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安徽省新型布尼亚病毒基因测序鉴定方法的建立 被引量:1
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作者 孙永 胡万富 +3 位作者 张永根 何军 王俊 袁媛 《安徽预防医学杂志》 2012年第5期319-321,共3页
目的建立发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒基因测序鉴定方法,对安徽省在2011年从病人血清中分离到的10株疑似发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒进行基因测序鉴定,并分析其序列特征。方法设计引物,RT-PCR法扩增病毒核酸,对扩增产物进行... 目的建立发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒基因测序鉴定方法,对安徽省在2011年从病人血清中分离到的10株疑似发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒进行基因测序鉴定,并分析其序列特征。方法设计引物,RT-PCR法扩增病毒核酸,对扩增产物进行测序分析。结果设计的三对引物可有效扩增核酸序列,10株疑似发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒L、M、S三段基因序列和2010年我国发现毒株序列相似性93%以上,10株病毒和Phlebovirus AH12、Phlebovirus HN6两株病毒同属于一个进化分支,和白蛉病毒属的其它病毒株不在一个分枝上。结论 2011年从病人血清中分离到的10株病毒为发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒,应加强安徽省对该病的监测,有效预防大范围传播。 展开更多
关键词 发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒 RT-PCR 基因测序鉴定方法
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应用16SrRNA基因序列分析与细菌生化反应鉴定膝关节脓液分离的念珠状链杆菌 被引量:7
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作者 张伟铮 邓光远 +3 位作者 屈平华 陈文科 林冬玲 陈茶 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第11期1814-1817,共4页
目的:对我院一名患者左膝关节脓液中分离到的1株少见病原菌进行16S rRNA基因测序鉴定,探讨该方法在临床病原菌鉴定方面的意义。方法:采用16S rRNA基因序列的测定、细菌形态学以及商品化的Vitek 2全自动细菌鉴定药敏系统、API 20NE、API ... 目的:对我院一名患者左膝关节脓液中分离到的1株少见病原菌进行16S rRNA基因测序鉴定,探讨该方法在临床病原菌鉴定方面的意义。方法:采用16S rRNA基因序列的测定、细菌形态学以及商品化的Vitek 2全自动细菌鉴定药敏系统、API 20NE、API 20E与API 50CH系统的生化实验进行细菌的表型鉴定。结果:该菌在血平板和巧克力平板生长缓慢,麦康凯平板不生长;血平板上菌落形态呈1~2 mm"油煎蛋"圆形凸起,边缘光滑、半透明、湿润;镜下革兰染色阴性,呈链状排列,菌体1~3μm,呈圆形、卵圆形或梭形等;Vitek 2 GN-13、API 20NE、API 20E均为不能鉴定的细菌;16S rRNA基因序列分析的结果显示该菌与念珠状链杆菌的相似度为100%。结论:该膝关节脓液分离出的病原菌为念珠状链杆菌,16S rRNA基因序列分析能提供有力的遗传学证据,结合细菌的生化反应可准确地鉴定该菌。 展开更多
关键词 念珠状链杆菌 生化反应 16S RRNA 基因测序鉴定
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应用16S rRNA基因序列分析与细菌生化反应鉴定湖生代夫特菌 被引量:4
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作者 陈茶 屈平华 +3 位作者 黄彬 刘建平 张妮 袁慧 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第15期3572-3574,共3页
目的对某医院术后感染中分离到的4株不常见病原菌进行菌种鉴定。方法采用16SrRNA基因序列的测定、细菌形态学以及商品化的VITEK-2GN、API 20NE系统相结合的多相分类学方法。结果该4株菌均为需氧的革兰阴性非发酵菌,其氧化酶阳性,在血平... 目的对某医院术后感染中分离到的4株不常见病原菌进行菌种鉴定。方法采用16SrRNA基因序列的测定、细菌形态学以及商品化的VITEK-2GN、API 20NE系统相结合的多相分类学方法。结果该4株菌均为需氧的革兰阴性非发酵菌,其氧化酶阳性,在血平板、巧克力平板、麦康凯平板等常用培养基上生长良好;采用VITEK-2GN与API 20NE系统,该4株菌均鉴定为食酸代夫特菌/食酸丛毛单胞菌,并显示为极好的鉴定度;但16SrRNA基因序列分析的结果显示,该4株菌与食酸代夫特菌的相似度仅为98.4%,而与鹤原代夫特菌、湖生代夫特菌的同源性更高,分别为99.9%和100.0%;其甘露醇同化试验与苹果酸同化试验阳性,与湖生代夫特菌一致而不同于鹤原代夫特菌。结论该术后感染的4株病原菌均为湖生代夫特菌,16SrRNA基因序列分析能提供有力的遗传学证据。 展开更多
关键词 代夫特菌属 RNA 核糖体 16S RRNA 基因测序鉴定
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Preliminary Studies on Identification of Lycium Linn.Germplasm Resources by nrDNA ITS Sequencing 被引量:1
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作者 石志刚 安巍 +3 位作者 樊云芳 焦恩宁 赵建华 王亚军 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2008年第1期35-38,共4页
[Objective] The study aimed to identify woltberry (Lycium Linn.) germplasm resources at molecular level by analyzing the nrDNA ITS sequence. [Method] Genomic DNA from woltberry leaves extracted by modified CTAB meth... [Objective] The study aimed to identify woltberry (Lycium Linn.) germplasm resources at molecular level by analyzing the nrDNA ITS sequence. [Method] Genomic DNA from woltberry leaves extracted by modified CTAB method were regarded as templates for PCR amplification by specific primer, clone and sequencing. [Result] The nrDNA ITS sequences were obtained and then differentiated among three tested materials. [Conclusion] PCR amplification and sequencing on nrDNA ITS is a feasible approach to identify different woltberry germplasm resources. 展开更多
关键词 Lycium L ITS sequence DNA sequencing IDENTIFICATION
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Antibiotic resistance mechanisms of Myroides sp. 被引量:1
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作者 Shao-huaHU Shu-xing YUAN +4 位作者 Hai QU Tao JIANG Ya-jun ZHOU Ming-xi WANG De.song MING 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2016年第3期188-199,共12页
Bacteria of the genus Myroides (Myroides spp.) are rare opportunistic pathogens. Myroides sp. infections have been reported mainly in China. Myroides sp. is highly resistant to most available antibiotics, but the re... Bacteria of the genus Myroides (Myroides spp.) are rare opportunistic pathogens. Myroides sp. infections have been reported mainly in China. Myroides sp. is highly resistant to most available antibiotics, but the resistance mechanisms are not fully elucidated. Current strain identification methods based on biochemical traits are unable to identify strains accurately at the species level. While 16S ribosomal RNA (rRNA) gene sequencing can accurately achieve this, it fails to give information on the status and mechanisms of antibiotic resistance, because the 16S rRNA sequence contains no information on resistance genes, resistance islands or enzymes. We hypothesized that ob- taining the whole genome sequence of Myroides sp., using next generation sequencing methods, would help to clarify the mechanisms of pathogenesis and antibiotic resistance, and guide antibiotic selection to treat Myroides sp. infec- tions. As Myroides sp. can survive in hospitals and the environment, there is a risk of nosocomial infections and pandemics. For better management of Myroides sp. infections, it is imperative to apply next generation sequencing technologies to clarify the antibiotic resistance mechanisms in these bacteria. 展开更多
关键词 Myroides sp. Antibiotic resistance Identification methods 16S ribosomal RNA gene sequencing Nextgeneration sequencing
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