利用CRISPR/Cas9技术构建gdf 11基因敲除小鼠及其表型鉴定

为了探讨敲除生长分化因子11(gdf11)基因对小鼠生长性状的影响,本试验根据gdf 11基因序列设计向导RNA(sgRNA)并利用规律成蔟的短间隔回文重复序列和CRISPR相关蛋白(CRISPR/Cas9)基因编辑系统对该基因进行敲除,利用显微注射的方法获得gdf 11敲除型F0代小鼠,通过聚合酶链式反应(PCR)和测序鉴定子代小鼠基因型。繁育后观察F1代小鼠形态,并采用骨架染色方法观察不同基因型小鼠的性状。结果显示,成功构建了gdf 11基因敲除小鼠,并且通过繁育得到了野生型(gdf 11^(+/+))、杂合型(gdf 11^(+/-))和纯合型(gdf 11^(-/-))3种基因型的小鼠;形态观察发现,与野生型小鼠相比,纯合型小鼠在围产期死亡且尾巴是截断的,骨架染色显示,野生型小鼠有13个胸椎和6个腰椎,纯合型小鼠有18个胸椎和9个腰椎。结果表明,敲除gdf 11基因可能会影响小鼠胚胎和中轴骨发育从而改变小鼠的生长性状。

胆管癌动物模型建立方法研究进展

疾病动物模型的意义是为了研究疾病的发生、发展规律和研究防治措施。在对疾病动物模型的研究中,有意识地改变自然条件下不可能或不容易排除的因素,能更加准确地观察模型的变化,并将研究结果推及于人类疾病。胆管癌是一种发生在胆道系统的侵袭性上皮恶性肿瘤,具有高度异质性和不良的预后。为了研究胆管癌的发生发展机制和和开发潜在药物,建立合适的胆管癌动物模型显得尤为重要。本文综述目前常用的胆管癌动物模型,包括致癌物和寄生虫诱导模型、移植瘤模型和基因工程小鼠模型。这些模型各有优劣,能够从不同角度模拟人类胆管癌的特征,如肿瘤微环境、免疫反应、分子变异等。本文讨论这些模型在药物筛选和评价方面的应用,并指出目前存在的一些问题和挑战,以期为胆管癌的研究和治疗提供参考。