儿童2型神经纤维瘤并肝豆状核变性一例报告并文献复习

目的探讨1例2型儿童神经纤维瘤并肝豆状核变性的临床特点及基因突变情况。方法收集分析2型神经纤维瘤并肝豆状核变性患儿的临床资料及基因结果。结果患儿,男,5岁11个月龄,因不自主左眼睑下垂4天就诊,既往有眼球震颤、左侧内斜和视力下降。DNA测序显示ATP7B基因存在复合杂合突变,该变异为已知致病突变,其中16号外显子上的c.3443T>C错义突变,遗传自表型正常母亲;12号外显子上的c.2804C>T错义突变,遗传自表型正常父亲。NF2基因存在c.1009C>T(p.Gln337*)无义突变,该变异未见文献报道。结论确诊了1例2型神经纤维瘤并肝豆状核变性儿童,丰富了人类基因突变数据库,同时临床医生需提高对基因报告解读的重视和认识。

Me32aT22／2L细胞内肝豆状核变性基因的表达恢复铜转运功能的实验研究

目的观察Me32aT22／2L细胞内肝豆状核变性基因（ATP7B基因）的表达是否可以转运细胞内的多余铜及纠正铜对细胞的毒性作用，为基因治疗肝豆状核变性奠定基础。方法采用脂质体lipofectamin2000，将含A嬲cDNA重组真核表达质粒PRC／CMV—WD导入Me32aT22／2L细胞内，免疫荧光检测ATP7B在细胞内的表达分布；高铜孵育培养观察外源性ATP7B的铜转运功能，以及检测ATP7B减低高铜对细胞的毒性作用。结果转染后的Me32aT22／2L细胞内可检测到ATP7B的表达，且分布在细胞核的周围；在高铜孵育24、48、72h后，转染空载体组细胞内铜的含量分别为（600．60±69．71）ng／mg、（890．72±65．74）ng／mg和（1189．20±85．71）ng／mg．而表达有外源性ATP7B的细胞内铜的含量分别为（351．33±49．86）ng／mg、（427．38±30．95）ng／mg和（539．10±34．91）ng／mg，两组相比差异均有统计学意义（P〈0．01）；同时，与转染空载体组相比．转染ATP7B基因的细胞中的细胞凋亡率明显降低，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论ATP7B基因转入Me32aT22／2L细胞后能得到有效表达，并可以将细胞内多余的铜转运出去，从而降低了铜对细胞的凋亡诱导作用。