牛胰蛋白酶制备工艺的改进及其对基因工程人胰岛素前体的酶切作用

目的对牛胰蛋白酶制备工艺进行改进,制备高纯度牛胰蛋白酶,并对其酶切基因工程人胰岛素前体的作用进行考察。方法采用粗制后先色谱分离再活化的方法对传统工艺进行改进,对传统工艺制备样品和改进工艺制备样品中的胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的比活力进行测定和比较;进一步采用这2种样品对基因工程人胰岛素前体进行酶切,对酶切作用进行比较。结果传统工艺制备样品中胰蛋白酶比活力为212.5 U·mg-1,胰凝乳蛋白酶比活力为20.4 U·mg-1;而改进工艺样品中胰蛋白酶比活力为240.4 U·mg-1,胰凝乳蛋白酶比活力为0.14 U·mg-1。传统工艺制备样品酶切基因工程人胰岛素前体目标产物纯度质量分数为16.3%,改进工艺制备样品酶切基因工程人胰岛素前体目标产物纯度质量分数为32.2%。结论粗制后先进行SP色谱可实现胰蛋白酶原和胰凝乳蛋白酶原较好的分离,该方法适合于高纯度胰蛋白酶的制备,制备的胰蛋白酶适合作为工具酶进行基因工程人胰岛素前体的酶切。

上海一批基础科研成果达国际先进水平

中国科学院上海分院不断调整科研结构,分流一批科研人员进入产业领域,集中精兵强将和财力攻克科研难关,使一大批基础研究项目达到国际领先水平.中科院上海分院的15家科研机构,近几年承担国家“863”科研项目、自然科学基金项目和其它基础研究项目200多个.这批项目对国家建设和提高我国科技界的国际威望影响极大.经过多年攻关,去年已有40多项成果达到或领先国际水平.一些高技术项目与国际水平相比已高出一筹.上海有机所完成的合成氟里昂代用品,大大超过国外同类型催化剂性能指标;上海生化所承担的“人表皮生长因子基因工程研究”,“基因工程人胰岛素研制”,使我国的生物工程技术步入国际前沿阵地;上海技术物理研究所建立了我国第一个红外焦平面研究与评价实验室,去年这里开展的红外技术研究已进入世界前列;上海光机所的“线聚焦,激光与等离子体相互作用研究”工作,在理论分析与实验方法等方面取得一系列国际首创成果.