基因正义论——以民法典编纂与基因歧视司法个案为背景

人类基因技术引发了诸多伦理及社会风险,其中包括发生在教育、保险、就业等领域的基因歧视。基因正义是应对基因歧视的法律理念,可以从福利、自由和德性三个维度的衡平中获得辩护。我国已经出现就业基因歧视个案,但对这一歧视的直接规定呈现为法律空白,现实司法也陷入困顿而未能提供有效救济。在未来法律秩序构建时,可以采取一般禁止与特别例外相结合的政策。应在民法典人格权编中构建基因平等权条款,规定"任何人都不因其基因特征而受歧视",作为应对基因歧视的私法请求权基础。如民法典未能提供这样的规范基础,则可以在解释论上,将基因、基因信息纳入民法总则规定的"隐私"或"个人信息"、"数据"的意义范畴,将基因歧视列为侵害"人身自由、人格尊严"的情形之一。在未来《反歧视法》《基因技术法》等法律中提供配套的公法机制,明确基因歧视行为判断标准、特别例外、主管机构和基因检测程序等具体规则。

天然反义RNA(NATs):基因表达的重要调控分子

天然反义RNA(natural antisense transcripts,NATs)是在多个物种广泛表达的一类非编码RNA分子,可在转录水平、转录后水平、翻译水平等多个层次采取不同的机制调节靶基因的表达,对器官形成、细胞分化和疾病发生等各种生理和病理过程都有重要的调控作用.本文在总结、回顾近年来天然反义RNA研究进展的基础上,从转录碰撞、DNA甲基化修饰、小分子RNA等9个方面详细介绍和阐述NATs的作用机制,并提出未来NATs研究需要重点解决的两个问题:一是开发合适的实验系统研究特定条件下的NATs表达与生物学功能,二是深入阐明NATs的自身表达调控机制,深化对其生物学意义的认识.对天然反义RNA的研究为药物开发和疾病治疗提供了新的思路和突破口.

正反义人Tankyrase基因真核表达载体的构建及鉴定

目的 :构建人Tankyrase正义和反义真核表达载体 .方法 :用EcoRⅠ从TT2 0质粒上切下约 3.4 4kb的TankyrasecDNA片段 ,然后连入pcDNA3.1/Zeo的EcoRⅠ酶切位点上 ,经BamHⅠ酶切鉴定出正义和反义表达载体 .结果 :经BamHⅠ酶切后 ,正义质粒形成 5 .0 +3.4kb两条带 ,而反义重组质粒为 8.2 +0 .2kb两条带 ,与理论计算值完全一致 .结论 :成功构建了人Tankyrase的正。

马铃薯sAGP基因表达对块茎淀粉和还原糖含量的影响

通过根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导将CaMV35S驱动的正/反义sAGP基因导入马铃薯(SolanumtuberosumL.)品种鄂马铃薯3号(E3)和南中552(N552)以研究sAGP基因对马铃薯块茎淀粉-糖代谢的影响。PCR扩增和Southern杂交证明正/反义sAGP基因已整合到马铃薯基因组中。Northern杂交分析表明,该正/反义基因在转基因植株中均能正常转录。转基因植株块茎分析显示,导入正义基因的株系中除4个与转反义基因表现相同外,其余19个株系AGPase酶活性平均上升约25%,还原糖含量下降20%左右,淀粉含量增加5%～6%。其中3个测定指标与各自对照相比,差异均达到显著水平的有A8、C1和C5,最大变化幅度分别为酶活性上升53.5%,还原糖含量下降60.1%,淀粉含量增加33.9%。转反义sAGP基因的15个株系中,AGPase酶活性平均下降约27%,还原糖含量上升近36%,淀粉含量下降亦达27%,其中株系B5、B6、B8和D7的这3个指标均与各自未转基因对照差异显著。本研究结果表明,sAGP基因与AGPase酶活性直接相关,而AGPase很大程度上调节着马铃薯块茎淀粉-糖代谢,通过增强sAGP表达,能有效改良块茎的加工品质。

大豆抗病相关基因SR1正反义植物表达载体的构建及遗传转化研究

实验构建了CaMV35S启动子控制下的大豆抗病相关基因SR1的正反义植物双元表达载体pBISR1(+)和pBISR1(-)。通过根癌农杆菌叶盘转化法,将正义和反义SR1 基因导入烟草Ha vana 425,经卡那霉素筛选,获得了抗性植株。经PCR和PCR-Southern印迹分析,证明抗性植株中整和了SR1基因,RT-PCR分析进一步表明正义和反义基因皆能转录为完整的mRNA,经疫霉根腐接种及抗病性鉴定表明,转反义基因株系和未转基因株系均轻微感病,而转正义基因株系始终没有出现感病症状。

胰腺癌正反义K-ras基因片段的分离和定向克隆

目的 分离及克隆胰腺癌基因组中 K- ras基因片段 ,构建重组正反义 K- ras基因逆转录病毒载体并探讨其临床意义。方法 设计两对 PCR引物 ,分别在上下游引物中引进 Bam H1和 Eco R1位点 ,以胰腺癌细胞基因组 DNA为模板扩增 K- ras基因外显子 4 B及侧翼序列 ,并采用重组 DNA技术将目的基因分别定向插入逆转录病毒载体 L ZRSp BMN- Z中。重组克隆通过菌液 PCR和重组质粒限制性内切酶酶切鉴定。结果 正反义 K- ras基因外显子 4 B及侧翼序列成功地克隆入 L ZRSp BMN- Z中。结论 L ZRSp BMN- Z是胰腺癌反义基因治疗中新型候选载体之一。应用 PCR方法获取反义 K- ras基因方便可行 ,可用于重组反义 K- ras基因逆转录病毒载体的构建。

论人类生殖系基因组编辑的私法规制

在《民法典》第1009条的规制范围中,人类生殖系基因组编辑的伦理、法律问题最为复杂。本条作为对人类生殖系基因组编辑进行直接规制的唯一条款,本质上系聚焦义务施加的框架性条款,仅是“新条文”而非“新规则”,但有“新意义”。为在私法领域实现对前沿生命科技的国家治理政策目标,其对人类生殖系基因组编辑技术应用发出禁令,并采取了风险、伦理与利益三个虽不充分但却务实的规制路径,展示出谨慎、包容、谦抑的规制立场。本条因包含转介条款而具有法源指引和拓展之功能,借助将有关管制法条款的规范位阶提升,可形成一个有关人类生殖系基因组编辑的公法、私法交融的动态规制体系。本条因其一般条款的性质而存在着适用上的风险和负担,需经具体化之司法作业才能发挥应有的规范力,故不能过高评价其法价值和法效果。本条尚需在法的外在体系、内在体系上予以立法改进和法理阐释,才能真正实现规范目的,在人类生殖系基因组编辑法律规制中彰显以人之尊严为价值内核的基因正义。

人转化生长因子β1正反义基因对HL—60细胞周期及细胞增殖的调控研究

通过构建人转化生长因子β1(hTGF-β1)的正、反义基因表达载体并通过基因转染技术,首次将hTGF-β1的正、反义基因分别导入到HL-60细胞中,经G418选择获得可稳定表达hTGF-β1的HL-60细胞。较为详细地研究了hTGF-β1的正、反义基因对HL-60细胞周期的影响及对细胞增殖的调控作用。结果表明,表达正义hTGF-β1 mRNA的HL-60细胞阻滞于G1期,而表达反义hTGF-β1 mRNA的HL-60细胞可以解除G1期的阻滞,使大部分细胞进入S期。加入正义hTGF-β1基因后,HL-60细胞形成集落的能力下降,细胞生长速度下降,恶变程度降低;加入反义hTGF-β1基因后,其结果正相反。

正、反义Heparanase基因对肝癌细胞转移潜能的影响

目的 研究正、反义人Heparanase基因对肝癌细胞转移潜能的影响。方法 将正、反义人 Heparanase 基因稳定转染肝癌细胞系HepG2,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学检测转染细胞 Heparanase mRNA及蛋白表达;裸鼠尾静脉注射转染细胞 30 d后,称量肺重、计数肺表面转移结节数;肺脏常规切片、苏木素-伊红(HE)染色。结果 转染正义、反义基因促进或抑制 Heparanase mRNA和蛋白表达;反义组裸鼠肺脏重量、肺表面转移结节数较对照组显著减少(P<0.01),正义组则相反;HE染色表明正义组裸鼠肺脏有大量转移灶,反义组仅见少量小转移灶。结论 Heparanase基因对肝癌细胞转移潜能有明显的促进作用,反义基因则显著抑制肝癌细胞的转移。