拟南芥中的SmD1蛋白、RNA质量控制机制与转录后基因沉默机制

RNA质量控制(RQC)是细胞内降解功能障碍RNA的机制。SmD1蛋白属于核糖核蛋白颗粒(RNP),影响转录后基因沉默(PTGS)机制。SmD1不通过参与siRNA的生成,也不通过剪接作用影响PTGS。其影响效果的强弱与拟南芥品系自身沉默诱导的强度有关。RQC途径和PTGS途径竞争相似的RNA底物,RNA底物共享可能仅在RQC途径变得低效或受损时发生。内源基因难以产生siRNA并进入PTGS途径。相反,转入基因更易产生大量的异常RNA,从而引发PTGS。SmD1通过限制RQC机制降解转入基因产生的异常RNA,允许异常RNA进入细胞质siRNA体,以促进PTGS。

RNAi机制及在植物中应用的研究概述

RNA干扰即RNAi,通过外源或者是内源的dsRNA在细胞内诱导同源序列基因表达受到抑制的现象。自从RNAi现象在20世纪90年代中期被发现以来,很快就成为生物化学与分子生物学研究的焦点。文中简要介绍了RNAi在不同水平上的主要作用机制、特点和关键因子的结构与作用,以及在植物抗逆、功能基因、植物育种、植物抗病、植物营养、果实保鲜等方面的应用研究,以期为RNAi在植物中的深入研究提供参考。

蓝氏贾第鞭毛虫表面抗原变异机制研究进展

蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)是引起腹泻的最常见的肠道寄生原虫之一。同大多数肠道寄生的病原体一样,表面抗原(variant-specific surface proteins,VSPs)变异是虫体逃避宿主免疫攻击的重要机制,从而导致疾病慢性化和/或重复感染的发生。本文将从基因水平的调控、转录和转录后调控、VSPs表达修饰调节和VSPs的加工、处理与转运等4个方面对贾第虫表面抗原变异机制的研究进展进行综述。

RNA干扰技术在肿瘤基因治疗中的研究进展

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指由双链RNA(double2strand RNA,dsRNA)引发的转录后基因沉默机制(posttranscriptional gene silencing,PTGS),具有序列特异性和高效性,RNAi作为一门新的基因阻断技术,是一种有广阔应用前景的抗肿瘤基因治疗方法,近年来受到人们的广泛关注。本文将RNAi作用机制及其在肿瘤治疗中的研究进展作一综述。

EZH2在胚胎干细胞和肿瘤方面的研究进展

PcG蛋白家族成员EZH2是PCR2复合物的催化活性亚单位,通过甲基化核小体组蛋白H3的27位赖氨酸残基,沉默下游基因。这些下游靶基因大部分具有抑制肿瘤发生和调控干细胞分化的作用,它们的沉默将导致肿瘤的发生和干细胞多向分化潜能障碍。EZH2介导的基因沉默机制和DNA甲基转移酶(DNMTs)以及组蛋白脱乙酰酶(HDACs)之间存在密切的联系。现就EZH2在胚胎干细胞、肿瘤研究和临床应用前景作一综述。

RNA干扰技术在器官移植免疫中的研究进展

人们早就发现随着细胞内转入基因拷贝数目的增加，其表达水平随之降低，同时内源性同源基因也被转入的基因所抑制。目前已阐明这种抑制的主要机制就是RNA干扰（RNA interference，RNAi），现在认为RNAi是一种原始的细胞免疫机制和基因表达的调控机制，对于维持生物体基因组稳定性非常重要。RNAi是由双链RNA（double—stranded RNA，dsRNA）介导的转录后和翻译水平的基因沉默机制，这种dsRNA诱发的选择性降解靶基因tuRNA作用，抑制基因表达效应非常迅速，可在数小时内降低其表达，而在24h内完全抑制其表达。RNAi很像细胞生物基因组用于抵抗、清除“不想要的”外源遗传元件，维持基因组的稳定性保护机制。

蓝氏贾第鞭毛虫表面变异抗原反义mRNA的鉴定

目的鉴定编码蓝氏贾第鞭毛虫（简称贾第虫）表面变异抗原（VSP）的正义和反义mRNA。方法采用Trizol法抽提贾第虫单克隆滋养体总RNA,SMART法逆转录合成cDNA。设计合成针对VSPs基因3′端保守区域的特异性引物（内、外引物各1条）,结合SMART引物采用巢式PCR分别扩增得到来源于正义和反义mRNA的cDNA片段。将PCR产物与pGEM-T载体连接并测序,测序结果与GenBank库中的已知序列进行比对。根据测序结果设计特异性引物,以巢式PCR产物为模板,进行正义和反义cDNA的检测。结果巢式PCR显示,VSP正义mRNA和反义mRNA的cDNA均被成功扩增,电泳鉴定扩到产物分别位于0.1~4kb和0.2~2kb。经克隆、测序和序列比对,共获得34个贾第虫VSP编码序列,其中5个来源于正义mRNA的扩增产物,29个来源于反义mRNA的扩增产物,所得VSP编码基因均含有贾第虫VSP mRNA N端变异区和C端特异性保守区。根据5个正义mRNA序列设计的特异性引物在正义mRNA均得到扩增产物,而在反义mRNA仅有4个得到扩增产物。从29个反义mRNA序列中挑选3个设计特异性引物进行PCR,正义mRNA和反义mRNA均得到扩增产物。结论贾第虫VSP基因转录的多个正义mRNA和反义mRNA序列同时存在,该基因存在转录后基因沉默调节机制。

RNA干扰在间充质干细胞及骨系细胞分化中的应用

RNA干扰（RNA interference，RNAi）是指在细胞中引入外源双链RNA使相应序列的mRNA特异性降解，从而导致某一功能基因沉默的方法。Fire等首次在秀丽阴杆线虫中发现了转录后水平的基因沉默机制，从而刷新了对基因调控机制的认识。后来有学者发现在哺乳动物体内也广泛存在RNAi现象。RNAi的作用是在转录水平、转录后水平及翻译水平等多个不同水平上实现的。由于其高效性、特异性而被广泛应用于基因功能分析及基因治疗研究等很多领域。

DNA甲基化与儿童白血病的临床研究进展

DNA甲基化是研究最广泛的哺乳动物表观遗传学修饰,它提供了一种稳定的可遗传的基因沉默机制,与组蛋白修饰和其他的染色质相关蛋白一起,在调节基因表达和染色体结构方面起重要作用。DNA甲基化是指在DNA甲基转移酶（DNA methyl-transferases,DNMT）的作用下，