基于肿瘤微环境的基因给药纳米载体的研究进展

近年来基因给药系统在肿瘤治疗中的研究备受关注。纳米载体具有增强药物靶向性、增加生物膜通透性、控制药物释放速度、提高生物利用度和可承载生物大分子等优点。由于肿瘤的快速增殖和代谢,形成了具有低pH、高水平谷胱甘肽、高水平活性氧、缺氧性、高表达酶和高水平ATP等特性的肿瘤微环境(TME)。基于肿瘤组织特异性微环境的基因给药纳米载体能同时提高基因药物的胞外稳定性、胞内释放能力和靶向性,可更大程度地提高药物的抗肿瘤作用、减少不良反应的发生。本文对基于TME的pH响应型、还原响应型、活性氧响应型、缺氧响应型、酶响应型、ATP响应型和多智能响应型纳米载体进行综述,总结各类型纳米载体的作用机制、制备、抗肿瘤效果及局限性。基因给药纳米载体可提高基因的转染效率,提高抗肿瘤作用,在抗肿瘤应用中有较好的前景。

阳离子聚合物在基因给药中的应用

目的 介绍阳离子聚合物在基因给药系统中的应用研究进展。方法 总结近年文献 ,从阳离子聚合物的结构和种类、与DNA形成复合物的理化性质、介导基因转染的特点及入胞机制等方面进行分析和综述。结果 阳离子聚合物的结构具有较大的可变性 ,可以通过结构改造和配体修饰等手段来改变Polyplexes的理化性质 ,提高稳定性和转染效率。 结论 阳离子聚合物是一种新型的非病毒类基因传递系统 ,在基因治疗领域中有广阔的应用前景。

肝靶向基因给药系统AsOR-PL+PEG-PEI的研究

目的:研制含有靶向配基、DNA聚合亚基、溶酶体活性成分及聚乙二醇等多种组分的肝靶向的DNA给药系统。 方法:分别制备AsOR-PL偶合物及PEG-PEI偶合物,然后按照不同的比例先后与报告基因DNA形成复合物,再进行Huh-7细胞的体外转染试验和静脉给药后小鼠体内的表达试验。 结果:AsOR-PL/PEG-PEI/DNA复合物对受体阳性的Huh-7细胞具有较高的转染效率;小鼠尾静脉给药后能够在肝脏特异性表达。 结论:含有靶向配基、DNA聚合亚基、溶酶体活性成分及聚乙二醇等多种组分的载体系统能将DNA选择性的投放于小鼠肝脏,显示了较好的应用前景。

碘化油阳离子乳剂在基因给药中的应用

首先制备出粒径为136.5 nm、表面电荷为+24.3mV的碘化油阳离子乳剂,然后以绿色荧光质粒pEG-FP-C1为模型药物,通过在体外细胞培养来观察碘化油阳离子乳剂作为基因载体对机体细胞转染率的影响.体外细胞培养结果显示,碘化油阳离子乳剂复合物的细胞膜穿过率明显提高,转染率远高于裸质粒.

BMP-2基因给药修复实验性羊股骨头坏死

目的利用人BMP-2基因转染的自体骨髓间充质干细胞复合多孔β-磷酸三钙材料治疗股骨头坏死。方法对22只羊建立股骨头缺血性坏死模型。未治疗组4只;治疗组18只于3周后刮除坏死骨组织,右侧植入BMP-2基因转染的自体骨髓间充质干细胞和多孔磷酸三钙复合物(BMP-2组),左侧植入β-半乳糖苷酶(β-gal,作为对照基因)基因转染的自体骨髓间充质干细胞和多孔磷酸三钙复合物(β-gal组)。植入后第1、2、3周用ELISA方法测定植入局部的BMP-2蛋白表达水平。植入前、植入后6、10、16周取股骨头标本,观察骨长入情况,并对16周标本行骨形态计量学分析和影像学观察。未治疗组动物于造模后16周摄Χ线片行影像学观察。结果植入后1、2、3周BMP-2组在股骨头局部有BMP-2蛋白的高表达,明显高于β-gal组。植入前软骨下骨部位出现大量空骨陷窝,骨髓腔纤维化。植入后6、10、16周BMP-2组均有明显成骨,16周时坏死区被完全修复;β-gal组只有较少新骨形成,16周时坏死区仍多为纤维组织。BMP-2组新骨体积明显大于β-gal组。造模后16周未治疗组双侧股骨头塌陷;植入后16周β-gal组股骨头存在囊状密度减低区;BMP-2组股骨头形态规则,无塌陷。结论BMP-2基因转染的骨髓间充质干细胞与多孔β-磷酸三钙复合后可修复早期股骨头坏死。

BMP-2基因给药加速骨组织再生

上海第二医科大学附属第九人民医院骨科戴尅戎教授、汤亭亭研究员和美国华盛顿大学医学院华裔学者楼觉人教授合作基因研究获重大突破，他们研发的BMP-2基因给药技术能有效地促进骨组织再生，这一由上海市科委资助的重大科研成果日前通过市科委主持的专家组鉴定，特别是对大动物节段性骨缺损的研究成果被评定为国际领先水平。

BMP2基因给药加速骨组织再生

上海第二医科大学附属第九人民医院骨科戴克戎教授，汤亭亭研究从中央到地方和美国华盛顿大学医学院楼觉人教授合作研发的BMP2基因给药技术能有效促进骨再生的课题，日前通过了上海市科委主持的专家组鉴定。

药物相关基因型指导的华法林初始给药剂量对心脏瓣膜置换术后抗凝疗效的影响

目的:探讨使用药物相关基因型指导的华法林初始给药剂量对心脏瓣膜置换术后抗凝疗效的影响。方法:纳入心脏瓣膜置换术后服用华法林抗凝治疗的患者,根据药物相关基因型计算华法林初始给药剂量,记录随访3个月内患者国际标准化比值(international normalized ratio,INR)达标的次数、INR在治疗范围内的时间(time in therapeutic range,TTR)和血栓形成、出血事件。结果:共纳入45例心脏瓣膜置换术后服用华法林治疗的患者,对所有患者均完成了3个月的随访。华法林初始给药剂量范围为1.875~3.0 mg/d,平均中位给药剂量为2.5 mg/d。随访期中共监测患者INR 869次,其中达标的有714次,平均TTR为82.2%(其中第1周内TTR最低,为62.3%)。结论:使用药物相关基因型指导的华法林初始给药剂量治疗能有效减少心脏瓣膜置换术后抗凝治疗患者的血栓形成和出血事件。

DNA/阳离子脂质体复合物的构效关系

目的综述近年DNA/阳离子脂质体复合物(lipoplexes)构效关系的研究进展。方法根据近年来有关研究文献,对DNA/阳离子脂质体复合物的结构及构效关系进行了综述。结果与讨论构效关系的研究及深入阐明,可指导设计高效安全的载体。

具有穿膜功能的嵌合型AVPI-低分子量鱼精蛋白/DNA共给药系统的抗肿瘤研究

本文旨在合成具有穿膜活性的促凋亡AVPI-低分子量鱼精蛋白嵌合多肽(AVPI-LMWP),制备安全有效的AVPI-LMWP/p TRAIL基因共给药系统,通过凋亡肽AVPI与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因(p TRAIL)联合用药来发挥抗肿瘤作用。采用标准固相合成法合成嵌合型多肽AVPI-LMWP。基于静电吸附作用,AVPI-LMWP可与DNA药物形成AVPI-LMWP/p TRAIL复合物,并对其理化性质进行了表征,同时研究其细胞摄取效率和抗肿瘤增殖能力。结果表明,采用共孵育法成功制备了AVPI-LMWP/p TRAIL复合物,随着AVPI-LMWP/p TRAIL质量比的增加,复合物的平均粒径逐渐减小,zeta-电位变化较小。凝胶电泳实验结果表明,当两者质量比大于15∶1时,AVPI-LMWP能完全包裹和压缩质粒p TRAIL。体外细胞摄取实验显示,随着二者质量比的增加,细胞摄取效率有所提高。体外细胞毒性实验表明,AVPI-LMWP/p TRAIL(W∶W=20∶1)复合物抑制He La细胞增殖的效果显著强于p TRAIL、AVPI-LMWP及LMWP/p TARIL复合物。研究显示,AVPI-LMWP/p TRAIL基因共给药系统能将质粒高效递送到He La细胞内,并能有效地诱导肿瘤细胞凋亡,是具有联合治疗应用价值的多肽/基因共给药系统。