生型 ;结论 CD4 + CD8+ 的比值同野生型比较属于异常 (与人的范围比较 )。因此 。 展开更多
关键词 Smad3基因剔除小鼠 特异性免疫功能 基因 免疫细胞 抗体生成
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DNA检测技术在基因剔除小鼠保种中的初步应用 被引量:3
12
作者 钱云 叶步青 +1 位作者 耿建国 徐平 《实验动物与比较医学》 CAS 2009年第2期124-126,共3页
目的针对基因剔除小鼠在饲养过程中出现母本繁殖困难,频频出现突发死亡等情况,对运用DNA检测技术进行辅助保种的可行性探讨。方法将本实验室饲养的P110(p110δPI3-Kinase)基因剔除小鼠的父本与其背景品系C57BL/6小鼠杂交,获得的... 目的针对基因剔除小鼠在饲养过程中出现母本繁殖困难,频频出现突发死亡等情况,对运用DNA检测技术进行辅助保种的可行性探讨。方法将本实验室饲养的P110(p110δPI3-Kinase)基因剔除小鼠的父本与其背景品系C57BL/6小鼠杂交,获得的杂交一代再进行自交,其后代通过DNA检测,分离出野生型(425bp)、杂合子型(425bp+602bp)和纯合子型(602bp),将得到的纯合子小鼠雌雄交配。结果经DNA鉴定获得了正常的P110小鼠,使该品系得以维持。结论对父母本一方发生繁殖困难或死亡的基因剔除小鼠,采用杂交.自交繁殖方式,结合DNA检测技术,可重建繁育群。 展开更多
关键词 P110基因剔除小鼠 杂交-自交 DNA检测
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Fah基因剔除小鼠在肝细胞移植中的应用及其病理学变化 被引量:2
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作者 苏宝亮 刘长城 +4 位作者 李帅 杨科 何志颖 胡以平 王欣 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期553-558,共6页
目的:观察外源成体肝细胞在Fah-/-小鼠肝脏中增殖的微观特性并对该小鼠模型肝脏损伤后的病理学变化进行研究。方法:野生型小鼠成体肝细胞经脾脏移植到Fah-/-小鼠后,观察移植Fah-/-小鼠的体重变化,生存状态及肝组织的Fah免疫组化和电镜... 目的:观察外源成体肝细胞在Fah-/-小鼠肝脏中增殖的微观特性并对该小鼠模型肝脏损伤后的病理学变化进行研究。方法:野生型小鼠成体肝细胞经脾脏移植到Fah-/-小鼠后,观察移植Fah-/-小鼠的体重变化,生存状态及肝组织的Fah免疫组化和电镜观察以评价再殖效率和病理学变化。结果:Fah-/-小鼠的肝HE染色显示为亚急性损伤的病理特点。电镜观察显示,初期肝细胞坏死,凋亡现象随时间增多,随后有凋亡和坏死并存。而Fah-/-小鼠在NTBC[2-(2-硝基-4-三氟甲基苯甲酰基)-环己烷-1,3-二酮]药物的治疗后,无明显病理学变化。肝细胞移植后的Fah-/-小鼠均健康存活,体重稳步上升。8周时可以达到90%以上再殖。肝脏生化指标恢复正常。结论:Fah-/-小鼠的肝脏损伤可以使移植的肝细胞90%以上的再殖,维持肝脏正常的组织结构,并发挥正常的肝细胞功能。Fah-/-小鼠作为肝脏再殖模型可用于干细胞肝向分化研究。 展开更多
关键词 Fah基因剔除小鼠 肝细胞移植 再殖
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Sumf2条件性基因剔除小鼠模型的建立及初步表型分析 被引量:1
14
作者 匡昉哲 庄华 +2 位作者 周涛 匡颖 王铸钢 《实验动物与比较医学》 CAS 2013年第6期425-432,共8页
目的建立Sumf2条件性基因剔除小鼠模型,为整体水平研究Sumf2基因的生物学功能创造条件。方法运用生物信息学,采用ET克隆、同源重组、显微注射等技术成功建立Sumf2条件性基因剔除小鼠模型,并通过该模型与Ella-cre转基因小鼠交配,获得... 目的建立Sumf2条件性基因剔除小鼠模型,为整体水平研究Sumf2基因的生物学功能创造条件。方法运用生物信息学,采用ET克隆、同源重组、显微注射等技术成功建立Sumf2条件性基因剔除小鼠模型,并通过该模型与Ella-cre转基因小鼠交配,获得Sumf2基因剔除小鼠模型,通过PCR、RT-PCR、WesternBlot等方法在不同水平验证Sumf2基因的表达;对该小鼠模型进行初步的表型分析。结果经胚胎干细胞打靶,获得19个正确同源重组的克隆,重组效率为20%:阳性克隆经囊胚注射,获得2只嵌合体雄鼠;嵌合雄鼠与C57BL/6J小鼠交配,获得28只灰鼠,经PCR鉴定16只为杂合子小鼠,阳性率为57%;与Ella—ere转基因小鼠交配,获得了Sumf2基因剔除小鼠模型,DNA、RNA及蛋白水平证明该基因已成功剔除;初步的表型观察未发现Sumf2基因剔除小鼠生长发育、血常规及血生化指标等出现异常改变。结论成功建立Sumf2条件性基因剔除小鼠模型,该基因纯合缺失未发现明显的生长发育异常,为进一步的基因功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 Sumf2基因 条件性基因剔除小鼠 表型分析
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Smad3基因剔除小鼠的基因型鉴定与繁殖性能研究
15
作者 孙岩松 吕雅歆 +5 位作者 王冬平 方厚华 时彦胜 战大伟 张爱兰 李桂军 《实验动物科学》 2003年第z1期129-130,共2页
The previous study of Smad3 gene knockout mice ( Smad3 ex8/ex8 )shows that the Smad3 ex8/ex8 mice develop progressive leukocytosis, periodontitis, gastritis, colitis and chronic infection with abscess formation adjace... The previous study of Smad3 gene knockout mice ( Smad3 ex8/ex8 )shows that the Smad3 ex8/ex8 mice develop progressive leukocytosis, periodontitis, gastritis, colitis and chronic infection with abscess formation adjacent to mucosal surfaces .symptomatic mutant mice exhibit thymic involution, enlarged lymph nodes and T cells with activated phenotype. Further study suggests that the thymic cells and peripheral T ceels of Smad3 ex8/ex8 mice have lost the response to TGF β.Furthermore, nwe found that the homologous Smad3 ex8/ex mice developed degenerative joint disease resembling human osteoarthritis, osteoporosis and wound healing up quicker. So the mice can serve as an ideal animal model for immune dysregulation, osteoarthritis and so on. To futher study the important role of Smad3 during the vertebrate development ,we charactered the genotype and reproduce the Smad3 knockout mice .Compare to the general experimental mice, the mice of genetic modifications is different in the breeding and reproduction. Besider the reproduction of inbred lines, we also must keep the mice inherit the mutant gene and consider the influence of mutant gene to the mouse’s reproduction. Using PCR and Southern blot to characterize the genotype of the offspring can solve the question .Just like the homozygote of Smad3 ex8/ex8 mice lacking fertility, the homozygous mice cann’t be used for propagating. We use the heterozygous mice for propagating, while the homozygous and wild type mice were used for phenotype analysis. The Smad3 ex8/ex8 heterzyous mice were used for breeding. With genotype being characterized, we found that the ratio of 3 genotype of the Smad3 ex8/ex8 heterzyous mice’ offsprings fits the Mendel’s laws. Their gestation is the sames as others mice,and embryo interval and litter are not different from others, We kept means of cryopreservation by vitrification of embryos and got normal conditions .Using the Smad3 ex8/ex8 heterzyous mice for propagating, we can be used for keeping breed and propagating. 展开更多
关键词 Smad3基因剔除小鼠 繁殖 基因型鉴定
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Cx43基因剔除小鼠心脏锥干部的异常发育 被引量:16
16
作者 赵晓晴 黄国英 +2 位作者 谢利剑 彭涛 周国民 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第38期2715-2718,共4页
目的探讨Cx43基因缺陷小鼠心脏锥干部发育异常。方法选用胚胎(embryon icday,E)11.5 d至出生后1 d C57/BL6小鼠作为研究对象,根据基因型分为Cx43基因剔除纯合子(Cx43-/-)、杂合子(Cx43+/-)及野生型(Cx43+/+),采用聚合酶链反应方法鉴定... 目的探讨Cx43基因缺陷小鼠心脏锥干部发育异常。方法选用胚胎(embryon icday,E)11.5 d至出生后1 d C57/BL6小鼠作为研究对象,根据基因型分为Cx43基因剔除纯合子(Cx43-/-)、杂合子(Cx43+/-)及野生型(Cx43+/+),采用聚合酶链反应方法鉴定基因型。免疫组化法测定横纹肌肌动蛋白α-SCA、平滑肌肌动蛋白α-SMA、神经嵴细胞的标志物AP-2α的表达;原位杂交方法检测AP-2αmRNA的表达。结果Cx43-/-出生后24 h内即死亡。大体解剖见明显的右室流出道圆锥部异常膨隆。HE染色示右心室流出道壁大量异常小梁状组织增生突起,右室流出道腔明显狭窄。Cx43+/-无明显异常。Cx43-/-近端流出道隔中央区域α-SCA的表达明显滞后。Cx43+/-与Cx43-/-小鼠右室流出道与Cx43+/+比较可见比较强的α-SMA的表达,主要位于右侧锥干部的异常增生部位。Cx43-/-小鼠在E13.5流出道隔AP-2α蛋白及其mRNA水平表达均增多,且表达位置异常。结论Cx43 KO小鼠以右室流出道异常增生引起的梗阻性畸形为主要特征。Cx43 KO小鼠胚胎期近端流出道隔心肌化迟滞。Cx43 KO小鼠锥干部α-SMA的表达不能正常消退,心肌细胞发育不成熟。神经嵴细胞的发育异常可能参与了Cx43基因缺陷小鼠锥干部畸形的发病机制。 展开更多
关键词 心脏缺损 先天性 室性流出道阻塞 连接蛋白43 基因表达调控 发育期 基因剔除小鼠 Cx43 异常发育 干部 心脏 右室流出道
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碱性鞘磷脂酶基因剔除鼠的基因型和表型特征 被引量:1
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作者 杨俐萍 朱顺星 +8 位作者 闵娅兰 刘焕良 钱红燕 陈橼 朱菁烨 邵晶晶 雒润华 李静 段瑞冬 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期495-499,共5页
目的为研究alk-SMase在结肠癌发生发展中的作用提供动物模型的实验数据。方法将野生型(WT,+/+)、杂合子(+/-)、纯合子(KO,-/-)alk-SMase基因剔除小鼠剪尾提取DNA,PCR法作基因型鉴定;取其肝肠组织进行HE染色、激光共聚焦分析以及质谱仪检... 目的为研究alk-SMase在结肠癌发生发展中的作用提供动物模型的实验数据。方法将野生型(WT,+/+)、杂合子(+/-)、纯合子(KO,-/-)alk-SMase基因剔除小鼠剪尾提取DNA,PCR法作基因型鉴定;取其肝肠组织进行HE染色、激光共聚焦分析以及质谱仪检测,观察和分析不同基因型鼠的表型特征。结果与WT和杂合子比较,KO鼠显示:外观和体重无明显区别;基因型鉴定出现一个条带,其分子量为247 bp;小肠黏膜明显增厚,但alk-SMase表达减弱;质谱分析显示在肠道和肝脏中的鞘磷脂含量增高,1-磷酸鞘氨醇含量增加,而神经酰胺含量降低。结论 alk-SMase KO鼠有明显特征,但其外观和体重与其他基因型比较没有明显区别,为研究alk-SMase的生物功能提供了一个理想的动物模型。 展开更多
关键词 碱性鞘磷脂酶 基因剔除小鼠 基因 表型
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后基因组时代的基因工程小鼠 被引量:12
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作者 胡以平 曾溢滔 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期117-119,共3页
基因工程小鼠是当今生命科学中集成度最高的综合性研究体系之一 ,在认识“基因 -蛋白质 -生命现象”、制备人类疾病研究的实验动物模型 ,以及新药开发的评价体系等领域中具有重要作用。随着生命科学中功能基因组学的兴起和模式生物时代... 基因工程小鼠是当今生命科学中集成度最高的综合性研究体系之一 ,在认识“基因 -蛋白质 -生命现象”、制备人类疾病研究的实验动物模型 ,以及新药开发的评价体系等领域中具有重要作用。随着生命科学中功能基因组学的兴起和模式生物时代的到来 ,使得生物医药研究对基因工程小鼠的需求日趋增加 ,同时也促使基因工程小鼠技术体系得到了快速的发展。然而 ,在基因工程小鼠的产生中 ,仍存在着一些问题。它们的解决 。 展开更多
关键词 基因工程小鼠 基因小鼠 基因剔除小鼠 基因替换小鼠
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斑马鱼leg1直系同源基因mu-leg1在小鼠中的表达谱分析 被引量:1
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作者 朱智慧 胡敏杰 +1 位作者 常长青 彭金荣 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1174-1180,共7页
基因leg1(liver-enriched gene 1)首先在斑马鱼中作为肝脏富集表达基因被鉴定。进一步的研究揭示leg1编码的Leg1蛋白代表一类新型外分泌蛋白,它在斑马鱼胚期肝脏生长发育过程中起关键作用。小鼠leg1(mu-leg1)是斑马鱼leg1(zb-leg1)的直... 基因leg1(liver-enriched gene 1)首先在斑马鱼中作为肝脏富集表达基因被鉴定。进一步的研究揭示leg1编码的Leg1蛋白代表一类新型外分泌蛋白,它在斑马鱼胚期肝脏生长发育过程中起关键作用。小鼠leg1(mu-leg1)是斑马鱼leg1(zb-leg1)的直系同源基因,二者编码的蛋白氨基酸序列相似性为31%。文章通过巢式PCR从成年小鼠肝脏中成功克隆了mu-leg1的cDNA序列,并对该基因在成年小鼠不同组织中的表达特征进行分析和鉴定。Northern印迹杂交和半定量RT-PCR分析结果显示,mu-leg1在成年小鼠小肠中而非肝脏中富集表达。此外,用制备的mu-Leg1多克隆抗体进行Western印迹杂交,结果显示mu-Leg1也是一个分泌蛋白。同时,还建立了mu-leg1基因条件性剔除杂合子小鼠。这些材料为今后深入研究和探讨mu-Leg1蛋白的生化功能奠定了基础。 展开更多
关键词 mu—leg1 重组蛋白 多克隆抗体 条件性基因剔除小鼠
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不孕症患者子宫内膜HOXA-11基因与雌、孕激素受体的检测 被引量:3
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作者 范俊 张师前 +2 位作者 栾少红 马慧敏 夏宝国 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2007年第4期470-471,共2页
关键词 HOXA-11基因 子宫内膜间质细胞 孕激素受体 直接检测 基因剔除小鼠 不孕症 子宫内膜组织 胚胎着床
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