急性缺血性脑卒中患者血清长链非编码RNA母系表达基因3和Zeste同源物增强子-2表达与神经功能损伤的相关性分析

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)与Zeste同源物增强子-2(EZH2)在急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清中的表达水平及其与神经功能损伤之间的关系。方法选取延安市人民医院2021年1月至2022年11月收治的92例AIS患者为脑卒中组,92例健康体检者为对照组,根据NIHSS评分将脑卒中组患者分为致残性损伤组19例,非致残性损伤组73例。采用实时荧光定量聚合酶链式反应、酶联免疫吸附法分别检测血清lncRNAMEG3、EZH2水平。采用Spearman相关分析法进行AIS患者血清lncRNAMEG3、EZH2表达水平与美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分之间的相关性分析;采用多因素Logistic回归分析AIS患者合并神经功能致残性损伤的影响因素,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA MEG3、EZH2水平对AIS患者合并神经功能致残性损伤的诊断价值。结果脑卒中组患者血清lncRNA MEG3、EZH2表达水平均高于对照组(t=11.817、11.542,P<0.05)。Spearman相关分析显示,AIS患者血清lncRNA MEG3、EZH2水平与NIHSS评分均呈正相关(r=0.540、0.603,P<0.01)。致残性损伤组体质量指数、吸烟史占比、甘油三酯、总胆固醇、同型半胱氨酸、发病-到院时间(ODT)、lncRNAMEG3、EZH2水平均高于非致残性损伤组(t/χ2=2.103、5.050、9.121、5.585、2.276、5.448、4.638、4.682,P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,甘油三酯、总胆固醇、lncRNA MEG3、EZH2以及ODT均是AIS患者合并神经功能致残性损伤的影响因素(OR=4.853、4.277、2.674、3.052、3.901,P<0.05)。lncRNA MEG3、EZH2联合诊断AIS患者合并神经功能致残性损伤的曲线下面积(AUC)大于lncRNAMEG3以及EZH2单独诊断的AUC(Z=2.626、2.954,P<0.01),敏感度、特异度分别为94.74%、82.15%。结论AIS患者血清lncRNA MEG3、EZH2水平均上升,与AIS患者神经功能损伤程度均正相关,可用作AIS患者合并神经功能致残性损伤的诊断指标,且联合诊断效果更好。

乙型肝炎病毒HBx基因的shRNA重组表达载体的构建和鉴定

目的:构建pGenesil-3.1-HBx-shRNA重组表达载体,探讨其作用于HepG2.2.15细胞的生物活性.方法:构建了针对HBx基因的siRNA表达载体,通过电穿孔法转染HepG2.2.15细胞,以荧光显微镜观察细胞的转染效率,QRT-PCR检测细胞中HBx基因的相对表达量,利用CCK-8细胞增殖检测试剂盒检测了细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡.结果:酶切和测序鉴定证实构建质粒含有HBx基因,QRT-PCR检测和荧光显微镜观察到构建的pGenesil-3.1-HBx-shRNA可以在HepG2.2.15细胞中表达,HBx基因的表达下降了28%(P<0.05),细胞增殖水平下降了47%(P<0.05),质粒pGenesil-3.1-HBx-shRNA转染后的HepG2.2.15细胞凋亡率显著升高.结论:乙型肝炎病毒HBx基因的shRNA重组表达载体构建成功,沉默HBx基因的shRNA能够抑制HBx基因的表达,且对HepG2.2.15细胞的增殖水平起明显的抑制作用.

特应性皮炎患儿血清长链非编码RNA母系表达基因3和微小RNA-23b-3p水平检测及意义

目的:探讨特应性皮炎(AD)患儿血清长链非编码RNA母系表达基因3(lncRNA MEG3)和微小RNA-23b-3p(miR-23b-3p)水平检测及意义。方法:选取AD患儿165例(AD组)和体检健康儿童160例(对照组)为研究对象。采用荧光定量PCR法检测两组血清lncRNA MEG3和miR-23b-3p水平。采用AD积分指数(SCORAD)对AD患儿疾病严重程度进行评估,并将AD组患儿分为AD轻度组(65例)、AD中度组(68例)和AD重度组(32例)。比较对照组和AD组以及不同严重程度AD患儿血清lncRNA MEG3、miR-23b-3p水平。采用Pearson法分析AD组血清lncRNA MEG3、miR-23b-3p水平和SCORAD评分三者间的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA MEG3、miR-23b-3p水平检测对中、重度AD的诊断价值。结果:与对照组比较,AD组血清lncRNA MEG3和miR-23b-3p水平显著降低(均P<0.05)。与AD轻度组比较,AD中度组和AD重度组血清lncRNA MEG3、miR-23b-3p水平依次降低,SCORAD评分依次升高(均P<0.05)。AD组血清lncRNA MEG3、miR-23b-3p水平呈正相关(r=0.404,P<0.05)。血清lncRNA MEG3、miR-23b-3p水平与SCORAD评分均呈负相关(r=-0.383、-0.366,均P<0.05)。血清lncRNA MEG3、miR-23b-3p单项及联合检测诊断中度AD的曲线下面积(AUC)分别为0.818、0.753、0.883。与血清lncRNA MEG3、miR-23b-3p单独检测比较,两者联合检测诊断中度AD的AUC更高(Z=2.177、3.595,均P<0.05)。血清lncRNA MEG3、miR-23b-3p单项及联合检测诊断重度AD的AUC分别为0.794、0.778、0.895。与血清lncRNA MEG3、miR-23b-3p单独检测比较,两者联合检测诊断重度AD的AUC更高(Z=2.104、2.293,均P<0.05)。结论:AD患儿血清lncRNA MEG3和miR-23b-3p水平呈低表达,与病情严重程度有关,有望成为评估儿童AD病情程度的生物标志物。

缺血性脑卒中患者lncRNA MEG8表达水平与神经功能缺损程度的相关性

目的:研究血清长链非编码RNA母系表达基因8(lncRNA MEG8)表达与缺血性脑卒中患者神经功能缺损程度的相关性。方法:将本院收治的135例缺血性脑卒中患者作为缺血性脑卒中组,并根据NIHSS评分将其细分为轻度缺损组、中度缺损组、重度缺损组;另选取于本院体检的脑神经功能正常的128例体检者为对照组。收集各组基线资料,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清lncRNA MEG8表达水平;缺血性脑卒中患者不同时间点血清lncRNA MEG8表达水平与基线资料及神经功能缺损程度相关性采用Spearman及Pearson分析;采用Logistic回归进行缺血性脑卒中患者神经功能缺损程度的影响因素分析。结果:缺血性脑卒中组入院第2 d、入院第7 d、入院第14 d血清lncRNA MEG8表达水平均高于对照组(P<0.05)。入院第14 d血清lncRNA MEG8表达水平低于入院第2 d、入院第7 d(P<0.05)。重度缺损组血清lncRNA MEG8表达水平高于中度缺损组和轻度缺损组(P<0.05),中度缺损组血清lncRNA MEG8表达水平高于轻度缺损组(P<0.05)。缺血性脑卒中患者血清lncRNA MEG8表达水平与神经功能缺损程度、高血压、颈动脉粥样硬化、糖尿病、收缩压、TC、LDL-C、Hs-CRP均呈正相关(P<0.05),与HDL-C呈负相关(P<0.05)。lncRNA MEG8、颈动脉粥样硬化是缺血性脑卒中患者发展为中/重度神经功能缺损的独立危险因素(P<0.05)。结论:血清lncRNA MEG8表达水平与缺血性脑卒中患者神经功能缺损程度呈正相关。

颈动脉支架植入术后血清长链非编码RNA结直肠肿瘤差异表达基因水平及临床意义

目的探讨颈动脉支架植入术后血清长链非编码RNA(LncRNA)结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)水平及临床意义。方法选取2018年1月至2019年6月在邢台市人民医院接受颈动脉支架植入术治疗的173例颈动脉狭窄性急性缺血性脑卒中(AIS)患者作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测患者血清LncRNA CRNDE相对表达量,并分析其与预后的关系。结果173例颈动脉狭窄性AIS患者支架植入术后预后不良发生率为39.88%(69/173)。预后不良组患者血清LncRNA CRNDE相对表达量为(1.35±0.34)%,显著高于预后良好组[(0.93±0.19)%](P<0.001)。Logistic回归分析显示,出血转化、脑卒中病灶数、LncRNA CRNDE与颈动脉狭窄性AIS患者预后关系密切。模型B(出血转化+脑卒中病灶数+LncRNA CRNDE)评估颈动脉狭窄性AIS患者预后的效能,高于LncRNA CRNDE、模型A(出血转化+脑卒中病灶数)(Z=2.603,P=0.009;Z=2.945,P=0.003)。结论LncRNA CRNDE与颈动脉狭窄性AIS患者支架植入术后预后关系密切,检测血清LncRNA CRNDE表达有助于评估患者预后。

长链非编码RNA母系表达基因3、微小RNA-21表达与冠状动脉钙化的相关性分析

目的探究长链非编码RNA母系表达基因3(LncRNA MEG3)、微小RNA-21(miR-21)与冠状动脉钙化的相关性。方法选取2018年6月至2019年6月在邯郸市中心医院行冠状动脉造影及CT检查确诊为冠状动脉钙化病人189例作为钙化组,另选取同期在该院行冠状动脉造影及CT检查显示无冠状动脉钙化者183例作为未钙化组。采用实时荧光定量PCR(qRTPCR)法检测血清LncRNA MEG3、miR-21表达水平,采用Pearson法分析病人血清LncRNA MEG3、miR-21水平及与糖化血红蛋白(HbA1c)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平相关性,采用logistic回归模型分析冠状动脉钙化发生的影响因素,采用ROC曲线评估血清LncRNA MEG3、miR-21表达水平对冠状动脉钙化的预测价值。结果与未钙化组相比,钙化组血清miR-21[2.87±0.93比1.02±0.29]、HbA1c[(6.95±1.31)%比(5.41±1.26)%]、hs-CRP[(5.13±1.74)mg/L比(3.02±1.01)mg/L]、TNF-α[(11.72±3.92)ng/L比(9.82±4.13)ng/L]、IL-1β水平[(4.96±0.95)ng/L比(2.32±0.74)ng/L]及冠心病(80.95%比15.85%)、高血压比例(53.97%比22.40%)较高(P<0.05),血清LncRNA MEG3表达水平[0.62±0.17比1.01±0.31]较低(P<0.05)。冠状动脉钙化病人血清LncRNA MEG3与miR-21、hs-CRP、TNF-α、IL-1β水平呈负相关,miR-21与hs-CRP、TNF-α、IL-1β水平呈正相关(P<0.05)。冠心病、LncRNA MEG3、miR-21水平是影响冠状动脉钙化发生的危险因素(P<0.05)。血清LncRNA MEG3、miR-21联合检测预测冠状动脉钙化的曲线下面积为0.88[95%CI:(0.84,0.91)],灵敏度为84.13%,特异度为85.79%。结论冠状动脉钙化病人血清LncRNA MEG3表达水平明显降低,miR-21表达水平明显升高,二者可能作为生物标志物,共同预示冠状动脉钙化发生。

胆管癌患者血清长链非编码RNA母系表达基因3表达及其与预后相关性研究

目的:探讨胆管癌患者血清长链非编码RNA母系表达基因3(lncRNA MEG3)表达及其与预后的关系。方法:选取胆管癌患者92例(胆管癌组)和体检健康者92例(对照组)为研究对象。术后随访36个月,根据预后情况分为预后不良组(44例,患者死亡)和预后良好组(48例,患者存活)。采用荧光定量PCR检测血清lncRNA MEG3表达水平。比较对照组与胆管癌组血清lncRNA MEG3表达水平。比较预后良好组和预后不良组临床资料、病理特征及血清lncRNA MEG3表达水平。采用Spearman法分析胆管癌患者血清lncRNA MEG3表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移、血管浸润的相关性。采用多因素Logistic回归分析胆管癌患者预后不良的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清lncRNA MEG3对胆管癌患者预后不良的预测价值。结果:胆管癌组血清lncRNA MEG3表达水平低于对照组(P<0.05)。预后不良组肿瘤低分化、TNM分期Ⅲ期、有淋巴结转移、有血管浸润比例高于预后良好组,血清lncRNA MEG3表达水平低于预后良好组(均P<0.05)。胆管癌患者血清lncRNA MEG3表达水平与肿瘤分化程度呈正相关,与TNM分期、淋巴结转移、血管浸润呈负相关(均P<0.05)。肿瘤低分化、TNM分期Ⅲ期、有淋巴结转移、血清lncRNA MEG3低表达是胆管癌患者预后不良的独立危险因素(均P<0.05)。血清lncRNA MEG3预测胆管癌患者预后不良的曲线下面积为0.820,截断值为0.620,敏感度为87.10%,特异度为70.80%。结论:胆管癌患者血清lncRNA MEG3呈低表达,与患者预后密切相关,对预测胆管癌患者预后不良有较高预测价值。

RNA对基因表达调控作用的研究进展

RNA可以单独或者通过与其它蛋白因子的相互作用参与基因表达的调控。在转录前水平,RNA分子可以通过介导DNA的甲基化或异染色质的形成来调控基因表达;在转录水平,RNA分子通过直接与转录因子或RNA聚合酶相互作用来调控基因表达;在转录后水平,RNA利用由siRNA和microRNA介导的RNA干扰机制,通过降解目标mRNA或阻碍目标基因的翻译来沉默基因的表达。此外,mRNA还可以通过感知环境中代谢物的浓度,通过形成核糖开关(riboswitch)来调控基因的表达;反义RNA可以从复制、转录和翻译3个水平上调控基因的表达。

视网膜色素上皮细胞LncRNA MEG3在不同葡萄糖浓度下的表达情况及对VEGF和TGF-β1表达的影响

目的探讨长链非编码RNA母系表达基因3(LncRNA MEG3)在不同浓度葡萄糖下表达情况及对血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法按照不同浓度d-葡萄糖培养ARPE-19细胞,随机分为5 mmol·L^(-1)d-葡萄糖组、15 mmol·L^(-1)d-葡萄糖组、30 mmol·L^(-1)d-葡萄糖组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组ARPE-19细胞LncRNA MEG3、VEGF mRNA、TGF-β1 mRNA相对表达水平。ARPE-19细胞转染PCDNA-MEG3及PCDNA-NC质粒,建立LncRNA MEG3过表达ARPE-19细胞及转染空质粒的ARPE-19细胞。以含30 mmol·L^(-1)d-葡萄糖的DMEM分别培养以下各组ARPE-19细胞:LncRNA MEG3过表达ARPE-19细胞(O组);转染空质粒的ARPE-19细胞(NC组);加入PBS的正常ARPE-19细胞(G组);同时以含5 mmol·L^(-1)d-葡萄糖的DMEM培养正常ARPE-19细胞(C组);以上各组细胞培养24 h后,采用RT-qPCR法及Western blot法检测各组ARPE-19细胞VEGF mRNA和VEGF蛋白、TGF-β1 mRNA和TGF-β1蛋白的相对表达水平。结果与5 mmol·L^(-1)d-葡萄糖组比较,15 mmol·L^(-1)d-葡萄糖组和30 mmol·L^(-1)d-葡萄糖组ARPE-19细胞LncRNA MEG3相对表达水平降低,VEGF mRNA、TGF-β1 mRNA相对表达水平升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与15 mmol·L^(-1)d-葡萄糖组比较,30 mmol·L^(-1)d-葡萄糖组ARPE-19细胞LncRNA MEG3相对表达水平降低,VEGF mRNA、TGF-β1 mRNA相对表达水平升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与G组和NC组比较,O组ARPE-19细胞VEGF mRNA和VEGF蛋白、TGF-β1 mRNA和TGF-β1蛋白相对表达水平均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论高糖下调ARPE-19细胞LncRNA MEG3的表达,上调VEGF和TGF-β1的表达。LncRNA MEG3过表达降低高糖诱导的VEGF和TGF-β1表达的升高。LncRNA MEG3可能通过抑制VEGF和TGF-β1的表达调节糖尿病视网膜病变的发展。

高血压病人血清中长链非编码RNA MEG3、miR-142-3p表达及与内皮功能的相关性

目的:通过检测高血压病人血清中长链非编码RNA母系表达基因3(lncRNA MEG3)和微小RNA-142-3p(miR-142-3p)的表达水平,分析两者与高血压相关内皮功能的相关性。方法:入选2018年8月—2020年10月我院门诊部收治的145例高血压病人为观察组,另入选同期在我院体检的145名健康体检者为对照组。所有研究对象空腹采集5 mL静脉血,采用反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测血清lncRNA MEG3和miR-142-3p的mRNA的相对表达水平,酶联免疫吸附技术检测血清一氧化氮(NO)、血管内皮素(ET-1)、血管性血友病因子(vWF)表达水平,比较观察组和对照组各项指标表达水平。根据疾病分级标准将观察组高血压病人分为轻度组(45例)、中度组(60例)和重度组(40例),比较不同组别之间各项指标表达水平,使用Pearson法分析观察组血清lncRNA MEG3和miR-142-3p表达水平与NO、ET-1和vWF水平之间的相关性及lncRNA MEG3与miR-142-3p表达水平之间的相关性。结果:与对照组比较,观察组血清lncRNA MEG3和NO的表达水平下降(P<0.001),血清miR-142-3p、ET-1和vWF的表达水平升高(P<0.001);血清lncRNA MEG3和NO在轻度组、中度组和重度组高血压病人中的表达水平依次降低,血清miR-142-3p、ET-1和vWF的表达水平则依次增高(P<0.001);观察组血清lncRNA MEG3表达水平与NO水平呈正相关(r=0.682,P<0.001),与ET-1和vWF水平呈负相关(r=-0.500,P<0.001;r=-0.637,P<0.001);血清miR-142-3p表达水平与NO水平呈负相关(r=-0.683,P<0.001),与ET-1和vWF水平呈正相关(r=0.458,P<0.001;r=0.678,P<0.001);观察组血清lncRNA MEG3与miR-142-3p表达水平呈负相关(r=-0.607,P<0.001);多因素Logistic回归分析结果显示,lncRNA MEG3、NO水平降低及miR-142-3p、ET-1、vWF水平升高均是高血压的危险因素(P<0.05)。结论:高血压病人血清中lncRNA MEG3表达水平降低,miR-142-3p表达水平升高,可能在高血压的进展中具有调节作用,其表达水平能够反映高血压病人内皮功能受损的程度。

LncRNA MEG3和miR-21在口腔颌面部恶性肿瘤患者血清中的表达和临床意义

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)母体表达基因3(MEG3)和微小RNA-21(miR-21)在口腔颌面部恶性肿瘤患者血清中的表达和临床意义。方法选取2016年11月至2018年12月于本院就诊的72例口腔颌面部恶性肿瘤患者(观察组)、72例口腔颌面部良性肿瘤患者(良性对照组)、70例健康体检者(健康对照组)作为研究对象。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测3组研究对象血清MEG3、miR-21表达水平。结果3组研究对象血清MEG3和miR-21相对表达量比较差异有统计学意义(P<0.01)。(1)观察组血清MEG3相对表达量显著低于良性对照组、健康对照组(P<0.05),miR-21相对表达量显著高于良性对照组、健康对照组(P<0.05);良性对照组血清MEG3相对表达量显著低于健康对照组(P<0.05),miR-21相对表达量显著高于健康对照组(P<0.05)。(2)观察组患者不同病理类型之间血清MEG3、miR-21相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)观察组Ⅰ~Ⅱ期患者血清MEG3相对表达量显著高于Ⅲ~Ⅳ期患者,血清miR-21相对表达量显著低于Ⅲ~Ⅳ期患者(P<0.01)。(4)Pearson相关分析显示,观察组患者血清MEG3、miR-21相对表达量呈显著负相关(r=-0.812,P<0.01)。⑸血清MEG3、miR-21单独检测对口腔颌面部恶性肿瘤均具有较好的诊断价值(AUC均>0.7),二者联合检测的AUC明显高于单独检测,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论口腔颌面部恶性肿瘤患者血清MEG3表达降低、miR-21表达升高,且这两个指标与患者TNM分期密切相关。与单一指标相比,两个指标联合检测对口腔颌面部恶性肿瘤具有更佳的临床诊断价值。

LncRNA MEG8通过靶向miR-15a-5p调控MICA/B介导结直肠癌细胞免疫逃逸

目的:探究长链非编码RNA母系表达基因8(LncRNA MEG8)通过靶向miR-15a-5p调控MHCⅠ类相关蛋白A/B(MICA/B)介导的结直肠癌(CRC)细胞免疫逃逸机制。方法:RT-qPCR、Western blot检测CRC组织和细胞系MEG8、miR-15a-5p、MICA、MICB、NKG2D蛋白水平;双荧光素酶实验验证MEG8对miR-15a-5p的调控关系;采用脂质体转染法将NC、MEG8、miR-NC、miR-15a-5p分别或共转染至SW480、SW620细胞,记为NC组、MEG8组、MEG8+miR-NC组、MEG8+miR-15a-5p组;将NK细胞分别与SW480、SW620细胞共培养;ELISA检测共培养液中TNF-α、IFN-γ水平;CCK-8、EdU染色、Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力;RT-qPCR、Western blot检测细胞MEG8、miR-15a-5p、MICA、MICB、NKG2D蛋白水平。结果:与癌旁组织或正常结肠上皮细胞相比,CRC组织和细胞系中MEG8、MICA、MICB、NKG2D mRNA和蛋白水平降低,miR-15a-5p水平升高(P<0.05)。MEG8靶向调控miR-15a-5p。共培养体系中,与NC组相比,MEG8组细胞MICA、MICB、NKG2D蛋白水平、共培养上清液中TNF-α、IFN-γ水平明显升高,培养1 d、2 d、3 d后,OD值、EdU阳性率、迁移和侵袭细胞数明显降低(P<0.05);过表达miR-15a-5p能部分逆转过表达MEG8对细胞MICA、MICB、NKG2D、TNF-α、IFN-γ水平和增殖、侵袭转移能力的影响(P<0.05)。结论:MEG8通过靶向miR-15a-5p调控MICA、MICB表达,促进NK细胞活性,抑制CRC细胞免疫逃逸。

胃癌组织lncRNA MEG3、miR-7-5p表达水平变化及与患者临床分期和预后的关系

目的探讨胃癌(GC)组织长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)、微小RNA(miR)-7-5p表达水平变化及与患者临床分期及预后的关系。方法选取2017年1月至2019年12月该院收治的104例GC患者为研究对象,将患者的GC组织标本作为GC组,对应的癌旁组织标本作为癌旁组织组,另选取同期52例行手术治疗的胃良性肿瘤患者的肿瘤组织标本作为良性肿瘤组。比较3组lncRNA MEG3、miR-7-5p表达水平;比较不同临床分期GC患者GC组织lncRNA MEG3、miR-7-5p表达水平;采用Spearman相关分析GC组织lncRNA MEG3、miR-7-5p表达水平与患者临床分期的相关性;采用多因素Logistic回归分析GC患者临床分期的影响因素;随访24个月,比较GC组织不同lncRNA MEG3、miR-7-5p表达水平患者的生存情况。结果GC组lncRNA MEG3、miR-7-5p表达水平低于癌旁组织组、良性肿瘤组,癌旁组织组lncRNA MEG3、miR-7-5p表达水平高于良性肿瘤组,差异有统计学意义(P<0.05)。随着临床分期的进展,GC组织lncRNA MEG3、miR-7-5p表达水平呈降低趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,GC组织lncRNA MEG3、miR-7-5p表达水平与患者临床分期均呈负相关(r=-0.527、-0.501,P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,GC组织lncRNA MEG3、miR-7-5p表达水平为GC患者临床分期的影响因素(P<0.05)。GC组织lncRNA MEG3高表达患者生存率高于lncRNA MEG3低表达患者(χ^(2)=5.344,P=0.021);miR-7-5p高表达患者生存率高于miR-7-5p低表达患者(χ^(2)=5.208,P=0.023)。结论GC组织中lncRNA MEG3、miR-7-5p水平呈异常低表达,且表达水平越低的患者临床分期越高,预后相对更差,lncRNA MEG3、miR-7-5p可作为GC病情及预后评估的参考指标。

LncRNA MEG3在病毒性毛细支气管炎患儿外周血单个核细胞和痰液中表达及意义

目的:通过检测病毒性毛细支气管炎患儿外周血单个核细胞和痰液中LncRNA MEG3表达,分析其对疾病临床意义。方法:选取2017年2月至2019年1月上海市松江区九亭医院和上海市松江区中心医院收治的病毒性毛细支气管炎患儿103例,另选取同期体检显示健康婴幼儿103例为对照组。采集或收集患儿外周血单个核细胞和痰液后用qRT-PCR法检测LncRNA MEG3表达,分析其与患儿临床病理特征及预后关系。结果:对照、轻度、中度和重度组患儿外周血单个核细胞和痰液中LncRNA MEG3表达水平依次显著降低,两两比较差异有统计学意义(P均<0.05);对照、轻度、中度和重度组患儿外周血单个核细胞和痰液中VEGF mRNA表达水平依次显著升高,两两比较差异有统计学意义(P均<0.05)。患儿外周血单个核细胞中及痰液中LncRNA MEG3表达水平与VEGF mRNA表达水平均呈负相关(P均<0.05)。有过敏史及治疗出院后并发哮喘患儿外周血单个核细胞及痰液中LncRNA MEG3表达水平均显著低于无过敏史及未并发哮喘患儿(P<0.05)。有过敏史、VEGF高表达、LncRNA MEG3低表达是影响病毒性毛细支气管炎患儿发生不良预后危险因素(P均<0.05)。结论:对照、轻度、中度和重度组患儿外周血单个核细胞和痰液中LncRNA MEG3表达水平依次显著降低,可能与病毒性毛细支气管炎发生发展及患儿预后有关。

血清LncRNA MEG3、miR-141表达对类风湿性关节炎诊断价值分析

目的分析类风湿性关节炎患者血清长链非编码RNA母系表达基因3(LncRNA MEG3)、微小RNA-141(miR-141)表达水平及其诊断价值。方法选取2014年2月—2018年1月鞍钢集团公司总医院风湿免疫科诊治类风湿性关节炎患者191例(病例组),据病情变化分为活动期98例(活动亚组),缓解期93例(缓解亚组)。另选取同期在医院健康体检者90例为健康对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清LncRNA MEG3、miR-141表达水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)表达水平。应用Pearson法进行相关性分析,Logistic回归模型进行类风湿性关节炎发生影响因素分析,ROC曲线进行诊断效能分析。结果健康对照组、缓解亚组、活动亚组血清LncRNA MEG3表达水平依次降低,miR-141、IL-6、TNF-α、MMP-3表达水平均依次升高(F/P=145.024/0.000、169.083/0.000、560.497/0.000、150.166/0.000、83.936/0.000)。类风湿性关节炎患者血清LncRNA MEG3与miR-141、IL-6、TNF-α、MMP-3表达水平均呈负相关(r/P=-0.432/0.000、-0.392/0.003、-0.404/0.001、-0.405/0.001),血清miR-141与IL-6、TNF-α、MMP-3表达水平均呈正相关(r/P=0.394/0.000、0.387/0.003、0.392/0.003)。血清LncRNA MEG3、miR-141联合检测诊断类风湿性关节炎的曲线下面积为0.867,敏感度为89.60%,特异度为79.90%。高miR-141、高IL-6、高TNF-α、高MMP-3水平是影响类风湿性关节炎发生的危险因素,而高LncRNA MEG3水平则是其保护因素(P<0.05)。结论类风湿性关节炎患者血清LncRNA MEG3低表达、miR-141高表达,二者间可能存在一定相互作用,通过调控炎性反应,参与类风湿性关节炎发生发展进程。

骨性关节炎中lncRNA MEG3的表达及其与VEGF的相关性分析

目的检测长链非编码RNA母系表达基因3(lncRNA MEG3)和血管内皮生长因子(VEGF)在骨性关节炎(OA)软骨组织中的表达情况,并分析lncRNA MEG3表达与VEGF表达之间的相关性。方法 2014年1月~2015年12月,收集新疆维吾尔自治区中医医院40例原发性OA患者和20例志愿者的正常膝关节软骨组织;番红O对软骨组织进行染色后,改良Mankin评分标准对OA患者进行分组;实时定量荧光PCR试验检测各膝关节软骨组织中lncRNA MEG3和VEGF m RNA表达水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)试验检测VEGF蛋白水平。Pearson相关系数法分析lncRNA MEG3表达与VEGF表达之间的相关性。结果 Real-time PCR结果显示,与正常软骨组织相比,lncRNA MEG3在OA患者软骨组织中相对表达量显著降低(P<0.05),且软骨退化程度越高,lncRNA MEG3相对表达量越低(P<0.05)。VEGF m RNA和VEGF蛋白相对表达量在OA患者软骨组织中均显著高于正常软骨组织(P<0.05),且软骨退化程度越高,VEGF m RNA和VEGF蛋白相对表达量越高(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,lncRNA MEG3表达与VEGF表达之间呈负相关(r=-0.466,P<0.05)。结论 lncRNA MEG3在OA软骨组织中低表达,且与VEGF表达之间呈负相关,提示lncRNA MEG可能通过调节血管生成参与原发性OA的发生过程。

湿性年龄相关性黄斑变性出血患者血清lncRNA MEG3和miR-138表达水平与预后的关系

目的:探讨湿性年龄相关性黄斑变性(ARMD)出血患者血清长链非编码RNA母系表达基因3(lncRNA MEG3)和微小RNA-138(miR-138)表达水平及其与患者预后的关系。方法:前瞻性研究。选取2018-01/2021-06收治的湿性ARMD出血患者90例为观察组,选择同期在我院进行健康体检人员78名作为对照组。采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测所有受试者血清lncRNA MEG3、miR-138表达水平。观察组患者注射雷珠单抗进行治疗,每月1次,共3次。治疗后随访3mo,根据预后情况分为预后良好组和预后不良组,比较两组患者lncRNA MEG3、miR-138水平。Pearson相关性分析lncRNA MEG3与miR-138的相关关系。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析湿性ARMD出血患者预后不良的判断价值。多因素Logistic回归分析湿性ARMD出血患者预后不良的影响因素。结果:与对照组相比,观察组患者血清lncRNA MEG3水平下降(1.13±0.37 vs 0.71±0.21),miR-138水平上升(1.05±0.29 vs 2.23±0.54)(均P<0.05)。湿性ARMD出血患者预后良好组患者血清lncRNA MEG3水平明显高于预后不良组(0.81±0.24 vs 0.49±0.14),而miR-138水平明显低于预后不良组(1.92±0.49 vs 2.87±0.63)(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,lncRNA MEG3与miR-138呈负相关(r=-0.381,P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清lncRNA MEG3、miR-138表达水平对湿性ARMD出血患者发生预后不良AUC分别为0.859、0.828,截断值分别为0.635、2.455,敏感度分别为89.70%、75.90%,特异性分别为72.10%、82.00%。多因素Logistic回归分析显示lncRNA MEG3是湿性ARMD出血患者预后不良的保护因素,miR-138是危险因素(均P<0.05)。结论:血清lncRNA MEG3、miR-138在湿性ARMD出血患者中表达异常,且对湿性ARMD出血患者的预后不良具有一定的评估价值。

血清DNMT1和lncRNA MEG3表达水平与帕金森病的关联性研究

目的探讨血清DNA甲基转移酶1(DNMT1)、长链非编码RNA人类母系表达基因3(lncRNA MEG3)表达水平与帕金森病(PD)的关联性。方法招募2020年3月至2023年1月青海红十字医院神经内科收治的PD患者106例作为PD组,另选择同期健康体检者103名作为对照组。比较两组的临床资料,分析PD患者血清DNMT1、lncRNA MEG3表达水平与临床指标的相关性。采用多因素logistic回归分析影响PD发生的因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清DNMT1、lncRNA MEG3水平对PD的诊断价值。结果PD组血清DNMT1水平高于对照组,总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及lncRNA MEG3水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,PD患者血清DNMT1水平与TC、TG、LDL-C水平呈负相关(P<0.05),与统一帕金森病评定量表(UPDRS)Ⅰ评分、UPDRSⅡ评分、UPDRSⅢ评分、Hoehn-Yahr(H-Y)分期呈正相关(P<0.05)。lncRNA MEG3水平与TC、TG、LDL-C水平呈正相关(P<0.05),与UPDRSⅠ评分、UPDRSⅡ评分、UPDRSⅢ评分、H-Y分期呈负相关(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,较高的血清DNMT1水平是促进PD发生的独立危险因素(P<0.05),较高的lncRNA MEG3水平是抑制PD发生的独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清DNMT1、lncRNA MEG3水平具有诊断PD的应用价值(P<0.05),且联合两指标可进一步提高诊断效能[AUC(95%CI)=0.906(0.865~0.947)],灵敏度和特异度分别为80.21%和89.34%。结论PD患者血清DNMT1呈高表达,lncRNA MEG3呈低表达,二者联合检测有助于临床诊断PD。

系统性硬化病患者血清lncRNA MEG3表达及其与Th17/Treg平衡的关系研究

目的探讨系统性硬化病(SSc)患者血清长链非编码RNA(lncRNA)人母系表达基因3(MEG3)表达水平及其与外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的关系。方法选取2018年1月至2021年3月该院收治的54例SSc患者设为SSc组,并纳入同期54例体检健康者进行对照研究(对照组)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测lncRNA MEG3、维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)mRNA、微小RNA-21(miR-21)、叉头/翼状螺旋转录因子3(Foxp3)mRNA表达水平,流式细胞仪测定Treg、Th17细胞百分比并计算Th17/Treg,Pearson法分析SSc患者血清lncRNA MEG3、miR-21表达水平与外周血Th17、Treg、Th17/Treg相关性,Logistic回归分析SSc发生的影响因素。结果SSc组患者血清lncRNA MEG3(0.47±0.16)、Foxp3 mRNA(0.52±0.17)表达水平和Treg细胞百分比[(1.73±0.58)%]低于对照组[1.04±0.35、1.06±0.35、(2.44±0.81)%],差异均有统计学意义(P<0.05);miR-21(1.86±0.62)、RORγt mRNA(1.77±0.60)表达水平和Th17细胞百分比[(1.97±0.66)%]、Th17/Treg(1.14±0.42)高于对照组[1.01±0.33、1.03±0.34、(1.13±0.38)%、0.46±0.19],差异均有统计学意义(P<0.05)。SSc患者血清lncRNA MEG3表达与Th17、RORγt mRNA、Th17/Treg、miR-21及血清miR-21表达与Treg、Foxp3 mRNA均呈负相关(P<0.05),血清lncRNA MEG3表达与Treg、Foxp3 mRNA及血清miR-21表达与Th17、RORγt mRNA、Th17/Treg均呈正相关(P<0.05)。SSc患者血清lncRNA MEG3表达水平与miR-21呈负相关(P<0.05)。lncRNA MEG3是影响SSc发生的保护因素(P<0.05),miR-21、Th17/Treg是影响SSc发生的危险因素(P<0.05)。结论SSc患者血清lncRNA MEG3表达水平较低,且与miR-21、Th17/Treg平衡显著相关,lncRNA MEG3可能是诊断SSc的潜在靶标之一。

缺血性脑卒中患者血清LncRNAMEG8表达水平及临床价值研究

目的探讨缺血性脑卒中患者血清中长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA,LncRNA)母系表达基因8(maternal expressed gene 8,MEG8)的表达及其临床价值。方法选取2021年1月~2022年4月在海南省老年病医院接受治疗的80例缺血性脑卒中患者为观察组,及同期85例健康体检志愿者为对照组。参照美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将患者分为轻度患者组(n=25,NIHSS<5分)、中度患者组(n=29,5≤NIHSS≤20分)和重度患者组(n=26,NIHSS>20分)。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法对受试者血清中LncRNA MEG8的水平进行测定并对不同程度组患者血清LncRNA MEG8水平进行比较。患者血清中LncRNA MEG8与C-反应蛋白(CRP)水平的相关性进行Pearson分析;Spearman法对患者LncRNA MEG8与NIHSS评分的关系进行分析;Logistic分析影响缺血性脑卒中发生的因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析LncRNA MEG8水平诊断缺血性脑卒中的价值。结果与对照组相比,观察组血清中LncRNA MEG8显著升高(1.55±0.31 vs 1.01±0.15),差异有统计学意义(t=14.373,P=0.000);与轻度患者组(1.26±0.18)相比,中度与重度患者组LncRNAMEG8表达水平随着病情的加重依次显著升高(1.54±0.27,1.84±0.48),差异有统计学意义(F=19.262,P=0.000);缺血性脑卒中患者血清中LncRNA MEG8与CRP水平、NIHSS评分呈正相关(r=0.412,0.488;P=0.0005,0.0003);高血压(OR=3.314,95%CI 1.045~10.513)、高脂血症(OR=4.340,95%CI 1.008~18.692)、糖尿病(OR=7.891,95%CI 1.024~60.828),高LncRNAMEG8(OR=7.021,95%CI 4.316~37.440)和高CRP(OR=2.415,95%CI 1.207~4.833)是发生缺血性脑卒中的危险因素(P=0.042,0.048,0.047,0.022,0.013);LncRNAMEG8水平诊断缺血性脑卒中的ROC曲线下面积为0.923(95%CI:0.880~0.966),截断值为1.14,敏感度和特异度分别为81.3%,94.1%。结论缺血性脑卒中患者LncRNA MEG8表达升高,与患者病情严重程度相关,可较好地诊断缺血性脑卒中。