IL-10基因转染对EAT大鼠脾细胞增殖及Th1细胞因子分泌的影响

目的在建立EAT动物模型的基础上,探索通过非病毒载体基因转染方法,以改善EAT大鼠免疫功能异常状态,并观察对大鼠脾细胞增殖及分泌Th1细胞因子的影响。方法选用♀W istar大鼠建立EAT动物模型。成模大鼠分为4组:A组(PBS+PLL),B组(pORF质粒+PLL)、C组(pOR-Fm IL10质粒+PLL)及D组(pORFm IL10质粒+MEM)。使用R IA方法测定TgAb、TmAb滴度。脾脏淋巴细胞培养,采用[3H]-TdR标记方法测定cpm值并计算淋巴细胞增殖指数,ELISA方法检测细胞因子IFN-γ、TNF-α及IL-2。结果C组与A、B、D组比较,第4、6、8周TgAb、TmAb滴度降低,(P<0.01,F=42.66,F=32.65,F=9.66;F=22.25,F=81.35,F=14.84)。此外,淋巴细胞增殖试验结果显示,C组PTg刺激的淋巴细胞增殖指数低于A,B组,(P<0.05)。PTg刺激的脾细胞培养上清中细胞因子IFN-γ、TNF-α及IL-2检测结果,A、B组高于C组(P<0.01,P<0.05)。结论通过大鼠甲状腺组织内局部注射pORFm IL10质粒使甲状腺滤泡上皮细胞表达IL-10,能够降低自身抗体水平和针对抗原反应的T淋巴细胞增殖反应及PTg刺激的脾细胞产生的Th1细胞因子。多聚赖氨酸可以延长目的基因表达时间,更有效地改善EAT大鼠的免疫功能状态。