基因绝缘子——一类新发现的基因调节元件

最近几年 ,一类称为“绝缘子”的新的基因元件被众多的实验室发现和证实 ,大大丰富了我们对基因在染色质环境中如何形成拓扑学上独立的调节单元的认识。这个刚刚被找到的又一个基因“黑匣子” ,尽管我们对其仍是一知半解 ,但让人们意外和兴奋的是

鹅固醇调节元件结合蛋白1基因的克隆及生物信息学分析

从16周龄朗德鹅肝脏组织提取总RNA,采用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)方法扩增出1条长约280bp的cDNA片段。序列分析结果表明,扩增出的cDNA片段与固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)基因有较高的同源性,并且该片段包含着1个bHLH功能区。同时该片段包含1个明显的亲水区和1个明显的疏水区,二级结构富含α-螺旋,这与其功能相符。

bax嵌合基因克隆及其在人舌癌细胞的表达

目的 :构建能在人舌癌细胞中高效表达Bax蛋白的bax嵌合基因。方法 :将RT PCR获得bax基因编码序列克隆至原核表达载体pGEX 5T ,再将baxcDNA插入人α1(Ⅰ )胶原基因顺式作用元件 (CIP)与报告基因CAT之间 ,构成 pSV CIP bax CAT嵌合基因 ;用阳离子脂质体DOSPER将此嵌合基因转染至人舌鳞癌细胞Tca8113;用免疫狭缝印迹和ELISA方法分析报告基因CAT和目的基因bax在细胞中的表达。结果 :bax基因编码序列及嵌合基因限制性酶谱正确 ;CAT表达的ELISA检测证实 ,转染是成功的 ,且CIP在Tca8113细胞中有促进其下游基因表达的作用 (为对照组的 15倍 ) ;免疫狭缝印迹和ELISA证实 ,转染细胞能高效表达Bax蛋白 (为对照组的 8倍 )。结论 :bax嵌合基因 pSV CIP bax CAT能在人舌癌细胞中高效表达Bax蛋白 ,为进一步研究bax基因对舌癌细胞生长与凋亡的影响奠定了基础。

CREM基因与特发性生精障碍关系的研究

目的探讨环磷酸腺苷反应元件调节物(CREM)基因与男性不育症中特发性生精障碍的关系。方法收集特发性无精子症和严重少精子症各20例患者的外周血,收集具有正常生育能力志愿者20例外周血作为对照。进行外周血提取DNA、聚合酶链反应(PCR)扩增、单链构象多态性(SSCP),检测特发性生精障碍患者外周血中CREM基因。结果在65%的无精子症和55%严重少精子症患者中检测出CREM基因的变异。结论在人类,CREM基因在精子的发生发育过程中起着至关重要的作用,CREM基因参与人类精子的发生。

猪SREBP-1c基因表达谱及其对肌内脂肪细胞脂质沉积的影响

为探究固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)基因对猪脂质沉积的作用机制,采集淮南猪不同育肥时期背最长肌和皮下脂肪组织,利用实时荧光定量(RT-qPCR)技术分析其表达变化趋势;在猪原代肌内脂肪细胞中进行SREBP-1c干扰试验,采用RT-qPCR检测SREBP-1c互作基因及脂质沉积相关基因的表达量,并通过油红O染色检测脂质沉积变化。结果显示,随着育肥进展,SREBP-1c在猪背最长肌和皮下脂肪组织的表达量持续极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)上调,提示SREBP-1c可能对猪背最长肌脂质沉积的调控作用更强。在猪原代肌内脂肪细胞中干扰SREBP-1c,其互作基因PPARγ、C/EBPα及脂质沉积相关基因FAS、FABP4、CIDEC的表达量均极显著(P<0.01)下调。油红O染色结果显示,SREBP-1c表达量降低,肌内脂肪细胞脂质沉积明显减少。以上结果表明,SREBP-1c可通过调控脂质生成相关基因表达,影响肌内脂肪细胞的脂质沉积。