基因活化剂对紫肉甘薯根系活力的影响

基因活化剂使用浓度(A)设3个水平:375×(A1)、750×(A2)和1 500×(A3)稀释液,处理时间(B)设3个水平:浸渍苕秧基部0.5 h(B1)、1 h(B2)和2 h(B3),处理后培养在改良Hoagland培养基中,12 d后测定根系α-萘胺氧化速率、NO3-和K+吸收速率.结果表明:A1、A2和A3的α-萘胺氧化速率分别比对照(98.46μg/g.h)提高2.99,5.92和2.37倍;NO3-吸收速率分别比对照(0.23 mg/株.h)提高0.51,1.14和0.66倍;K+吸收速率分别比对照(0.12 mg/株.h)提高1.73,2.73和1.16倍.与对照相比,B1、B2和B3的α-萘胺氧化速率分别提高5.50,3.29和2.49倍;NO3-吸收速率分别提高0.60,1.09和0.63倍;K+吸收速率分别提高1.57,2.66和1.40倍.因素A、B与对照差异达极显著水平,不同水平间差异极显著(p<0.01).A2B2是最佳水平组合,即用750倍的基因活化剂浸渍苕秧基部1 h,可显著提高紫肉甘薯的根系活力,比对照α-萘胺氧化速率、NO3-和K+吸收速率分别提高5.75,1.51,3.52倍.

基因活化剂对紫色肉甘薯藤蔓生长的影响

基因活化剂使用浓度(A)设3个水平:375×(A1),750×(A2),1500×(A3),处理时间(B)设3个水平:浸渍 种苗基部0.5h(B1),1h(B2),2h(B3),处理后培养在改良Hoagland培养基中,10d后测定藤蔓长度和鲜质量.结 果表明:A1,A2和A3的藤蔓长度分别比对照(32.1cm)提高17.60%,43.61%和12.06%,藤蔓鲜质量分别比对照 (142.69g)提高63.30%,109.06%和55.01%;B1,B2和B3的藤蔓长度分别比对照提高17.07%,36.39%和 19.81%,藤蔓鲜质量分别比对照提高67.05%,97.76%和62.55%,与对照差异均达极显著水平(p<0.01),不同 水平间差异极显著(p<0.01).A2B2为最佳水平组合,藤蔓长度比对照提高51.34%,鲜质量提高114%.用750倍 稀释液浸渍种苗基部1h,可显著促进紫色肉甘薯藤蔓的生长.

应用基因活化剂控制锦橙夏梢提高产量品质效果研究

在锦橙生理落果期（５月中旬至６月上旬）喷施植物基因活化剂５０００－１００００倍液１～３ 次，控制夏梢抽发的效果达８７．１％～７４．８％，克服了新梢与幼果争夺营养的矛盾，免去了人工 抹梢的劳力。喷１次增产２０％左右；喷２～３次的增产６２．８％－１５０．７％和１７６．５％～１５３．４％，效果达 显著和极显著水平。采前裂落果减少８４．０％～７９．０％和５５．９％～４３．９％，且果实着色好，单果增重 ２．７～１．９ｇ。经农业部柑桔质量监督检测中心检测结果：可溶性固形物提高２．０％，１００ｍｌ果汁 总糖增加 １．８９ｇ， ＶＣ增加 ７．９６ｍｇ，酸甜适度、味浓，口感好，很受消费者欢迎。

基因活化剂对紫色甘薯光合速率的影响

基因活化剂使用浓度设3个水平:375倍、750倍、1500倍稀释液;施肥时间设4个水平:浸渍种苗基部1h、1次、2次、3次叶面追肥。第3次叶面追肥1个月后测定光合速率。结果表明:3个浓度水平的光合速率分别比对照提高了20.87%,25.31%和23.06%,4个时间水平的光合速率分别比对照提高了23.69%,22.13%,22.04%和22.81%,不同浓度和不同时间之间均无显著差异。用750倍稀释液浸渍种苗基部1h或追肥1次,即可显著提高紫色甘薯的光合速率。

双基因活化纳米骨浆的体内成骨

背景:前期实验构建了骨形态发生蛋白2/血管内皮生长因子双基因活化纳米骨浆。目的:观察骨形态发生蛋白2/血管内皮生长因子双基因活化纳米骨浆在动物体内成骨的基因表达和骨形成效果。方法:取昆明小鼠24只,在其中12只右侧大腿后群肌袋内注入骨形态发生蛋白2/血管内皮生长因子+纳米骨浆,左侧大腿后群肌袋内注入空白质粒+纳米骨浆或纳米骨浆;在剩余12只小鼠右侧大腿后群肌袋内注入骨形态发生蛋白2+纳米骨浆,左侧大腿后群肌袋内注入空白质粒+纳米骨浆或纳米骨浆。术后2,4周取材作影像学检查、组织学观察和分子生物学检测。结果与结论:术后各时间点骨形态发生蛋白2/血管内皮生长因子+纳米骨浆组、骨形态发生蛋白2+纳米骨浆组均有骨样组织形成;骨形态发生蛋白2/血管内皮生长因子+纳米骨浆组局部有明显骨形态发生蛋白2和血管内皮生长因子的mRNA表达,并且碱性磷酸酶水平、成骨速度及新生骨量明显优于骨形态发生蛋白2+纳米骨浆组(P<0.05);空白质粒+纳米骨浆组、纳米骨浆组无明显成骨表现。表明纳米骨浆经骨形态发生蛋白2/血管内皮生长因子质粒或骨形态发生蛋白2质粒活化后,在体内具有了一定的成骨能力,且前者在成骨速度和质量方面较后者明显增强。

基因活化剂对紫色甘薯块根产量的影响

基因活化剂使用浓度(A)设3个水平:375×(A1)、750×(A2)、1500×(A3)稀释液;使用时间(B)设4个水平:浸渍种苗基部1h(B1)和1次(B2)、2次(B3)、3次(B4)叶面追肥,收获时测定块根鲜重。结果表明:A1,A2,A3的块根产量分别比对照提高38.60%,61.70%和42.54%,B1,B2,B3和B4的块根产量分别比对照提高38.74%,64.33%,47.37%和40.06%,与对照差异均达显著水平(P<0.05)。A2B2为最佳水平组合,平均块根产量比对照提高89.77%,且与所有水平组合之间都有显著差异(P<0.05)。用750倍的基因活化剂浸渍种苗基部1h再追肥1次,可显著提高紫色甘薯的块根产量。

人骨形态发生蛋白2基因活化纳米骨浆的成骨能力

背景:纳米骨浆在骨缺损修复过程中仅起支架和骨传导作用,不具备骨诱导能力。目的:观察人骨形态发生蛋白2(human bone morphogenetic protein-2,hBMP-2)基因活化纳米骨浆的异位诱导成骨能力和修复骨缺损效果。时间及地点:实验于2006-06/2007-03在华中科技大学同济医学院分子生物中心实验室和协和医院骨科实验室完成。材料:将纳米骨浆与hBMP-2基因真核表达质粒相复合,形成hBMP-2基因局部释放系统。方法:实验一:昆明种小鼠24只右侧大腿后群肌袋注射纳米骨浆+hBMP-2质粒作为实验侧,其中12只小鼠左侧大腿后群肌袋注射纳米骨浆+空白质粒为对照侧1,另12只左侧注射纳米骨浆为对照侧2。实验二:新西兰白兔54只,其中6只作左桡骨中段骨缺损,不植入材料,为空白对照;另48只制成双侧桡骨中段15mm骨缺损模型,随机分成3组,缺损处分别植入hBMP-2+纳米骨浆、空白质粒+纳米骨浆、纳米骨。主要观察指标:实验一:采用放射学、分子生物学和组织形态学等方法检测成骨基因hBMP-2表达和诱导成骨效应。②实验二:取桡骨标本作影像学检查、组织学观察和生物力学检测。结果:实验一:小鼠术后2,4周实验侧有hBMP-2表达。实验侧术后2周出现大量软骨组织和呈岛状散在分布的骨组织,术后4周可见大量成骨组织,新生骨相互融合生长并形成较为成熟的板层骨和骨小梁结构;对照侧未见骨组织形成。实验侧碱性磷酸酶活性明显高于对照侧(P<0.01)。实验二:术后12周空白对照组骨缺损无愈合,其余3组骨缺损均修复。植入hBMP-2+纳米骨浆组的碱性磷酸酶水平、成骨速度及新生骨力学强度均明显优于植入空白质粒+纳米骨浆或纳米骨组(P<0.05)。结论:经组织学、影像学及生物力学的综合检测验证,纳米骨浆复合hBMP-2质粒后,具有一定的骨诱导作用,植入体内后成骨速度、质量及力学强度较单纯的纳米骨浆明显增强,能够有效修复骨缺损。

基因活化聚乳酸表面工程的初步研究

运用层层自装(layer-by-layer self-assembly)技术,在聚乳酸表面形成半乳糖苷化的壳聚糖(galactosylated chitosan,GC)/DNA多层膜结构,构建基因活化的生物材料。用接触角测试仪及紫外吸收光谱仪监控多层膜的组装过程及DNA的释放行为,倒置荧光显微镜观察HepG2细胞在GC/DNA多层膜修饰的聚乳酸表面的细胞形态及生长状态。结果表明:GC/DNA的交替吸收在聚乳酸表面形成了多层膜结构,DNA在PBS缓冲液(pH=7.4,37℃)中的释放可持续42 h以上。黏附在多层膜修饰的聚乳酸表面的HepG2呈现纺锤样的细胞形态。另外,半乳糖是肝细胞表面无唾液酸糖蛋白的受体,从多层膜上释放出来的GC/DNA颗粒可被肝细胞特异识别并结合。

基因活化材料在骨科组织损伤修复中的应用

背景:基因活化材料是新型的专为组织工程设计的转基因材料。目前基因活化材料技术在骨科主要用于骨折不愈合、软骨以及肌腱韧带损伤的修复。目的:分析目前基因活化材料在骨科组织损伤修复中的应用,为临床应用提供参考。方法:以"Gene-Activated-Matrix,GAM"英文检索词及"基因活化材料,组织工程,骨与软骨损伤修复,肌腱韧带损伤修复"中文检索词,检索CNKI中国知网数据库和PubMed数据库1999-01/2010-09相关文献128篇。纳入与骨组织工程及基因活化材料有关的基础性、前瞻性及临床性研究,排除标准重复性研究,保留其中的26篇进行分析。结果与结论:目前基因活化材料技术在骨科主要用于骨折、软骨以及肌腱韧带损伤的修复。随着分子生物学和基因工程技术的发展,可利用基因活化材料修复关节软骨损伤,通过转基因的靶细胞持续大量分泌生长因子来修复损伤的关节软骨。目前,基因治疗存在的主要问题是基因转染的安全性、基因表达的可控性、以及寻找合适的基因载体。同时,基因活化材料治疗为韧带和肌腱损伤愈合也提供了新的治疗途径。大量研究表明利用基因活化材料治疗在组织损伤修复方面具有有效性和可行性,但仍面临许多问题需要解决。

Osx基因活化技术促进种植体周围骨再生的实验研究

目的观察Osx基因活化技术对种植体周围骨形成和矿化的作用。方法首先将倍骼生与pcDNA3.1flag-Osx按比例混合构建GAM材料。选择雄性Beagle犬15只,每只动物拔除左侧及右侧下颌第2前磨牙,用超声骨刀于拔牙创颊侧制备颊舌向5 mm、近远中向5 mm、垂直高度10 mm的骨缺损,分别植入直径3.3 mm、长度13mm的奥齿泰GSII种植体2颗。2个骨缺损处分别填入倍骼生+空载体pcDNA3.1flag(A组)、倍骼生+pcDNA3.1flag-Osx(B组)。应用GBR技术在材料表面覆盖Bio-gide胶原膜,缝合牙龈。分别于术后4、8、12周处死动物5只,取出标本,用Micro CT测量骨再生相关数据。结果 A、B两组术后4、8、12周比较,骨小梁间隙、骨体积分数、骨小梁的体积、骨小梁厚度差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论倍骼生与Osx质粒构成的基因活化材料有明显的骨诱导作用,可促进骨组织再生。

基因活化剂对甘薯蒸腾速率和水分利用率的影响

基因活化剂使用浓度(A)设3个水平:375×(A1),750×(A2),1 500×(A3)稀释液;使用时间(B)设4个水平:浸渍种苗基部1 h(B1)和1次(B2),2次(B3),3次(B4)叶面追肥。第3次追肥1个月后测定各处理的光合速率和蒸腾速率,计算水分利用率。结果表明:蒸腾速率A1比对照低1.36%,A2和A3比对照分别高18.10%和16.93%,水分利用率A1,A2和A3分别比对照提高28.30%,8.47%和5.94%;蒸腾速率B1,B2,B3和B4分别比对照提高13.84%,5.23%,11.27%和14.55%,水分利用率分别比对照提高9.85%,21.64%,11.19%和14.27%,与对照差异均达显著水平(P<0.05)。A1B2为最佳水平组合,蒸腾速率比对照降低9.79%,水分利用率比对照提高49.45%。即用375倍的基因活化剂浸渍种苗基部1 h再追肥1次,可显著降低紫色甘薯的蒸腾速率和提高其水分利用率。

骨髓基质干细胞复合Osx基因活化材料促进种植体周围骨再生的实验研究

目的:建立Beagle犬的种植体周围骨缺损模型,构建含有质粒pcDNA3.1 flag-Osx的基因活化基质,并与自体骨髓基质干细胞混合,观察Osx基因活化技术对种植体周围骨的形成和矿化的作用。方法:术前抽取Beagle犬骨髓,培养骨髓基质干细胞,扩增质粒pcDNA3.1 flag-Osx。雄性Beagle犬15只,随机分为3个组,每组5只,第1组为4周组,第2组为8周组,第3组为12周组。每只动物拔除左侧下颌第2、4前磨牙及右侧第2前磨牙,于拔牙创颊侧制备骨缺损,植入奥齿泰GSII种植体3枚,分别填入A组:倍骼生;B组:倍骼生+BMSCs+空载体pcDNA3.1flag;C组:倍骼生+BMSCs+pcDNA3.1flag-Osx。应用GBR技术,在材料表面覆盖Bio-gide胶原膜。分别于4、8、12周后处死动物,取出标本,应用影像学、组织学、组织形态计量学等手段与对照组比较。各指标用均数±标准差(X±s)来表示。应用统计软件SPSS17.0进行单因素的方差分析。P<0.05为差异有统计学意义。结果:1、硬组织观察:骨缺损处均有新骨形成。C组最多,B组其次,A组最少。2、Micro-CT数据结果显示:第1组:除骨体积分数(BVF)外,其余指标B组与A组均有显著差异(P<0.05)。骨小梁间隙(Tb.Sp.)、骨小梁数目(Tb.N)、BVF、骨小梁的体积(BV)C组与B组间差异有显著性(P<0.05)。各指标C组与A组间差异均有显著性(P<0.05)。第2组:除BVF外,其余指标B组与A组均有显著差异(P<0.05)。Tb.Sp.、骨小梁厚度(Tb.Th)、Tb.N.、BV C组与B组间差异有显著性。各指标C组与A组间差异均有显著性(P<0.05)。第3组:各指标B组与A组均有显著差异(P<0.05)。除BVF外其余指标C组与B组间差异有显著性(P<0.05)。各指标C组与A组间差异均有显著性(P<0.05)。结论:骨髓基质干细胞与Osx质粒构成的基因活化材料,有明显的骨诱导作用,与不含Osx基质的对照组相比成骨速度更快,新生骨量更多,明显促进了骨组织再生。

两种复合阳离子聚合物/pDNA的基因活化基质转染骨髓间充质干细胞的效果比较

目的比较2种复合阳离子聚合物/pDNA的基因活化基质转染骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)的效果。方法以壳聚糖/胶原复合支架为基质材料,以壳聚糖/pDNA复合物或PEI/pDNA复合物为基因传递系统,合成了2种不同的基因活化基质(gene-activated matrix,GAM)。以含有裸DNA的GAM作为对照,将BMSCs种植于各组GAM中共培养7d,采用MTT法通过检测细胞的吸光度值测定细胞的增殖能力,检测各种GAM的细胞相容性;各组GAM采用共培养转染和直接转染2种方式体外转染BMSCs,通过检测萤光素酶表达水平比较各种GAM体外转染BMSCs的能力。结果与对照组相比,含有壳聚糖/pDNA复合物的GAM并未影响BMSCs的增殖(P>0.05),具有良好的细胞相容性;而与含有PEI/pDNA复合物的GAM共培养的BMSCs增殖能力明显低于对照组(P<0.05),对BMSCs具有一定的细胞毒性。采用共培养转染方式,壳聚糖/pDNA与PEI/pDNA复合物组均获得比对照组高的转染结果(1.28×105,1.62×105 vs.2.14×104 RLU/mg protein),但两复合物组相比差异无统计学意义(P>0.05);采用直接转染方式,壳聚糖/pDNA组的萤光素酶表达水平与对照组相比差异无统计学意义(4.51×104 vs.3.23×104 RLU/mg protein,P>0.05),而PEI/pDNA组的表达水平(2.50×105 RLU/mg protein)高于对照组(P<0.05)。结论含有壳聚糖/pDNA复合物的GAM,体外共培养转染BMSCs具有较好的生物相容性及一定的转染能力,具有用于体内基因治疗的潜力。

基因活化剂抑制龙眼冲梢和提高产量品质的效果

在龙眼花芽生理、形态分化期 (1、2月份 )各喷施基因活化剂 2 5 0、5 0 0倍液 1、2次 ,前者增产 378.5kg/ 6 6 7m2 和 791kg/ 6 6 7m2 ,效果十分显著 ;后者增产 5 5 .1kg/ 6 6 7m2 和 10 7.9kg/ 6 6 7m2 ,效果比较显著。生物学上表现在“冲梢”量和春梢营养枝抽发量少 ,着果好 ,果穗长度缩短 ,分枝数增多 ,单穗结果数增加 12 3～ 36个 ;单穗果重增重 744 .2～ 2 14.3g ;小果数减少 31.2 5 %～ 1.46 %。果实品质与对照比可食率增加 0 .6 7%～ 4.48% ;可溶性固形物提高 8.0 8～ 1.98个百分点。

奇菌植物基因活化剂对甜菜产质量的影响

在大田条件下,甜菜叶片喷施植物生长调节剂（奇菌植物基因活化剂）对甜菜产质量的影响进行了研究。结果表明,喷施该植物生长调节剂提高甜菜产量2.69%~16.61%,产糖量增加-2.76%~15.02%;对甜菜含糖率没有显著影响。当喷施1次施用59.83 g/667m2或喷施2次分别施用50.70 g/667m2调节剂时,甜菜块根可获得最高产量;当喷施1次剂量为69.70 g/667m2或喷施2次各44.25 g/667m2剂量调节剂时,可获得最高产糖量。综合分析表明,合理喷施此生长调节剂可提高甜菜块根产量及产糖量,对提高甜菜产量和品质具有重要作用。

采种甜菜应用植物基因活化剂试验

采种甜菜喷施植物基因活化剂试验结果表明,母根营养生长期内以4叶期喷施两次效果最好,甜菜的株高、根长、根重、叶重明显增加,母根增产达22.2%,增加糖分2.6度;母根定植后喷施以抽苔期、初花期连喷两次效果最好,种子产量提高23.2%,而且发芽势、发芽率、千粒重、剖仁率均有不同程度地提高。植物基因活化剂使用方便、成本低廉,使用时应注意不要与碱性物质混用,喷后8h内遇雨应补喷。

超声引导下细针穿刺研究ret基因活化与人类甲状腺癌的关系

目的 研究 ret基因的活化与人类甲状腺癌的关系。方法 对 5 0例高度怀疑甲状腺癌的甲状腺结节患者采用超声引导下细针穿刺技术与 RT- PCR技术相结合 ,研究活检组织中 ret基因的活化形式 PTC基因的表达。结果 乳头状癌 2 6例 ,其中有 7例 (2 7% ) PTC基因表达阳性 ;另 2 4例中滤泡状癌 1 0例 ,未分化癌 2例 ,腺瘤 5例 ,结节性甲状腺肿 7例 ,均未见 PTC基因表达。结论 ret基因的活化仅出现在甲状腺乳头状癌中 ,因此对

基因活化基质材料促进自体前交叉韧带移植物愈合的组织学观察

背景:基因活化基质是将生物材料与质粒DNA相结合,形成一个基因局部释放系统。目的:观察基因活化基质材料应用于前交叉韧带损伤后移植物愈合过程中的组织学形态变化,比较其胶原表达情况和细胞超显微结构的差异性。方法:制备新西兰大白兔膝关节前交叉韧带重建模型后分为2组,实验组在半腱肌移植物固定重建前交叉韧带后,给予转化生长因子β1和脂质体制备的基因活化基质材料,对照组同样处理后给予空载体。结果与结论:光学显微镜下见各时期对照组成纤维细胞数量较少且胶原纤维排列紊乱,实验组成纤维细胞数量较多,胶原纤维成分增多,形状粗大且排列较规则,接近正常组织结构。电镜下见各时期实验组细胞内微结构较对照组有丝分裂活跃,出现代谢旺盛的成纤维细胞,纤维间隙内有较多基质成分,胞质中可见较为丰富的内质网和线粒体。提示转化生长因子对韧带的愈合有促进作用。

奇茵─植物基因活化剂在葡萄、哈密瓜上的应用

15％奇茵-植物基因活化剂源于天然生物制剂，它对激活作物优良基因和多种酶的活性，增强作物抗性，增产增质有显著作用。为了确定奇茵一植物基因活化剂对哈密瓜和葡萄的防病、增产、增质效果，通过试验为在吐鲁番地区的大面积推广提供理论依据及最佳使用浓度。