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放射诱导正反馈基因环路调控Wt-p53表达对肺腺癌移植瘤的抑制作用 被引量:4
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作者 毛丽伟 王卫东 +2 位作者 廖国清 王红梅 陈正堂 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期473-476,共4页
目的:探讨放射控导的wt-p53蛋白正反馈基因环路对肺腺癌细胞裸鼠移植瘤放射增敏作用及机制。方法:将治疗组pE6R4-p53-EGFP/H1299细胞和对照组pE6-p53-EGFP/H1299、pR4-p53-EGFP/H1299、H1299(p53-/-)细胞分别注射于裸鼠背部皮下,建立裸... 目的:探讨放射控导的wt-p53蛋白正反馈基因环路对肺腺癌细胞裸鼠移植瘤放射增敏作用及机制。方法:将治疗组pE6R4-p53-EGFP/H1299细胞和对照组pE6-p53-EGFP/H1299、pR4-p53-EGFP/H1299、H1299(p53-/-)细胞分别注射于裸鼠背部皮下,建立裸鼠移植瘤模型;X线照射后,绘制肿瘤生长曲线;计算各组抑瘤率;免疫组化法检测瘤组织wt-p53表达;计算TCD50及放射增敏比(SER)。结果:pE6R4-p53-EGFP/H1299+IR组移植瘤生长明显受抑制,抑瘤率(86.41%)明显高于对照组pE6-p53-EGFP/H1299+IR组(70.76%)、pR4-p53-EGFP/H1299+IR组(35.53%)和H1299+IR组(12.58%)。免疫组化提示pE6R4-p53-EGFP/H1299组比pR4-p53-EGFP/H1299、pE6-p53-EGFP/H1299组wt-p53蛋白表达量明显增高。pE6R4-p53-EGFP/H1299组和对照组pE6-p53-EGFP/H1299和H1299(p53-/-)荷瘤鼠TCD50分别为12.1Gy、15.2Gy和19.4Gy,SER分别为1.6和1.28。结论:放射控导的wt-p53蛋白正反馈基因环路能在体内正常激活并发挥抗肿瘤生物学效应,且显著增加了瘤组织对放射的敏感性。 展开更多
关键词 基因环路 X线 肺腺癌
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放射控导正反馈基因环路对肺癌wt-p53基因靶向性表达的研究 被引量:3
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作者 毛丽伟 王卫东 +1 位作者 李德志 陈正堂 《重庆医学》 CAS CSCD 2007年第19期1921-1923,共3页
目的构建pE_6R_4/p53/GFP重组质粒并检测其在人非小细胞肺癌H1299(p53—/—)细胞的辐射诱导表达。方法用嵌合型增强子E_6R_4取代pci-neo质粒的CMV增强子,将wt-p53cDNA全长序列、IRES_2-EGFP报告基因片段构建于嵌合型增强子E_6R_4下游,获... 目的构建pE_6R_4/p53/GFP重组质粒并检测其在人非小细胞肺癌H1299(p53—/—)细胞的辐射诱导表达。方法用嵌合型增强子E_6R_4取代pci-neo质粒的CMV增强子,将wt-p53cDNA全长序列、IRES_2-EGFP报告基因片段构建于嵌合型增强子E_6R_4下游,获得pE_6R_4/p53/GFP重组质粒,采用脂质体法将重组质粒转染人非小细胞肺癌H1299(p53—/—)细胞;采用RT-PCR方法鉴定wt-p53基因整合情况;Western-blot方法检测不同辐射剂量8mVX线照射后,被转染细胞中wt-p53蛋白表达水平和持续时间。结果酶切和测序鉴定pE_6R_4/p53/GFP重组质粒构建正确;不同剂量8mVX线照射后,4Gy照射剂量时wt- p53基因表达最强,且持续时间延长。结论成功将辐射反应元件和正反馈基因环路技术相结合,实现了wt-p53基因的表达调控,为进一步研究非小细胞肺癌的放射-基因联合治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 基因环路 X线 非小细胞肺癌细胞
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放射控导的wt-p53蛋白正反馈基因环路对肺腺癌细胞周期、凋亡及放射敏感性的影响 被引量:2
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作者 毛丽伟 廖国清 +2 位作者 王红梅 王卫东 陈正堂 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期462-465,共4页
目的研究体外环境放射控导的wt-p53蛋白正反馈基因环路对肺腺癌细胞细胞周期、凋亡率及放射敏感性的影响。方法采用直线加速器8MV-X线,400MU/min、4Gy、源皮距100cm的照射条件照射治疗组pE6R4-p53-EGFP/H1299转染细胞和对照组H1299(p53-... 目的研究体外环境放射控导的wt-p53蛋白正反馈基因环路对肺腺癌细胞细胞周期、凋亡率及放射敏感性的影响。方法采用直线加速器8MV-X线,400MU/min、4Gy、源皮距100cm的照射条件照射治疗组pE6R4-p53-EGFP/H1299转染细胞和对照组H1299(p53-/-)、pE6-p53-EGFP/H1299和pR4-p53-EGFP/H1299转染细胞,12h后收集各组细胞,流式细胞仪分析该环路在放射线诱导下对肺腺癌细胞周期和细胞凋亡率的影响;绘制细胞放射剂量-存活曲线,计算平均致死剂量(Do)值及放射增敏比(sensitive enhancement ratio,SER)。结果4Gy8MV-X线照射治疗组和对照组细胞后12h,治疗组细胞在照射后(75.13±1.42)%发生明显G0/G1期阻滞;照射后各组细胞凋亡率均高于照射前,照射后治疗组细胞凋亡率为(23.73±0.21)%,分别是对照组H1299(p53-/-)细胞[(4.17±0.12)%]、pE6-p53-EGFP/H1299细胞[(15.67±0.32)%]、pR4-p53-EGFP/H1299细胞[(9.23±0.15)%]的5.69、1.51倍和2.57倍。治疗组pE6R4-p53-EGFP/H1299细胞和对照组pE6-p53-EGFP/H1299、H1299(p53-/-)细胞Do值分别0.91、1.073、1.413Gy,根据Do值计算SER分别为2.63和1.34。结论放射可诱导wt-p53蛋白正反馈基因环路上调wt-p53蛋白表达,从而调控肺腺癌细胞发生显著G/G1阻滞,使细胞凋亡比例增加,显著提高了肺腺癌细胞放射敏感性。 展开更多
关键词 放射治疗剂量 肿瘤抑制蛋白p53 基因环路 非小细胞肺癌 细胞系 肿瘤 辐射耐受性 体外研究
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合成生物学在AAV基因治疗中的应用
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作者 武鑫 叶海峰 《新兴科学和技术趋势》 2024年第1期0025-0038,共14页
基因治疗在精准医学中崭露头角,对医疗和诊断产生深远影响。腺相关病毒(AAV)基因载体成为基因治 疗中领先的基因传递工具,其作为安全、免疫原性低、血清型多样、具有组织特异性的临床基因治疗载体,在体内具 有长期效果。然而,AAV 递送... 基因治疗在精准医学中崭露头角,对医疗和诊断产生深远影响。腺相关病毒(AAV)基因载体成为基因治 疗中领先的基因传递工具,其作为安全、免疫原性低、血清型多样、具有组织特异性的临床基因治疗载体,在体内具 有长期效果。然而,AAV 递送的基因过量表达可能引起毒性或副作用。因此,新一代合成生物学工程化的 AAV 载体正在崛起,合成生物学能够在细胞转导和基因表达的不同阶段对载体功能进行控制,精准调控目的基因表达。 本文将围绕基因环路的设计思路和方法,AAV 基因治疗的研究进展以及合成生物学在 AAV 基因治疗方面的研究 进展进行介绍。最后对合成生物学驱动的 AAV 基因治疗走向临床治疗的应用前景和挑战进行展望。合成生物学 驱动的 AAV 基因治疗在提供精准和个性化治疗方案方面展现出巨大潜力,有望扩大治疗范围并降低成本,但同时 面临免疫应答、靶向性、生产成本及伦理监管等关键挑战。 展开更多
关键词 合成生物学 腺相关病毒 AAV 基因治疗 基因环路
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肠神经胶质细胞在炎症性肠病中的作用研究进展
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作者 杜俊艳 骆淑娥 温萌 《中外医疗》 2023年第25期195-198,共4页
近年来,肠神经胶质细胞(enteric glial cell,EGC)在炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)发病机制中引起广泛关注。在IBD患者中,肠道EGC通过释放细胞因子和介质参与调节肠道炎症反应,EGC与肠道上皮细胞、免疫细胞和神经元等相互... 近年来,肠神经胶质细胞(enteric glial cell,EGC)在炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)发病机制中引起广泛关注。在IBD患者中,肠道EGC通过释放细胞因子和介质参与调节肠道炎症反应,EGC与肠道上皮细胞、免疫细胞和神经元等相互作用,参与调节肠道的免疫平衡和功能,EGC在炎症性肠病治疗中的潜在应用,调控和干预EGC有望为治疗提供新思路和策略。 展开更多
关键词 肠神经系统 肠神经胶质细胞 胶质细胞源性神经营养因子-胶质细胞系源性神经营养因子受体α1/原癌基因自分泌环路
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Fluctuation Resonance of Feed Forward Loops in Gene Regulatory Networks 被引量:1
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作者 董翊 侯中怀 辛厚文 《Chinese Journal of Chemical Physics》 SCIE CAS CSCD 2009年第4期359-365,447,共8页
The feed forward loop (FFL), wherein a gene X can regulate target gene Z alone or cooperatively with gene Y, is one of the most important motifs in gene regulatory networks. Gene expression often involves a small nu... The feed forward loop (FFL), wherein a gene X can regulate target gene Z alone or cooperatively with gene Y, is one of the most important motifs in gene regulatory networks. Gene expression often involves a small number of reactant molecules and thus internal molecular fluctuation is considerable. Here we studied how an FFL responds to small external signal inputs at gene X, with particular attention paid to the fluctuation resonance (FR) phenomenon of gene Z. We found that for all coherent FFLs, where the sign of the direct regulation path from X to Z is the same as the overall sign of the indirect path via Y, the FR shows a regular single peak, while for incoherent FFLs, the FR exhibits distinct bimodal shapes. The results indicate that one could use small external signals to help identify the regulatory structure of an unknown FFL in complex gene networks. 展开更多
关键词 Gene regulatory network Fluctuation resonance Feed-forward-loop
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DNA chip-based expression profile analysis indicates involvement of the phosphatidylinositol signaling pathway in multiple plant responses to hormone and abiotic treatments 被引量:12
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作者 Wen Hui LIN, Rui YE, Hui MA, Zhi Hong XU, Hong Wei XUE National Laboratory of Plant Molecular Genetics, Institute of Plant Physiology and Ecology, Shanghai Institutes for Biological Sciences (SIBS), Chinese Academy of Sciences and Partner Group of Max-Planck-Institute of Molecular Plant Physiology (MPI-MP) on "Plant Molecular Physiology and Signal Transduction", 300 Fenglin Road, 200032 Shanghai, China 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2004年第1期34-45,共12页
The phosphatidylinositol (PI) metabolic pathway is considered critical in plant responses to many environmental factors,and previous studies have indicated the involvement of multiple PI-related gene families during c... The phosphatidylinositol (PI) metabolic pathway is considered critical in plant responses to many environmental factors,and previous studies have indicated the involvement of multiple PI-related gene families during cellular responses.Through a detailed analysis of the Arabidopsis thaliana genome,82 polypeptides were identified as being involved in PI signaling. These could be grouped into different families including PI synthases (PIS),PI-phosphate kinases (PIPK),phospholipases (PL),inositol polyphosphate phosphatases (IPPase),inositol polyphosphate kinases (IPK),PI transfer proteins and putative inositol polyphosphate receptors. The presence of more than 10 isoforms of PIPK,PLC,PLD and IPPase suggested that these genes might be differentially expressed during plant cellular responses or growth and development. Accordingly,DNA chip technology was employed to study the expression patterns of various isoforms.In total,79 mRNA clones were amplified and used for DNA chip generation. Expression profile analysis was performed using samples that represented multiple tissues or cellular responses. Tested samples included normal leaf,stem and flower tissues,and leaves from plants treated with various hormones (auxin,cytokinin,gibberellin,abscisic acid and brassinosteroid) or environmental factors (temperature,calcium,sodium,drought,salicylic acid and jasmonic acid).Results showed that many PI pathway-related genes were differentially expressed under these experimental conditions.In particular,the different isoforms of each family were specifically expressed in many cases,suggesting their involvement in tissue specificity and cellular responses to environmental conditions. This work provides a starting point for functional studies of the relevant PI-related proteins and may help shed light onto the role of PI pathways in development and cellular responses. 展开更多
关键词 PHOSPHATIDYLINOSITOL signal transduction DNA chip expression profile.
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