Q-PCR法检测腺病毒基因治疗产品中的复制型腺病毒

目的:建立Q-PCR法检测腺病毒基因治疗产品中的复制型腺病毒(RCA)。方法:首先制备高纯度的pXC1质粒参考品(含有E1基因序列),紫外吸收法定量后经过数学换算得到拷贝数;然后比较染料法和探针法的灵敏度,建立适用的Q-PCR检测方法;最后用新建Q-PCR法定量测定腺病毒基因治疗产品中的RCA。结果:pXC1质粒参考品的拷贝数初步标定为2.6×1010拷贝/μL;探针法的灵敏度比染料法高1000倍;将pXC1质粒参考品应用于Q-PCR(探针法)测定腺病毒基因治疗产品中的RCA,标准曲线回归方程为y=-1.416ln(x)+47.395,R^2=0.9966,供试品的Cq值均位于标准曲线范围内。结论:新建Q-PCR法适用于检测腺病毒基因治疗产品中的RCA,且结果准确可靠。

中国与欧盟、美国基因治疗产品安全性监管研究

目的:为修订我国基因治疗产品安全性监管法规提供参考。方法:通过回顾基因治疗产品的研发史及伴随的安全性问题,分析欧盟及美国对基因治疗产品安全性监管法规,并与我国的相应法规进行比较,提出欧洲及美国的监管可借鉴的经验及我国在基因治疗产品安全性监管方面的差距。结果:2019年前,我国针对基因治疗产品的安全性监管法规,内容相对简单,规定较为笼统,针对具体问题缺乏详细说明和规定,法规约束性不强,审批上相对宽松。欧盟和美国在安全性监管体系方面,由于起步较早,相对严谨和完善,提出了具体、详细的技术要求,如非临床试验原则、产品特性分析、动物种属选择、药效学求证研究、药代动力学、安全药理学、毒理学和安全性评价等。针对上述问题,国家药品监督管理局在2021年2月发布了"基因治疗产品非临床研究与评价技术指导原则(征求意见稿)",正在逐步完善该类产品的安全科学监管体系。结论:基因治疗产品是具有高度独特性、多样性及技术高度复杂性的全新产品,我国有待进一步完善适合全新产品监管的法律法规。在修订产品的安全性监管法规时,可以借鉴欧盟和美国的监管经验,使其符合国际趋势和要求,少走弯路。

美国细胞及基因治疗产品的注册认证简介

细胞及基因治疗产品是一类用于治疗癌症、艾滋病等的生物医药制品，细胞产品的出现源于上世纪70年代的造血移植，基因治疗最初被应用于单基因缺陷的遗传病。与其他的生物治疗产品的监管类似，这两类产品仍然由美国食品药品监督管理局（FAD）监管。然而，由于这两类产品不同于传统的生物医药制品，因此FDA在监管法律法规、注册认证上与传统的生物医药制品略有不同。

IPRP关于基因治疗产品生物分布研究的相关考虑

目前各监管机构对基因治疗产品的生物分布研究可能有不同的要求,为基因治疗产品的开发带来了挑战。国际药物监管计划(IPRP)的基因治疗工作组(GTWG)于2018年6月编写了Expectations for Biodistribution Assessments for Gene Therapy Products意见书,该文件代表了当前不同地区的药品监管机构对支持基因治疗产品进入临床试验和上市申请时需要开展的非临床生物分布研究的认识,重点讨论了支持首次临床试验的生物分布研究、试验设计需考虑因素以及允许在首次临床试验后开展生物分布研究的情况。本文拟通过对该意见书的介绍,概述基因治疗药物生物分布研究的一般考虑,希望对我国基因治疗产品的生物分布研究相关的研发和审评工作提供参考。

FDA批准首个基因治疗产品

2017年8月30日,美国食品药品管理局（FDA）官网发布消息,该局批准了首个经基因修饰的自体T-细胞免疫治疗产品Kymriah（tisagenlecleucel）,即使用患者自身的T细胞产生的定制化治疗。该产品持证商为诺华医药公司,主要用于治疗某种儿童及青少年B-细胞急性成淋巴细胞性白血病。该产品使用说明书中注有可能引发细胞因子释放综合征（CRS）以及神经毒性的黑框警示信息。鉴于上述不良反应可能危及患者生命,

欧美细胞和基因治疗产品全生命周期监管体系研究及对我国的启示

欧美围绕细胞和基因治疗产品全生命周期已建立了较为完善的监管体系。文章采用文献研究法、比较研究法,搜集、整理欧美及我国细胞和基因治疗产品的监管策略,分析关键点,并进行详细比较和梳理。我国在顶层立法、全生命周期技术指导原则覆盖范围、监管机构设置及监管模式等方面仍相对薄弱,建议国家在以“患者为中心”的原则上,对细胞和基因治疗产品构建集法律法规、指导原则等为一体的监管体系,设立专业咨询/评审机构,激励特定疾病的产品研发,并进一步探索基于产品风险实施差异化管理。

国家药监局药审中心关于发布《细胞和基因治疗产品临床相关沟通交流技术指导原则》的通告(2023年第60号)

为指导和规范细胞和基因治疗产品临床研发过程中沟通交流的资料准备和临床研发要素考虑等工作,以提高沟通交流效率,促进细胞和基因治疗产品的临床研发,药审中心组织制定了《细胞和基因治疗产品临床相关沟通交流技术指导原则》(见附件)。根据《国家药监局综合司关于印发药品技术指导原则发布程序的通知》(药监综药管〔2020〕9号)要求,经国家药品监督管理局审查同意,现予发布,自2023-12-28起施行。

美国和欧洲细胞和基因治疗产品加快审评审批政策概况及对我国的启示

细胞和基因治疗产品研发的快速发展,承载了产业界、患者和医疗工作者们的殷切期望,也给药品监管机构带来不小的挑战。为促进具有巨大治疗潜能的此类产品研发和上市,美国和欧洲药品监管机构专门针对细胞和基因治疗产品采取了调整组织结构、完善法规和指导原则、制定针对性的加速程序等措施。我国对细胞和基因治疗产品的监管政策也在不断完善中。本文拟通过概述和分析美国和欧洲药品监管机构细胞和基因治疗产品加快审评审批政策,为我国细胞和基因治疗产品加快审评审批政策优化提供借鉴。

基因治疗产品的质量控制分析方法及研究进展

基因治疗产品近年来已成为国内外药物研发的热点。对研发阶段的基因治疗产品开展质量研究,建立相应的质量控制方法和质量标准,是产品安全、有效的重要保证和产业化进程中的重要环节之一。基因治疗产品的质量控制项目包括鉴别、含量、效价、纯度、杂质和其他常规检测项目等。本文较为详细地介绍了在各种基因治疗产品中这些质控项目可采用的分析方法。对于新型基因治疗产品,迫切需要研究适当的分析方法进行有效的质量控制,而已批准上市或进入临床研究产品的质控方法和标准则需要进一步的提高和完善。

动态光散射法测定病毒载体基因治疗产品的平均粒径及粒径分布

目的:建立病毒载体基因产品的粒径及分布的测定方法。方法:采用马尔文Zetasizer Nano ZS型纳米粒度仪,以氯化钠注射液作为稀释剂对样品进行适当稀释后,用手动测量方式进行测定。结果:测定的60 nm标准纳米粒子平均粒径为61.24±0.68nm,多分散指数(polydispersity index,PDI)为0.020±0.012 nm。重组人新型P53腺病毒注射液测定6次,平均粒径为122.42±1.80 nm,相对标准偏差(RSD)为1.4%;PDI值为0.056±0.014 nm,RSD为25.1%。重组人新型P53腺病毒注射液于37℃存放时,平均粒径和PDI值随时间延长有显著增加。至28天时,平均粒径增加到130.50,PDI值增加到0.265。结论:动态光散射法快速、简便、准确,可用于病毒载体基因治疗产品的粒径及分布的检测。

基因治疗产品中病毒颗粒的微粒特性研究

目的:研究基因治疗产品中病毒颗粒的微粒特性及粒径分布情况。方法:采用扫描电镜、动态光散射法、微流数字成像法、光阻法及目测法对腺病毒(adenovirus,AdV)、腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)和单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)基因治疗产品中病毒颗粒的微粒特性、粒径分布及制剂外观进行观察研究。结果:扫描电镜结果显示,AdV、AAV、HSV均存在不完整颗粒(空心病毒颗粒、衣壳碎片),HSV病毒存在包膜脱落或融合的情况;动态光散射法结果显示AdV对温度敏感,易形成聚集体,AAV的粒径分布不均一,变异度大,HSV实测粒径偏大且分布不均一;微流数字成像法、光阻法及目测法结果提示样品中存在的50μm以上的微粒,与典型的蛋白聚集体形态相似,且50μm以上的颗粒数与液体的浊度呈正相关,100μm以上颗粒与絮状沉淀物相关。结论:不同病毒的微粒特性也不相同,微粒分布情况及动态变化过程与聚集体的形成有关,可采用多种方法优势互补,对微粒进行全范围监测。

基因治疗产品的研究进展及其国内外监管制度探析

近年来,基因治疗在恶性肿瘤、感染性疾病、自身免疫性疾病、罕见病等重大难治性疾病的治疗中展现出巨大潜力,逐渐成为研究热点,同时也大大推动了基因治疗产品商品化的发展。目前我国已有30余项与基因治疗相关的临床研究正在进行,预计未来几年基因治疗产品将进入井喷期,加快建立和完善相关监管制度成为当务之急。本文综述了国内外基因治疗产品的研究进展,并对各国监管制度进行分析和讨论,以期为我国基因治疗产品监管体系的完善提供参考。

对重组腺相关病毒基因治疗产品包装体系和分子设计的思考

目的近年来,数个基因治疗产品批准上市,为缺乏有效治疗手段的遗传性罕见病提供了治愈的可能。其中重组腺相关病毒载体(rAAV)广泛应用于单基因遗传病。为了保证药物的安全有效,笔者对工作进行总结及思考,以期进一步完善其监管体系。方法笔者结合相关领域的科学研究进展和已上市重组腺相关病毒rAAV产品的国际监管考虑展开论述。结果由于不同类型的腺相关病毒在组织细胞选择性、组装及转基因表达等方面各有差异,包装系统的设计多样,生产体系和工艺复杂,其人体应用的科学评价需综合多个方面考虑。结论本文围绕腺相关病毒包装体系、分子设计和复制型AAV的产生机制提出现阶段的评价考虑,供研发者和监管方讨论交流。

基因治疗相关产品对热原检测提出的挑战

本文就基因治疗相关产品这一类新制品的热原检测问题进行了分析讨论。将现有的国家法规规定的家兔热原检查法和内毒素检查法对该类产品的检测中存在的缺陷进行了分析,提出了热原检测对该类制品检测时面对的三个挑战;并将国外正在研究、发展的一种新的体外热原检测方法的优势进行了介绍。

药品监管科学研究之基因和细胞治疗产品Ⅱ:我国监管体系的完善建议

目的:为完善我国基因和细胞治疗产品监管体系提供参考。方法:对美国、欧盟和日本等监管机构的基因和细胞治疗产品监管体系进行对比研究,结合对我国相关行业开展的问卷调研结果进行综合分析。结果与结论:从药品生命周期管理的角度,提出完善我国基因和细胞治疗产品监管体系的建议,包括我国基因和细胞治疗产品监管体系完善的原则与思路、基因和细胞治疗产品不同生命周期的个性化监管要求、细胞治疗产品双轨制的构建与完善建议,以及提高基因和细胞治疗产品可及性的措施。

药品监管科学研究之基因和细胞治疗产品Ⅰ:我国监管体系的问卷调研及结果分析

目的:梳理我国基因和细胞治疗领域监管体系存在的突出问题,探索加强该领域监管体系建设的可行措施。方法:在前期文献调研的基础上,提炼关键要素,开展问卷调查,并对调查结果进行分析。采用非概率抽样法,选择从事基因和细胞治疗产品监管、研发、注册、生产等工作专业人员作为调查对象,以微信方式发放电子问卷进行调查。结果:大多数调研对象认为,我国现行基因和细胞治疗产品监管体系还不能满足产业发展的需求,需要进一步的改进和完善。结论:本调研为进一步提出我国基因和细胞治疗产品监管体系的完善建议提供了数据支持。

书评

人类进入21世纪后，由于以基因组学为代表的生命科学、组合化学、高通量筛选和信息技术的飞速发展，各种类别迥然不同的新型药物和生物技术产品不断问世。同时，由于发现了COXⅡ抑制剂类非抗心率失常药物所致的Q—T间期延长；中药马兜铃酸及其功能代谢产物引起的急性肾功能衰竭；以及基因治疗产品导致白血病等新的严重药物不良事件，如何科学地预测和评价新药、中药及生物技术产品，以及其他新的化学物质对人类健康危害的可能，提供它们的应用对人类健康可能产生的潜在安全影响的科学依据，即系统的药物安全性评价，实为决定新药能否进入市场、应用于人类的前提与决定性关键因素。