野生型p53及相关调控基因的转录、翻译水平与肠道干细胞分化的关系

目的 探讨野生型 p53(wtp53)基因及其相关调控基因转录、翻译水平的变化与肠道干细胞分化的关系。方法 利用逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR)和免疫组织化学技术 ,以细胞分化标志肝脂肪酸结合蛋白 (L Fabp)mRNA水平为动态参照 ,分别检测大鼠胚胎期E1 4d ,E1 7d,E1 9d和幼鼠期P1d,P2d,P7d,P2 8d及成年大鼠小肠细胞内p53mRNA、p2 1mRNA及其蛋白表达。 结果 从胚胎E1 9d至成年大鼠 ,RT PCR能够检测到小肠细胞内L Fabp的mRNA ,其中P2d,L Fabp的mRNA含量最高 ,证实这个期间为肠道干细胞高分化阶段。从胚胎到成年大鼠 ,小肠细胞p2 1mRNA及其蛋白表达均为阴性 ,p53mRNA水平无明显变化。然而从E1 4d～P2d ,小肠上皮细胞p53蛋白信号呈逐渐增强趋势。P7d以后至成年期 ,p53蛋白信号为阴性。结论 在肠道干细胞迅速分化期 ,p53蛋白高表达可能是因为其半衰期延长 ,最终导致蛋白量累积的结果 ,而与转录水平无关 ,提示蛋白的稳定性对于p53调节肠道干细胞分化期基因的稳定性十分重要 ,另外 ,p53蛋白调节肠道干细胞的分化机制与p2