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小鼠Egr-1基因调控序列的克隆及其辐射诱导特性的鉴定 被引量:15
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作者 吕星 邢瑞云 +2 位作者 孙志贤 裴雪涛 吴祖泽 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1998年第1期16-19,共4页
Egr-1(early growth response-1)系-具有辐射诱导特性的转录因子.其调控序列被证实可通过与肿瘤杀伤基因相连接的方法而赋予后者以辐射诱导特性,因而被用于肿瘤的基因-放射治疗研究.为此,我们用PCR方法从BALB/c小鼠基因组DNA扩增出445bp... Egr-1(early growth response-1)系-具有辐射诱导特性的转录因子.其调控序列被证实可通过与肿瘤杀伤基因相连接的方法而赋予后者以辐射诱导特性,因而被用于肿瘤的基因-放射治疗研究.为此,我们用PCR方法从BALB/c小鼠基因组DNA扩增出445bp长Egr-1基因调控序列,序列分析证实,除-392位一个碱基(A→G)相差外,其余均与文献报道一致,包括6个对辐射诱导特性起关键作用的CC(A+T)_6GG结构域-将克隆的Egr-1基因调控序列连入pCL3荧光素酶报告质粒,转染小鼠恶性黑色素瘤细胞(B16),转染细胞用^(60)Coγ-线进行2.5、5.0和10.0Gy不同剂量照射后,检测细胞裂解液中荧光素酶活性.与未照射细胞比较.照射后细胞荧光素酶活性明显提高,以2.5Gy剂量最为显著.提高约138%,表明Egr-1基因调控序列具有辐射后诱导下游基因表达的功能. 展开更多
关键词 EGR-1基因 基因调控序列 放射疗法 治疗 肿瘤
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组织激肽释放酶基因调控序列多态性与高血压关系的初步分析 被引量:1
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作者 韦芳 陈晨 +2 位作者 肖静 郭惠玲 王正荣 《中国药物与临床》 CAS 2003年第2期93-95,共3页
目的 初步探讨组织激肽释放酶基因调控序列启动子多态性与中国人原发性高血压 (EH)的相关性。方法 应用PCR技术结合等位基因特异寡核苷酸片段分析 (ASO)方法 ,对 40例EH患者和正常人的组织激肽释放酶基因用A、B两种探针检测 ,比较两... 目的 初步探讨组织激肽释放酶基因调控序列启动子多态性与中国人原发性高血压 (EH)的相关性。方法 应用PCR技术结合等位基因特异寡核苷酸片段分析 (ASO)方法 ,对 40例EH患者和正常人的组织激肽释放酶基因用A、B两种探针检测 ,比较两组间的等位基因分布频率差异 ,初步分析该SNP位点与高血压的关系。结果 组织激肽释放酶基因A、B型在对照组中频率为 65 %、10 % ,在高血压组中频率为 60 %、10 % ,两组比较有差异 ,但无统计学意义。结论 在中国汉族人群中 ,该基因位点确实有多态性 ;A、B两型均有分布 。 展开更多
关键词 组织激肽释放酶 基因调控序列 多态性 高血压 聚合酶链反应 单核苷酸多态性
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绵羊β-乳球蛋白基因5′端及上游调控序列的PCR扩增的方法学研究
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作者 李雪玲 郭继彤 +2 位作者 于海泉 王达珍 张肇英 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期79-82,共4页
本文对绵羊 β-乳球蛋白基因 5′端及上游调控序列的 PCR方法扩增进行了研究 .经比较分析 ,将从羊血中提取的绵羊基因组 DNA的模板用量定为 4μl( 0 .4μg/μl) ,Taq DNA聚合酶用量为 0 .83μl( 3u/μl) ,变性为 94℃ 1 min,退火为 64℃... 本文对绵羊 β-乳球蛋白基因 5′端及上游调控序列的 PCR方法扩增进行了研究 .经比较分析 ,将从羊血中提取的绵羊基因组 DNA的模板用量定为 4μl( 0 .4μg/μl) ,Taq DNA聚合酶用量为 0 .83μl( 3u/μl) ,变性为 94℃ 1 min,退火为 64℃ 1 m in,72℃延伸 2 min,循环次数为32次 ,获得的 PCR产物经电泳检测 ,条带明亮 ,特异性高 ,大小为 898bp.经序列分析发现 ,与已知基因组序列一致性达 99%以上 ,可用于指导外源基因在转基因动物乳腺中表达 . 展开更多
关键词 绵羊β-乳球蛋白基因(BLG)5′端及上游调控序列 PCR
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人肿瘤坏死因子基因上游转录调控序列研究
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作者 周宇虹 徐晓雷 +2 位作者 刘峥 李昌本 赵寿元 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1992年第1期74-77,共4页
人肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)能引起肿瘤细胞出血性坏死,目前已用于治疗癌症的临床试验。我们已用基因工程技术构建了半合成的重组人TNF(rh TNF)cDNA,并转入大肠杆菌中表达。为进一步研究TNF基因的调控序列。
关键词 TNF 基因调控序列 癌症
原文传递
Analysis of the 5' flanking sequence of the human norepinephrine transporter gene
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作者 HUANG FANG JIAN FEI +5 位作者 SHUN KAI MA LI HUAZHU ZHAO PING LIU GUO QIANG CAI ZEN CAN YE LI HE GUO (Shanghai Institute of Cell Biology, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China ) 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 1998年第2期143-149,共7页
The human norepinephrine transporter(NET) gene was cloned and structurally analyzed. The far 5’ fragment containing exon 1 (a non-coding exon) and exon 2 was sequenced. The transcription start site of the gene in hum... The human norepinephrine transporter(NET) gene was cloned and structurally analyzed. The far 5’ fragment containing exon 1 (a non-coding exon) and exon 2 was sequenced. The transcription start site of the gene in human brain stem tissue was determined by primer extension analysis. It was found that the gene could be transcribed from multiple starting points. The 5’ flanking sequence contains a proximal G-C rich region, one possible GSG elemeflt and several SP1 sites. However it does not contain TATA box and CAAT box motifS. Gel shift analysis with nuclear extracts from different tissues of mouse shows that the G-C rich region may be involved in tissue specific expression of the gene. 展开更多
关键词 Norepinephrine transporter gene primer extension transcription regulation
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基础学科
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《中国农业文摘(兽医)》 2000年第6期4-17,共14页
S852.2 20002623鸡卵清蛋白基因上游调控序列的克隆及序列分析/宇丽(解放军农牧大学军事兽医研究所 130062),赵君,岳军明…∥中国兽医学报.-1999,19(6).-539~541应用 PCR 技术从鸡肝脏基因组中克隆了1.1kb的鸡卵清蛋白基因上游调控序列... S852.2 20002623鸡卵清蛋白基因上游调控序列的克隆及序列分析/宇丽(解放军农牧大学军事兽医研究所 130062),赵君,岳军明…∥中国兽医学报.-1999,19(6).-539~541应用 PCR 技术从鸡肝脏基因组中克隆了1.1kb的鸡卵清蛋白基因上游调控序列,并进行了序列分析。结果发现,扩增产物只有2个碱基发生了突变, 展开更多
关键词 青海畜牧兽医杂志 序列分析 畜牧兽医学报 动物医学 致病性大肠杆菌 血清型 传染性法氏囊病病毒 分离株 免疫原性 基因上游调控序列
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系统性硬化病患者外周血CD4+T细胞CD40LDNA甲基化研究 被引量:1
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作者 肖嵘 廉晓日 +8 位作者 胡新红 金藏拓郎 姜红岩 杨艳 王瑶瑶 李亚萍 张桂英 赵明 陆前进 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期517-519,共3页
目的探讨系统性硬化病(SSc)患者外周血CD4+T细胞中CD40L基因调控序列的甲基化状态。方法密度梯度离心法分离SSc患者(女16例,男10例)和健康对照组(女15例,男10例)外周血单一核细胞,磁珠分选CD4+T细胞,提取DNA,亚硫酸氢钠处... 目的探讨系统性硬化病(SSc)患者外周血CD4+T细胞中CD40L基因调控序列的甲基化状态。方法密度梯度离心法分离SSc患者(女16例,男10例)和健康对照组(女15例,男10例)外周血单一核细胞,磁珠分选CD4+T细胞,提取DNA,亚硫酸氢钠处理DNA,巢式PCR扩增CD40L基因调控序列片段(包括启动子和增强子),转化进入大肠杆菌,每个样本挑取8个克隆进行测序。结果亚硫酸盐基因组测序结果显示,健康女性CD40L基因调控序列一半为甲基化,一半为去甲基化,女性SSc患者CD40L基因启动子和增强子区域平均甲基化水平均显著低于女性健康对照(P值均〈0.01);男性SSc患者和男性健康对照CD40L基因启动子和增强子区域几乎全部为去甲基化,两组平均甲基化水平差异无统计学意义(P值均〉0.05)。结论女性SSc患者CD4+T细胞中失活的X染色体上CD40L调控序列低甲基化,可能是导致CD40L在女性SSc患者CD4+T细胞中过度表达的原因之一。 展开更多
关键词 外周血单一核细胞 CD4+T细胞 DNA甲基化 CD40L 系统性硬化病 患者 基因调控序列 基因启动子
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