miR-7和miR-30-5p抑制CTSK表达对贵州黑山羊繁殖基因的影响

为验证miR-7和miR-30-5p对贵州黑山羊CTSK基因的调控效率及其对产羔基因的影响,通过生物软件筛选出调控CTSK效率最高的2条miRNAs:miR-7和miR-30-5p;将2条miRNAs转染至卵巢颗粒细胞,并于转染后24 h和48 h分别提取细胞总RNA,采用qRT-PCR法分别检测2条miRNAs在转染24 h和48 h的表达效率;同时检测miR-7和miR-30-5p过表达对CTSK基因及产羔相关基因FSHβ、GDF9、BMP15和BMPR-1B表达水平的影响。实验结果表明:转染miR-7和miR-30-5p至卵巢颗粒细胞24 h后,2条miRNAs的表达水平均极显著高于对照组(NC组);转染48 h后,miR-30-5p表达水平极显著低于NC组,而miR-7与NC组相比无显著性差异。此外,过表达2条miRNAs对CTSK基因和繁殖相关基因的影响发现,与NC组相比,转染miR-7 24 h后能极显著抑制CTSK的表达,且上调产羔基因FSHβ、GDF9、BMP15的表达;而转染miR-30-5p对CTSK的表达无明显抑制作用,但极显著上调了产羔基因FSHβ、GDF9、BMP15和BMPR-1B的表达。综上可见,与miR-30-5p相比,miR-7更有可能通过抑制CTSK表达来促进产羔相关基因的表达,进而影响贵州黑山羊繁殖性能。本研究结果为后续研究miR-7和miR-30-5p影响贵州黑山羊繁殖性状的分子机制奠定了基础。

关于基因繁殖的反应扩散系统(0,1)解的定态分歧

作者应用谱理论和规范化Lyapunov-Schmidt约化方法研究了关于基因繁殖的反应扩散系统(0,1)解的定态分歧,在特征值的代数重数为1的情况下,在一定条件下得到了定态方程从二阶非退化奇点处分歧出的正则分歧解.

山东省八个猪种繁殖、肉质、抗病基因多态性分析

利用PCR-RFLP等技术检测了山东省8个猪种(莱芜黑猪、大蒲莲黑猪、烟台黑猪、新沂蒙黑猪、里岔黑猪、五莲黑猪、鲁烟白猪和昌潍白猪)606个样品的繁殖(FSHβ、ESR和PRLR)、肉质(Haln)和抗病(FUT I)性状的主要功能基因的多态性分布,结果表明:山东省猪种上述5个基因均具有丰富的多态性,特别是FSHβ、ESR和PRLR3个影响繁殖性状有利基因的基因频率很高,是其高繁殖性能的基础。Haln和FUT I基因在中外猪种间有不同的分布特征,通过Haln和FUT I基因在中外猪种间频率的对比,初步分析了山东省各猪种受国外猪种的影响的程度,为山东省猪种遗传资源的保护和开发利用提供基础资料和科学依据。

日粮能量和蛋白水平对动物繁殖相关基因表达的调控

日粮营养水平对动物繁殖调控影响机制的研究已经到分子水平,日粮营养水平对动物繁殖相关基因表达的研究可揭示其对动物繁殖调控的分子机制。文章就日粮能量和蛋白水平对与动物繁殖相关的FSHR、LHR和IGF基因的表达调控进行了综述,为进一步研究营养水平调控动物繁殖的分子机理提供理论指导。

国内绵羊高繁殖力基因的研究和应用

文章就FecB基因、FecX基因和FecGH基因等几个高繁殖力基因在国内绵羊上的研究和应用作了简要概述,并展望了绵羊高繁殖力基因的发展前景。

火鸡疱疹病毒繁殖非必须基因重组病毒用转移载体的构建

目的 构建用于基因工程疫苗制作的火鸡疱疹病毒 (HVT)外源基因转移用载体。方法 利用PCR技术 ,从感染火鸡疱疹病毒的鸡胚成纤维细胞 (CEF)基因组中成功地扩增出火鸡疱疹病毒的繁殖非必须基因 US基因 ,将该PCR产物克隆进PGEM T载体中 ,利用末端平滑化技术和连接反应 ,把报告基因LacZ基因插入到US基因中。结果 构建出了用于制作重组HVT病毒的转移载体。结论 本研究以LacZ作为报告基因 ,成功的将其插入到US基因中 。

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗肌肉注射诱导小鼠的细胞免疫

将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF 5基因疫苗(pcDNA-PRRSV-ORF 5)以50、100、200μg 3个剂量肌注免疫BALB/c小鼠,以PBS和空载体质粒pcDNA为对照,采用流式细胞仪(FACS)、淋巴细胞增殖试验(M TT法)分别对小鼠外周血中CD4+、CD8+T淋巴细胞数和淋巴细胞转化功能进行了检测。结果,3个剂量的pcDNA-PRRSV-ORF 5接种小鼠后,其外周血都对ConA有明显的反应性,试验组与对照组比较差异极显著(P<0.01)或显著(P<0.05),CD4+T淋巴细胞数在免疫后7 d高于对照组(P<0.01),CD8+T淋巴细胞在免疫后28 d高于对照组,大剂量基因疫苗免疫小鼠的细胞免疫应答高于中、小剂量。结果表明,pcDNA-PRRSV-ORF 5免疫小鼠能够诱导机体产生良好的细胞免疫应答,并表现一定的剂量依赖性。

猪IL-2真核表达质粒对猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗诱导小鼠细胞免疫增强作用的研究

目的 :研究猪白细胞介素 2真核表达质粒 (pcDNA IL 2 )对猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗 (pcDNA PRRSV ORF5 )诱导BALB/c小鼠产生细胞免疫应答的影响。方法 :用pcDNA IL 2与PRRSVORF5基因疫苗 (pcDNA PRRSV ORF5 )共同免疫BALB/c小鼠 ,以空载质粒pcDNA为阴性对照 ,PBS为空白对照 ;采用流式细胞仪 (FACS)、淋巴细胞增殖试验(MTT法 )分别对小鼠外周血中CD4 + 、CD8+ T淋巴细胞数和淋巴细胞的转化功能进行了检测。结果 :pcDNA IL 2与pcDNA PRRSV ORF5共同免疫小鼠后外周血对ConA有明显的反应性 ,CD4 + 、CD8+ T淋巴细胞数在免疫后 7天显著超过对照组 ,共同组与单独pcDNA PRRSV ORF5组有显著差异 (P <0 0 1)。结论 :pcDNA PRRSV ORF5免疫小鼠能够诱导其机体产生良好的细胞免疫应答 ,猪pcDNA IL 2能够显著增强pcDNA PRRSV ORF5诱导小鼠细胞免疫的能力。

鸡繁殖性状候选基因的研究进展

概述了鸡繁殖性状候选基因的研究情况,指出了采用候选基因法筛选出在鸡繁殖性状上具有显著效应的数量性状基因座或主效基因,进一步通过标记辅助选择来提高鸡的繁殖性能。

繁殖期和休产期成年东北白鹅繁殖轴相关基因表达和激素水平的动态变化

为研究不同繁殖阶段东北白鹅下丘脑—垂体—卵巢轴繁殖相关基因表达水平和血清激素浓度的变化,以500只成年东北白鹅为研究对象,在自然光照和饲养管理情况下,记录鹅群的开产时间和饲养日产蛋率,按饲养产蛋率将一个繁殖周期分为休产期、产蛋前期、产蛋高峰期和产蛋后期,在各阶段分别选取5只东北白鹅,静脉采血,采集下丘脑、垂体、卵巢的组织样本。测定不同繁殖阶段血清中FSH,LH和PRL的浓度,组织样本提取总RNA,反转录后进行实时荧光定量PCR分析,测定繁殖相关基因表达水平变化。东北白鹅在2月25日产蛋率达到5%,产蛋高峰出现在4月中旬到5月中旬,6月末逐渐停产。下丘脑中,产蛋高峰期Clock基因的表达水平显著高于产蛋后期(P<0.05);试验期内GnRH基因表达水平呈下降趋势,休产期与产蛋后期差异显著(P<0.05);产蛋高峰期VIP基因的表达水平显著高于产蛋后期(P<0.05)。在垂体中,LH基因在休产期的表达水平极显著低于产蛋期(P<0.01);FSH基因的表达水平在产蛋高峰期及之前呈上升趋势,差异极显著(P<0.01),在产蛋后期下降,极显著低于产蛋高峰期(P<0.01);PRL基因在产蛋高峰期及之前的表达水平极显著低于产蛋后期(P<0.01)。在卵巢中,FSHR基因在产蛋高峰期的表达水平极显著高于产蛋后期(P<0.01),变化趋势与Clock基因相似。FSH在产蛋后期的血清浓度极显著高于休产期和产蛋前期(P<0.01),在产蛋高峰期极显著高于产蛋后期(P<0.01);LH在繁殖期的血清浓度极显著高于休产期(P<0.01),在产蛋高峰期极显著高于产蛋前期和产蛋后期(P<0.01)。Clock基因、FSH基因、LH基因和FSHR基因的表达水平变化趋势与产蛋曲线的变化相似。东北白鹅下丘脑、垂体、卵巢中Clock基因和繁殖相关基因的表达水平与鹅的产蛋节律密切相关,血液中FSH和LH在产蛋高峰期的浓度明显高于繁殖期的其他阶段和休产期。

蒙脱石、枯草芽孢杆菌及其互作对蛋鸡血浆激素含量、卵巢繁殖相关基因表达和肠道微生物的影响

本试验旨在研究蒙脱石(MMT)、枯草芽孢杆菌(BS)及其互作对蛋鸡血浆激素含量、卵巢繁殖相关基因表达和肠道微生物的影响。采用2×2双因子随机设计,选择360只29周龄健康的罗曼蛋鸡,随机分为4组(每组6个重复,每个重复15只),分别饲喂基础饲粮(对照组)、基础饲粮+0.5 g/kg MMT (MMT组)、基础饲粮+5×108CFU/kg BS (BS组)、基础饲粮+0.5 g/kg M M T+5×108CFU/kg BS(M M T+BS组)。预试期7 d,正试期70 d。结果表明:1)与对照组相比,添加MMT显著降低了蛋鸡血浆皮质醇和促肾上腺皮质激素含量(P<0.05),添加BS显著提高了血浆促卵泡激素含量(P<0.05)。2)与对照组相比,添加MMT显著下调了蛋鸡卵巢催乳素受体和促卵泡激素受体mRNA的表达量(P<0.05),添加BS显著降低了胃饥饿素mRNA的表达量(P<0.05),二者对胃饥饿素mRNA的表达量存在显著互作效应(P<0.05)。3)与对照组相比,添加MMT和BS均显著降低了蛋鸡十二指肠产气荚膜梭菌和沙门氏菌的相对含量(P<0.05),添加M M T显著降低了回肠产气荚膜梭菌的相对含量(P<0.05),二者对小肠产气荚膜梭菌、大肠杆菌和沙门氏菌相对含量存在显著交互作用(P<0.05)。可见,饲粮中单独添加MMT或BS及二者联用均能改善蛋鸡肠道菌群,下调卵巢催乳素受体mRNA的表达量;添加MMT能降低血浆应激激素含量,BS可提高血浆促卵泡激素含量;此外,添加BS及其与MMT互作能够下调卵巢胃饥饿素mRNA的表达量。

红曲霉繁殖相关wetM基因的克隆与生物信息学分析

红曲霉(Monascus spp.)是一类次级代谢产物极为丰富的食药用丝状真菌,其繁殖能力是大规模工业化生产的前提。以实验室保藏紫色红曲霉(Monascus purpureus)Mp-21为研究对象,通过高通量转录组(RNA-Seq)测序获得菌株转录本数据后进行注释分析,首次克隆出红曲霉繁殖相关wetM基因并进行生物信息学分析。wetM基因开放阅读框内(ORF)长度为1659 bp,负责翻译552个氨基酸,分子式C_(2605)H_(4067)N_(781)O_(831)S_(18),分子量60199.76,理论等电点(pI)8.15。进一步对wetM基因中的ORF序列分析得到的WetA蛋白与其他丝状真菌中的WetA蛋白在最后的90个氨基酸显示出极高的相似度,有一定的同源性,其保守结构域含有多个结构类型,属于非典型结构域。

绵羊高繁殖力基因的研究及利用

文章就BMPR-IB基因、BMP4基因和BMPR-IA基因等几个高繁殖力基因和尚需深入研究的高繁殖力基因(GnRHR、INHA、FSHβ以及PGR)在绵羊上的研究做了简要概述,旨在为探讨绵羊高繁殖力的形成规律提供理论依据。

维生素E对鹅反季节繁殖卵泡发育的调节作用及研究现状

鹅的繁殖具有典型的季节特征,最终导致全年不均衡生产,使市场供需不足,价格波动较大。维生素E对家禽保持正常繁殖机能发挥重要作用。但关于维生素E对鹅产蛋基因、卵泡发育调控、生殖器官以及反季节繁殖卵泡发育过程中细胞凋亡基因Dicer和产蛋性能候选基因(CGLP)等表达影响的相关研究鲜见报道。本文就维生素E对调节种鹅反季节繁殖卵泡发育的研究现状及其展望作一综述。

特种野猪ESR基因、FSHβ基因的多态性分析

研究利用PCR和PCR-RFLPs等技术检测了特种野猪72个样品的繁殖(ESR和FSHβ)性状的主要功能基因的多态性分布,ESR基因运用PCR-RFLPs法研究它们的遗传变异,FSHβ基因直接采用PCR进行检测,检测这两种基因不同基因型在特种野猪群体中的分布频率。并对其进行群体遗传学分析,结合特种野猪的繁殖性能记录,建立合理统计分析模型,旨在研究ESR和FSHβ这两种基因对特种野猪产仔数性状的影响,从基因角度寻找特种野母猪繁殖力低的原因,寻找其解决办法,利用分子遗传标记手段提高特种野母猪的繁殖性能。结果表明:FSHβ基因和ESR基因可以作为控制猪高繁殖率的候选基因。注意提高ESR基因中等位基因B的频率,将能显著提高猪群的繁殖性能。

绵羊BMPR1A基因组织表达及其多态性与产羔数的关联分析

为探索BMPR1A基因在不同生理时期(卵泡期和黄体期)和不同繁殖力(单羔组和多羔组)小尾寒羊组织表达特征及其多样性与小尾寒羊产羔数的关系,采用qPCR技术检测BMPR1A基因在小尾寒羊14种组织中的表达特征。同时,采用Sequenom MassARRAY SNP技术对BMPR1A基因3个SNPs位点在大群中的多态性进行检测,并与小尾寒羊产羔数进行关联。qPCR结果显示,BMPR1A在14种组织中均有表达,其中在大脑、下丘脑和甲状腺组织高表达;BMPR1A在卵泡期和黄体期多羔组下丘脑和卵巢组织表达量均高于单羔组,但未达到显著水平。分型发现BMPR1A基因g.41128335A>T和g.41127600C>T位点在单、多羔绵羊品种间的基因频率和基因型频率达到显著水平。卡方适合性检验结果显示,3个SNPs在大多数绵羊品种中均处于Hardy-Weinberg平衡状态。关联分析结果发现,3个SNPs多态性与小尾寒羊各胎产羔数均无显著相关,但g.41128335A>T和g.41127598A>G位点突变型产羔数基本上均高于野生型。以上结果初步表明,BMPR1A基因表达与小尾寒羊产羔数增加存在一定程度的正相关,但3个SNPs与小尾寒羊各胎产羔数均无显著关联,说明它们可能均不是影响BMPR1A基因功能的关键位点。

22个高繁殖力SNP位点在贵德黑裘皮羊群体中的分布特征

贵德黑裘皮羊是青藏高原藏羊群体中的一种特殊的地方品种资源,以生产黑紫羔皮而闻名。同其他藏羊一样,贵德黑裘皮羊胎产仔数多为单羔,极少见两羔及多羔。为提高其繁殖性能,本研究对其群体繁殖性能相关基因位点进行了研究。实验选取BMPR1B、GDF9、BMP15、ESR1、GnRHR、FSHR、LHR和PRLR等基因中的22个高繁殖力相关基因位点,采用多重单碱基延伸SNP分型技术(SNaPshot)对348只贵德黑裘皮羊群体中以上8个基因的22个SNP位点的多态性进行了检测分析。检测结果发现在该群体中存在以下突变位点:BMPR1B的FecB(g.746A>G)、GDF9的G1(g.260 G>A)、ESR1外显子1的c.106A>T、FSHR外显子10的c.904T>G、LHR外显子11的c.1020C>A和c.1425T>A、PRLR外显子10位点的g.304A>G和g.585C>G,以及BMP15外显子1的c.28-30del缺失,共8个SNP和1个缺失突变,且每个位点的最小等位基因频率分别为0.003、0.014、0.342、0.103、0.227、0.414、0.132、0.092和0.129。其中LHR外显子11的c.1020C>A和c.1425T>A位点呈完全连锁遗传。本研究结果为采用分子标记辅助选育方法提高贵德黑裘皮羊的繁殖力提供了依据。

动物分子育种技术在肉牛育种中的应用

随着分子遗传学和现代生物技术的快速发展,分子数量遗传学也得到了相应发展,为分子育种技术的发展和进一步应用提供了基础与保障。与传统的育种方法比较,动物分子育种是直接在分子水平上对性状的基因进行选择,因此选种和育种的准确性更高。文章综述了分子育种技术在肉牛育种中的应用进展,为肉牛分子育种技术的应用提供参考。