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基因定位修复技术——嵌合修复术(chimeraplasty)
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作者 欧阳立明 张嗣良 刘志敏 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第3期322-325,共4页
传统的以病毒DNA为载体的基因治疗方法存在病毒导入的靶向性差、整合位点的特异性差、基因剂量的可控性差以及病毒载体具有一定的免疫原性的缺点 ,而实际上许多单基因遗传病只要将突变的单个碱基校正就能达到基因治疗的目的 ,不必置换... 传统的以病毒DNA为载体的基因治疗方法存在病毒导入的靶向性差、整合位点的特异性差、基因剂量的可控性差以及病毒载体具有一定的免疫原性的缺点 ,而实际上许多单基因遗传病只要将突变的单个碱基校正就能达到基因治疗的目的 ,不必置换或整合入整个基因 .嵌合修复术 (chimerplasty)是近年来迅速发展起来的一种基因定位修复技术 ,该技术利用RNA/DNA嵌合体分子与要修复的宿主染色体DNA碱基序列互补而精确定位并原位修复 ,也可用于人工定点突变 ,已在单基因遗传病的基因治疗及植物遗传改良等方面获得了成功的应用 .介绍了该技术的原理、应用举例及前景 . 展开更多
关键词 基因定位修复 基因治疗 嵌合修复
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Microsatellite Alterations on Chromosome 8 of Hepatocellular Carcinoma 被引量:1
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作者 张树辉 冼志红 +1 位作者 丛文铭 吴孟超 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2004年第1期5-10,64,共7页
Objective: To study the features of microsatellite alterations on chromosome 8 and their asso- ciation with clinicopathological characteristics of hepatocellular carcinoma (HCC). Methods: Ten highly- ... Objective: To study the features of microsatellite alterations on chromosome 8 and their asso- ciation with clinicopathological characteristics of hepatocellular carcinoma (HCC). Methods: Ten highly- polymorphic microsatellite markers on chromosome 8 were selected to be detected for loss of heterozygosity (LOH), microsatellite instability (MSI) and allelic imbalance (AI) in 56 HCC using MegaBACE 500 auto- matic DNA analysis system. Results: LOH was found in 37 of 56 HCC (66.1%) on at least 1 locus, and the top three loci were D8S261(53.5%), D8S1721(52.5%) and D8S1771(52.5%). LOH frequency on D8S277 was signi?cantly higher in cases positive for serum HBsAg than in those negative for HBsAg (P <0.01). Similarly, LOH on D8S261, D8S298 and D8S1733 occurred more frequently in patients with negative HB- sAg than those with positive HBsAg (P <0.01). LOH on D8S298 and D8S1771 was more frequent in those tumors larger than 3 cm in size (P <0.05 or P <0.01). LOH frequencies of D8S1721 were signi?cantly higher in the patients with absent or not intact tumor capsule than in those with intact tumor capsule (P <0.05). LOH on D8S298 and D8S1771 was more frequently detected in tumors with intrahepatic metastasis than in those without intrahepatic metastasis (P <0.01). MSI was found in 12.5% (7/56) cases, and AI was found in 19.6% (11/56), no correlation was found between MSI and AI and clinicopathological character- istics of HCC. Conclusion: Frequent microsatellite alterations on chromosome 8 existed in HCC. LOH, which represents tumor suppressor gene pathway, plays a more important role in hepatocarcinogenesis; MSI representing mismatch repair gene pathway ranks next. LOH at a particula locus is associated with the clinicopathological parameters of human HCC. 展开更多
关键词 liver neoplasms carcinoma hepatocellular loss of heterozygosity microsatellite instability allelic imbalance
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特殊设计的单链寡核苷酸链纠正TA102中组氨酸操纵子基因的点突变 被引量:1
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作者 孙难民 田海林 时锡金 《职业与健康》 CAS 2009年第5期459-461,共3页
目的研究应用特殊设计的单链寡核苷酸链(ODN)纠正点突变的方法。方法以Ames试验体系为基础,应用ODN纠正TA102中组氨酸操纵子基因的点突变。结果将ODN直接加入到正常状态下的细菌中检测不出有纠正率,而用CaCl2法将TA102制备成感受态细菌... 目的研究应用特殊设计的单链寡核苷酸链(ODN)纠正点突变的方法。方法以Ames试验体系为基础,应用ODN纠正TA102中组氨酸操纵子基因的点突变。结果将ODN直接加入到正常状态下的细菌中检测不出有纠正率,而用CaCl2法将TA102制备成感受态细菌后可以得到一定的纠正率(10-5)。结论ODN能够纠正TA102中组氨酸操纵子基因的点突变,可以建立起以Ames试验体系为基础的研究寡核苷酸链纠正点突变的实验方法。 展开更多
关键词 单链寡核苷酸链 TA102 基因定位修复
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应用特殊设计的单链寡核苷酸链纠正TA102中组氨酸操纵子基因的点突变
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作者 孙难民 田海林 张玉富 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期153-156,共4页
应用特殊设计的寡核苷酸链纠正点突变这一技术是通过引入的特殊设计的寡核苷酸链激发,利用机体本身原有的修复机制进行的基因修复,修复后的基因仍受原来的相关调控表达元件控制,是治疗由点突变引起的遗传病的理想方法。学者们应用DNA/RN... 应用特殊设计的寡核苷酸链纠正点突变这一技术是通过引入的特殊设计的寡核苷酸链激发,利用机体本身原有的修复机制进行的基因修复,修复后的基因仍受原来的相关调控表达元件控制,是治疗由点突变引起的遗传病的理想方法。学者们应用DNA/RNA嵌合性的寡核苷酸链(RDO)已经成功地纠正了酵母菌,植物细胞和哺乳动物细胞的基因点突变,包括体内和体外的实验[1-5]。然而其纠正率的报道相差甚远, 展开更多
关键词 单链寡核苷酸链 TA102 基因定位修复 链偏性
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应用特殊设计的单链寡核苷酸链纠正抗肌萎缩蛋白基因的点突变的研究
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作者 孙楷城 田海林 《职业与健康》 CAS 2013年第12期1412-1414,共3页
目的探讨使用特殊设计的单链寡核苷酸链(ODN)纠正抗肌萎缩蛋白基因的点突变。方法给予DMDmdx小鼠肌内注射低剂量和高剂量的ODN,以及另外附加透明质酸酶预处理和活体电穿孔术,采用扩增阻滞突变体系(ARMS)法检测点突变纠正情况。结果不管... 目的探讨使用特殊设计的单链寡核苷酸链(ODN)纠正抗肌萎缩蛋白基因的点突变。方法给予DMDmdx小鼠肌内注射低剂量和高剂量的ODN,以及另外附加透明质酸酶预处理和活体电穿孔术,采用扩增阻滞突变体系(ARMS)法检测点突变纠正情况。结果不管是低剂量和高剂量ODN肌内注射,还是在此基础上另外再附加电穿孔术,都看不到纠正了的基因条带。结论使用的实验方法不能纠正抗肌萎缩蛋白基因的点突变或纠正率过低ARMS法检测不出。 展开更多
关键词 单链寡核苷酸链 点突变 抗肌萎缩蛋白基因 基因定位修复
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基于Ames试验的寡核苷酸链纠正点突变新试验体系的建立
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作者 孙难民 田海林 时锡金 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期237-240,共4页
Igoucheva等[1]前期主要使用DNA/RNA嵌合型的寡核苷酸链(RDO),但后来发现单链DNA寡核苷酸链(ODN)也有同样的功能,而且ODN更容易合成和纯化,因而逐渐转向ODN对基因点突变的研究。然而该技术的机制尚不清楚,报道的突变纠正率也不一... Igoucheva等[1]前期主要使用DNA/RNA嵌合型的寡核苷酸链(RDO),但后来发现单链DNA寡核苷酸链(ODN)也有同样的功能,而且ODN更容易合成和纯化,因而逐渐转向ODN对基因点突变的研究。然而该技术的机制尚不清楚,报道的突变纠正率也不一致。学者们使用了不同生物材料, 展开更多
关键词 单链寡核苷酸链 TA102 基因定位修复 AMES试验
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