鸡传染性喉气管炎重组鸡痘基因工程疫苗免疫效果试验

用鸡传染性喉气管炎重组鸡痘基因工程疫苗、英特威鸡传染性喉气管炎弱毒疫苗分别免疫鸡群后,观察接种反应并做免疫保护力试验。结果表明,鸡传染性喉气管炎重组鸡痘基因工程疫苗几乎没有接种反应,基因工程疫苗与英特威疫苗对ILT免疫保护率是相同的。一般鸡群通过两次的疫苗免疫接种5个月后,对ILT的免疫保护率能够达到100%。通过对鸡传染性喉气管炎重组鸡痘基因工程疫苗田间试验和区域试验结果表明,用该疫苗免疫鸡群,不仅接种反应小、安全、能有效地防止ILT的发生,而且由于鸡群几乎没有接种反应,育成期死淘率低,鸡群生长发育整齐,在产蛋期能表现优良的生产性能。

接种传染性法氏囊病基因工程重组亚单位油乳剂疫苗的产蛋鸡血清抗体与蛋黄抗体的相关性分析

用笔者研制的传染性法氏囊病(IBD)基因工程重组亚单位油乳剂疫苗免疫产蛋鸡,接种后第22d及以后每周进行一次无菌采血,分离血清,用琼脂免疫扩散试验(AGID)检测IBD血清抗体水平;每周用同样的方法检测蛋黄中IBD抗体水平。对血清抗体水平和蛋黄中抗体水平进行相关性统计分析,得出两者之间的相关系数,并进行显著性检验。统计分析结果表明,相关系数r=0.7782,表明血清抗体水平和蛋黄中抗体水平相关关系属于强正直线相关;t值为14.02,t>t(∞)=2.576,差异极显著(P<0.01),即血清抗体水平和蛋黄中抗体水平之间的相关系数极显著;F值为190.55,F>F0.01(1,128)=6.84,差异极显著(P<0.01),即血清抗体水平和蛋黄中抗体水平之间的相关关系极显著。

抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗同居感染试验

疫苗的接触传播是疫苗免疫接种需要考虑的重要因素,为了检测重组鸡痘病毒载体疫苗水平传播的能力,对隔离条件下饲养的SPF鸡用重组鸡痘病毒基因工程疫苗接种,同时设立非免疫对照鸡,饲养期间特意延长清粪时间以增加感染的机会,1个月之后攻击传染性喉气管炎WG株强毒和鸡痘102株强毒,疫苗免疫鸡全部获得保护,而非免疫鸡则全部发病。在试验动物饲养场的自然条件下,将免疫鸡和试验对照两组鸡饲养在同一个鸡舍内,让疫苗毒的传播更接近自然条件。在每个月的攻毒试验中,对照鸡都没有获得对鸡痘和传染性喉气管炎强毒的保护。在疫苗免疫期间进行连续5个月的跟踪检测,同居未免疫鸡没有检测到抗传染性喉气管炎病毒gB抗体。这些实验结果表明抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗不能通过接触传播。

抗传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗

前言 1925年鸡传染性喉气管炎(Infectious Laryngotracheitis,ILT)首次发生于美国洛岛,是鸡的一种病毒性呼吸道传染病,该病可引起鸡死亡和产蛋下降,目前在多数国家仍有流行,对养禽业造成了严重的危害.疫苗接种是防制本病的一条切实可行的措施.目前,国内外用于预防ILT的都是中强毒力的活疫苗,这些疫苗毒力普遍偏强,接种后反应大.这些疫苗与强毒株一样也能导致持续感染,在鸡体间传播可使毒力返强,使免疫鸡群有可能成为潜在的传染源.而且疫苗免疫后没有一个有效的诊断方法以区别免疫鸡和自然感染鸡,因此,这些疫苗只能限于在传染性喉气管炎流行地区使用.

1日龄雏鸡免疫鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗安全性及效力的研究

将鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗以皮下注射和皮下刺种2种不同免疫途径免疫1日龄雏鸡,评价其安全性和效力。以10羽份/只剂量接种后,两组鸡均未观察到全身反应。以1羽份/只剂量接种后28d攻毒,两种免疫方式均可以使免疫鸡产生较强免疫力,能够抵抗传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株强毒和鸡痘病毒(FPV)102株的攻击。以上结果显示,鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗以皮下注射和皮下刺种2种不同途径免疫1日龄雏鸡,具有良好的安全性和有效性。

鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗冻干工艺探索

为筛选出理想的鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗的冻干工艺,保证疫苗产品质量及免疫效果,更好地服务于畜牧业。本试验从冻干保护剂配方与冻干曲线入手,将含有0.8%、1.0%、1.2%、1.5%的明胶5%蔗糖保护剂分别与表达鸡传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒(rFPV_ILTVgB)抗原按规定配比,分别在21、24.5、28 h的冻干曲线下完成冻干,并对冻干后的制品检测其效价、真空度、剩余水分及物理性状。结果表明,有1.0%明胶5%蔗糖保护剂24.5 h或28 h冻干曲线和1.2%明胶5%蔗糖保护剂28 h的冻干曲线三种冻干工艺,其制品效价、真空度、剩余水分、物理性状均符合标准。因而采用1.0%明胶5%蔗糖的保护剂配方及24.5 h的冻干曲线是该制品较为理想的冻干工艺。

表达马立克氏病病毒gI基因的重组鸡痘病毒的构建

以马立克氏病病毒 (MDV) 648株基因组DNA为模板 ,用PCR方法扩增 gI基因 ,将其插入到鸡痘病毒转移载体pFG1 1 75 1 ,通过脂质体方法转染鸡痘病毒 (FPV)感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF) ,用蓝斑筛选方法纯化 4次 ,得到重组FPV ,用PCR方法证实 gI已插入到FPV基因组中 ,以间接免疫荧光试验鉴定重组FPV在CEF中表达了 gI基因 ,重组FPV命名为rFPVMDV648gI。

粘膜免疫戊型肝炎试验性疫苗的研究

采用原核表达的戊型肝炎病毒结构区基因(HEVORF2)编码蛋白,与新型人用疫苗佐剂类MF59配制成试验性疫苗,通过粘膜免疫途径免疫实验小鼠,研究其产生粘膜免疫和体液免疫的效果。结果表明,通过滴鼻和灌胃两种粘膜免疫途径免疫BALB/c小鼠,均能诱导小鼠产生针对HEVORF2试验性疫苗的血清IgG和IgA,血清IgG的抗体滴度为1∶800～1∶1600,血清IgA抗体滴度为1∶100～1∶200。对免疫小鼠血清中IgG的动态观察表明,血清抗体可持续存在至少6个月以上。比较类MF59佐剂和传统铝盐佐剂经注射免疫所诱导产生的血清IgG抗体滴度,发现类MF59佐剂可有效增强HEVORF2重组蛋白的免疫原性4倍左右。类MF59佐剂可诱导粘膜免疫反应,在肠道粘膜部位产生SIgA,滴度为1∶100。这些结果为新型戊型肝炎病毒基因工程重组疫苗的研制提供了一条新的思路。

乙肝疫苗接种后人群免疫应答情况追踪调查

目的对乙肝疫苗接种后无、弱应答者加强免疫后的效果进行分析。方法选取7~17岁的在校学生(剔除乙肝病毒携带者及抗-HBS阳性者)为研究对象,共计450名(男243名,女207名),分为小学组7~11岁、初中组12~14岁、高中组15~17岁共3个年龄组。对3组学生全部给予10 ug/(支·次)重组基因工程乙肝疫苗按0、1、6接种程序三角肌注射,结束后检测乙肝病毒表面抗体,表面抗体阴性的学生隔3月后进行第二轮大剂量20ug/次(小学组10ug/次)重组基因工程乙肝疫苗注射按0、1、6接种程序肌肉注射。结果 450名受检对象调查中发现,第一次接种完成后抗-HBS阳性270名,阳性率为60.00%;第二次对阴性中小学生以20 ug/次(小学组10 ug/次)接种完成后检测抗-HBS阳性108人,阴性72名,阳性率为60.00%;二次接种后抗-HBS阳性率84.00%。不同年龄组学生抗-HBS阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。结论初免后抗-HBs为阴性者应按0、1、6月3针加大剂量再次复种,对于无应答者加强可获得保护效果。对无应答人群通过加大剂量复种确实能提高免疫应答率。

乙肝免疫球蛋白与乙肝疫苗联合预防乙肝病毒母婴传播效果观察

目的 观察高效价乙肝免疫球蛋白与乙肝疫苗联合预防乙肝病毒母婴传播的效果。方法将 5 8名HBsAg阳性孕妇分成两组 ,预防组 31例 ,自孕 2 8周起 3次注射乙肝免疫球蛋白 (HBIG)与乙肝疫苗 (HBVac) ;对照组 2 7例 ,不予免疫注射。结果 预防组新生儿HBsAg阳性率 ( 3.2 % )明显低于对照组 ( 2 5 .9% ) ,P <0 .0 5 ;预防组新生儿抗 -HBs阳性率 ( 38.7% )显著高于对照组 ( 7.4% ) ,P <0 .0 1。结论 乙肝免疫球蛋白与乙肝疫苗联合免疫可有效地阻断乙肝母婴传播。