组织Gene-xpert MTB/RIF基因检测技术在结核病诊断中的应用研究

目的:探讨组织Gene-xpert MTB/RIF基因检测技术在结核病诊断中的应用价值。方法:选择2022年6月至2024年2月我院收治的130例疑似结核病患者作为研究对象,取研究对象晨间痰液样本分别进行痰涂片镜检、罗氏固体培养检测、支气管黏膜组织、胸膜组织Gene-xpert MTB/RIF基因快速检测。以罗氏固体培养检测结果为金标准,分析痰涂片镜检与不同组织Gene-xpert MTB/RIF基因快速检测对结核病诊断结果的一致性;比较不同检查方式对结核病诊断效能的差异。结果:罗氏固体培养检测发现130例疑似结核病患者中,确诊为结核病的患者共72例,非结核病患者共58例,阳性率与阴性率分别为55.38%、44.62%。Kappa检验分析结果显示,痰涂片镜检与胸膜组织Gene-xpert MTB/RIF基因快速检测对结核病的诊断结果与临床实际结果均存在一般的一致性,而支气管黏膜组织Gene-xpert MTB/RIF基因检测对结核病的诊断结果与临床实际结果有较高的一致性(Kappa值分别为0.679、0.722、0.925)。支气管黏膜组织Gene-xpert MTB/RIF基因检测对结核病的诊断效能数据明显高于胸膜组织检测与痰涂片镜检(P<0.05)。结论:支气管黏膜组织Gene-xpertMTB/RIF基因检测技术在结核病诊断中的应用更好,可为结核病的临床诊断提供更为准确的数据参考,对后续治疗方案的及早制定与实施均具有指导意义。

无创产前基因检测技术对胎儿染色体非整倍体异常高风险的检出分析

目的 分析无创产前基因检测技术对胎儿染色体非整倍体异常高风险的检出情况。方法 非随机选取2023年5月—2024年1月泰安市中心医院1 257例经进行羊水染色体核型检查的孕妇为研究对象,应用无创产前基因检测技术检查,统计无创产前基因检测技术检查结果和各类性染色体异常的检出数量,以羊水染色体核型分析为金标准,分析无创产前基因检测技术与其符合率。结果 以羊水染色体核型为金标准,检出18例阳性、1 239例阴性。无创产前基因检测技术检查诊断的准确度、灵敏度、特异度为99.84%(1255/1 257)、88.89%(16/18)、100.00%(1 239/1 239),与羊水染色体核型的Kappa值为0.940。结论 无创产前基因检测技术在筛查胎儿异常时具有较高的准确性和可靠性,可以帮助医护人员更早地发现可能存在的胎儿异常。

转基因生物育种现状及其检测技术研究进展

随着转基因技术在农业生产中的发展和使用,转基因作物及其产品的类型和数量也在不断增长,在此背景下,转基因生物安全问题也受到了公众的高度重视,加强对转基因生物检测技术进行研究,并判断其未来发展趋势、优化技术及标准。从转基因生物育种产业化发展现状、转基因生物检测技术发展现状入手,通过介绍转基因成分的检测方法、转基因生物检测技术标准化,全面总结了转基因生物育种现状及其检测技术研究进展。

无创产前基因检测技术对产前筛查指标异常孕妇的应用价值

本研究的主要目的是评估无创产前基因检测技术(NIPT)在产前筛查中对于指标异常孕妇的实际应用价值。方法 通过对比500例孕妇(分为观察组和对照组,每组250例)分别采用无创产前DNA检测和唐氏筛查的结果,结果 发现无创产前DNA检测的阳性率(0.04%)显著低于唐氏筛查(0.12%)。同时,无创产前DNA检测的诊断准确率(96.00%)明显高于唐氏筛查(88.00%),且差异具有统计学意义(X2=10.8664,P=0.0064)。因此,无创产前基因检测技术为产前筛查提供了一种更为准确、可靠的方法,对确保母婴健康具有重要意义。无创产前DNA检测组并发症率为0%,明显低于唐氏筛查组4%,差异具有统计学(X2=10.2064,P=0.0064)。结论 无创产前基因检测技术对于诊断21-三体综合征和18-三体综合征,具有较高的诊断准确率,假阳性率低,无并发症,具有很高的临床应用价值。

转基因产品检测技术标准存在的问题及建议

简述了目前转基因生物及产品检测技术标准中存在的问题,针对这些问题提出了合理化建议,以期对转基因生物及产品检测技术标准的制、修订有一定的参考价值。

基因检测技术在食品物种鉴定中的应用

食品安全关系国计民生,食品物种鉴定是食品安全链的重要环节。基因检测技术的发展使食品物种鉴定变得更加快速、准确、灵敏。本文对近十年来国内外采用基因检测技术进行食品物种鉴定的研究和应用情况进行了总结和分析,包括基因检测技术的特点、主要方法及其在动物源性食品、植物源性食品、高附加值食品和深加工食品分析中的应用以及未来的发展。

基于低深度测序的无创产前基因检测技术对胎儿染色体拷贝数变异的检测效能评估

目的:探讨低深度测序的无创产前基因检测技术(NIPT)在胎儿染色体拷贝数变异(CNV)中的检测情况及临床意义。方法:抽取2017年9月至2019年5月所选873例孕妇的血浆,通过低深度测序方法对随机重排的样本进行盲法检测,并采用基因拷贝数变异分析算法(FCAPS)鉴定胎儿CNV。对比核型分析及染色体微阵列分析(CMA),评估低深度测序下NIPT对胎儿CNV的检测效能。结果:48例染色体微缺失/微重复(大小约0.1~47 Mb)样本中,与低深度(0.51~1.19X)测序的NIPT检测结果一致的有32例,结果不一致的有16例,另正常样本组有21例假阳性样本。NIPT对CNV总的敏感度和特异度分别为66.67%和97.45%,特别是对>2 Mb的CNV,其敏感度和特异度分别高达85.29%和98.18%。结论:基于低深度测序的NIPT对>2 Mb的CNV具有高效能。在NIPT中应用优化的检测和信息分析方法进行胎儿CNV的产前筛查是可能的。

靶标抗性点突变基因型检测技术

杀虫剂的不合理使用导致害虫的抗药性日趋严重。抗药性是一种涉及一个或几个昆虫基因的遗传特征。靶标抗性通常与点突变相关,对抗性相关的点突变的快速检测诊断是抗性治理的基础之一。评述了5种基因型检测技术———单链构象多态性、固相微型测序、双向等位特异PCR扩增、实时荧光定量PCR和焦磷酸测序的优缺点及其在突变检测中的应用。

DNA基因检测技术在微生物采油中的应用

针对微生物采油矿场试验效果波动性大,成功与失败要因不清,菌种油藏适应能力、增产效果及应用潜力难以确定等实际问题,开发建立了菌种DNA基因检测技术。为考察研究目的菌的属种、含量、纯度、油藏适应性、采油性能矿场应用潜力等实验研究,提供了有效的技术手段。通过油井吞吐、清蜡、微生物驱等矿场试验,目的菌种基因跟踪检测的系统分析,说明了影响和制约矿场试验各环节的主要因素,为调整技术工艺、优化方案设计、把握试验进程提供了依据;为微生物采油技术的深入研究和矿场大规模应用指明了方向。

H7N9禽流感病毒基因检测技术研究进展

2013年3月在上海和安徽两省市率先发现人感染H7N9禽流感病例,现已累计报告数百例病例。H7N9禽流感病毒因其对人类的高致病性和迅速的传播速度引起全球的广泛关注。快速、准确的检测对H7N9禽流感的疫情监测和控制极为重要。该文就目前应用于H7N9禽流感病毒研究中的基因检测技术(包括聚合酶链反应、环介导等温扩增、基因芯片、液相芯片、依赖核酸序列扩增法、高通量测序等)的研究进展予以综述。

基因芯片检测技术与基因测序技术在遗传性耳聋产前诊断中的联合应用

耳聋是最常见的出生缺陷之一。60%的先天性耳聋伴有一定程度的遗传性因素。利用常规听力物理筛查手段并不能够解决日益增多的迟发性、渐进性和药物敏感性耳聋的诊断及干预治疗。基因检测技术能够准确定位致病基因突变位点,了解疾病形成机理,有针对性地干预治疗和预防疾病发生。对于中国人群耳聋致病基因特异性研究表明,GJB2、GJB3、SLC26A4（PDS）、12s rRNA是主要的耳聋致病基因。本研究在遗传性耳聋产前诊断中联合应用基因芯片检测技术与基因测序技术，现将结果报告如下。

线性探针技术和传统基因检测技术在耐药结核病诊断中的可靠性和及时性对比

目的探讨线性探针(MTBDR plus)技术和传统基因检测技术在耐药结核病诊断中的可靠性和及时性。方法同时采用MTBDR plus技术、核酸扩增检测技术和传统药敏实验方法对2014年1月至10月期间我院收治的246例涂阳肺结核患者的痰标本进行利福平和异烟肼耐药性的检测。以传统药敏实验检测结果为金标准,分析MTBDR plus技术和核酸扩增检测技术诊断耐药结核病的准确性,并比较MTBDR plus技术和核酸扩增出报告时间。结果 MTBDR plus技术检测所得利福平耐药结核病发生率、异烟肼耐药结核病发生率和耐多药结核病发生率分别为5.28%、7.32%和3.66%,和传统药敏实验检测所得的5.69%、6.91%和3.66%比较差异均无统计学意义(P>0.05)。核酸扩增检测技术检测所得利福平耐药结核病发生率、异烟肼耐药结核病发生率和耐多药结核病发生率则均低于传统药敏实验检测所得结果,差异有统计学意义(P<0.05)。MTBDR plus技术检测利福平耐药、异烟肼耐药和耐多药的敏感度、Kappa值均高于核酸扩增检测技术,差异有统计学意义(P<0.05)。MTBDR plus技术平均出报告时间为(1.26±0.58)d,显著低于核酸扩增的时间(8.89±1.08)d,差异有统计学意义(P<0.05)。结论线性探针技术较传统基因检测技术可更及时、准确地诊断耐药结核病。

基因重排检测技术联合玻璃体液中IL-10和IL-6检测对PIOL的诊断价值

目的:研究基因重排检测技术联合玻璃体液中白介素-10(IL-10)、白介素-6(IL-6)细胞因子检测对原发性眼内淋巴瘤(PIOL)的诊断价值。方法:研究对象为本院2015-01/2019-12收治的拟诊断为PIOL患者27例的临床资料,经诊断性玻璃体切割术病理检查确诊PIOL患者21例,葡萄膜炎6例;回顾性分析其基因重排检测结果及玻璃体液中IL-10、IL-6水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析基因重排检测技术、玻璃体液中IL-10、IL-6水平及两者联合对PIOL的诊断价值。结果:纳入的21例PIOL患者中,15例IhH FR2单克隆性重排序列,阳性率为71%(15/21);4例检出TCRG克隆性基因重排序列;经ROC曲线分析显示基因重排检测技术诊断PIOL的曲线下面积值(AUC)为0.857,敏感性、特异性分别为71.43%、100.00%;PIOL患者玻璃体液中IL-10及IL-10/IL-6水平均显著高于葡萄膜炎患者,但两种病变患者IL-6水平无差异(P>0.05);经ROC曲线分析显示IL-10诊断PIOL的AUC值最高,以170.90pg/mL为IL-10的cut-off,其诊断PIOL的敏感性、特异性分别为66.67%、100.00%;而以1.95为IL-10/IL-6比值的cut-off,其诊断PIOL的敏感性为52.40%、特异性为100.00%;基因重排检测技术联合玻璃体液中IL-10、IL-10/IL-6水平检测诊断PIOL的AUC为0.893,敏感性、特异性分别为95.24%、83.33%。结论:单一基因重排检测技术诊断PIOL敏感性欠佳,联合玻璃体液中IL-10、IL-6水平检测可获得更佳的诊断敏感性,且特异性良好。

宏基因组检测技术在新生儿感染病原检测方面的应用

宏基因组检测技术(metagenomic next-generation sequencing,mNGS)又被称为二代测序或下一代测序技术,是基于高通量测序以及生物信息学分析进行的检测,能直接从环境/临床样品中提取全部微生物的DNA或RNA,并进一步与各个物种的基因组序列比对,准确高效地分析全部病原微生物的遗传物质信息,不仅可以对细菌进行鉴别和分类,还可以检测病毒、真菌和寄生虫等其他病原体。一旦发现病原体的基因组序列,还可实现有关溯源、耐药性、毒力等多种分析[1]。近年来mNGS技术不断发展,在病原检测、病原生物学特征及分子流行病学分析中展现了独特的技术优势和广阔的应用前景,对新生儿感染性疾病的诊断和治疗具有重要参考值[2-3]。

高深度全基因组测序技术的产前应用进展

全基因组测序(whole genome sequencing,WGS)是一种新兴的基因检测技术,其原理为基于二代测序,使用合适的测序深度对人体基因组进行全范围的测序,分析其遗传信息,有检测类型全面、基因组覆盖度高、测序流程误差少等优点。但由于其检测成本较高、产出数据量大、测序数据分析复杂等特点,在临床中的实际应用仍较少,目前主要针对临床罕见病进行病因探索研究,在产前诊断领域中的应用尚不成熟。由于产前诊断领域对检测技术的准确性和时效性要求较高,产前有对胎儿遗传病进行全面筛查的需求,近年来逐渐有研究尝试在产前诊断领域使用高深度WGS作为诊断方法,以探索其是否有作为产前诊断手段的潜力及优势,本文收集了目前国内外发表的产前WGS队列研究,浅论其在产前诊断中的应用进展。

平行等位基因特异序列检测技术对低比率乙型肝炎病毒耐药突变位点的检测

目的评价应用平行等位基因特异性序列检测技术(parallel allele-specific sequencing,PASS),对乙型肝炎病毒(HBV)进行耐药突变位点检测效果。方法应用PASS方法对17例未经抗病毒治疗和50例经抗病毒治疗失败的乙肝患者血浆进行耐药突变检测,其中50例乙肝抗病毒治疗失败的患者血浆同时采用测序法进行耐药分析。结果 17例未接受抗病毒治疗的患者样本中有8例检测到低比率的耐药突变位点(0.04%～16.89%),9例未发现有耐药突变。50例抗病毒治疗失败患者标本有7例PASS法和测序都未检测到耐药突变,16例PASS法检测到低比率耐药突变(0.03%～5.95%),测序法未检测到任何突变位点,27例PASS法和测序法都检测到了耐药突变(36%～100%)。应用PASS法进行连锁分析表明当多个耐药突变位点以高比率在同一患者体内检测到时,它们多以连锁的关系存在于同一病毒基因组。结论 PASS方法对检测HBV感染个体中耐药病毒群具有高度的灵敏性和特异性,并能对多个耐药突变位点进行连锁性分析。

转基因植物检测技术的发展

随着植物基因工程的发展,转基因植物及其产品的安全性问题受到社会各界的关注,而各国政府建立的转基因标识制度能否顺利实行的关键就在于能否建立准确可靠的转基因检测技术。本文对目前常用的检测方法及其发展状况做了概述。

体细胞HPRT基因位点突变检测技术及其在电离辐射研究中的应用

次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 (HPRT)基因在单基因突变的研究中是一个经典的基因位点。本文概述了 HPRT基因位点突变检测的原理 ,列出了几种检测方法 ,并讨论了影响 HPRT基因突变频率测定的几个因素以及 HPRT基因突变在生物剂量估算中的应用 ,最后与其它辐射生物剂量计进行了比较。

论胚胎植入前基因检测技术的民法问题

人类生殖过程中开始应用胚胎植入前基因检测技术,该技术的应用带来了相当多的伦理与法律问题。特别对于民法理论与制度,提出了一系列的问题,为保护当事人的合法权益,需要回应。