六例肉碱棕榈酰基转移酶2缺乏症患儿临床特征及基因变异分析

目的:探讨肉碱棕榈酰基转移酶2(CPT2)缺乏症患儿的临床表型及基因变异特点。方法:回顾性分析6例CPT2缺乏症患儿的临床和基因检测资料,采用串联质谱法检测血酰基肉碱水平,全外显子基因测序法检测基因变异。结果:6例CPT2缺乏症患儿中男性4例、女性2例,平均确诊年龄为32个月(15 d~9岁)。其中1例无临床症状及实验室检查异常、2例迟发型、3例婴儿型。3例由新生儿筛查确诊;3例因临床表现就诊,起病时有发热、肌肉乏力伴肌酶增高。5例患儿表现为游离肉碱降低,棕榈酰基肉碱、十八碳烯酰肉碱升高。6例患儿检测到CPT2基因变异8个位点(携带双位点突变4例,携带单位点突变2例),3种为已知变异(p.R631C、p.T589M和p.D255G),5种为新报道变异(p.F352L、p.R498L、p.F434S、p.A515P、c.153-2A>G)。经PolyPhen2和SIFT软件预测,5个新报道变异中c.153-2A>G和p.F352L为疑似致病变异,p.R498L、p.F434S和p.A515P为临床意义未明变异。结论:CPT2缺乏症临床表型多样,通过新生儿血串联质谱筛查及基因检测有助于早期诊断,确诊后及时治疗大多预后良好。

鱼类基因转移技术研究进展

基因转移为鱼类遗传育种开辟了一条新的途径。自 1985年第 1例转基因鱼问世至今已获得十几种转基因鱼 ,在促进生长 ,提高鱼类抗逆性、抗病性等方面取得了巨大成绩。本文主要结合国内外关于鱼类基因转移成功的报道 ,分析了各种转基因技术的可行性和优缺点 ,并对其作用机理、适用对象、条件优化、转化效率等几个方面做了概括性叙述。

基因转移技术在骨组织工程研究中的应用

利用组织工程技术可以再生骨组织,但由于成骨细胞在体外培养过程中成骨表型的逐步丧失及植入体部位局部缺乏生长因子的作用,使得成骨效率,修复效果尤其是修复长段骨缺损的能力仍不令人满意。利用基因转移技术将编码与骨组织再生有关的生长因子的基因片段移至靶细胞中,使之既发挥种子细胞的作用,又可在体内骨组织再生过程中持续高效地分泌生长因子,从而为上述问题的解决提供一个新的思路和技术手段。

基因芯片技术在食管鳞癌转移相关基因表达谱筛选中的应用

目的研究人食管鳞癌转移相关基因表达谱,探讨食管鳞癌的转移机制。方法选取392个与肿瘤转移相关的基因克隆,制备成肿瘤转移基因芯片。提取食管鳞癌组织以及正常食管组织RNA,反转录后标记为cDNA探针,与cDNA芯片杂交,经扫描及Quantarray3.0软件分析后比较两种组织中的差异表达基因。结果共筛查出差异表达基因58条,其中表达上调基因36条、下调基因22条,包括癌基因、抑癌基因、黏附分子、基质金属蛋白酶、信号转导因子、细胞代谢和免疫相关基因等。结论基因芯片筛查食管鳞癌转移相关基因表达谱可为明确食管鳞癌转移机制提供重要参考。

外源基因直接转移技术之评价

外源基因直接转移技术有ＰＥＧ法、电击法、基因枪法、微注射法、脂质体法、生殖细胞转化法等．本文对它们进行了比较分析，指出它们各自的优缺点。

基因转移技术现状及发展

作为医学研究的重点课题,基因转移技术可以分为物理学法、化学法和生物学法三大类。本文阐明其中现有技术方法的原理,比较其特点及局限,并对其前景进行展望。

改良差示PCR技术分离人成骨肉瘤转移基因片段

建立优化的差示PCR体系，通过对转移潜能不同的人成骨肉瘤细胞系进行差示比较，获得人成骨肉瘤转移相关基因片段．方法：以低转移性人成骨肉瘤细胞系SOSP－96O7及由此筛选出的高转移亚系SOSP－M为研究对象，利用优化的差示PCR技术获得两细胞系mRNA的表达差异，选取差异明显、片段较长的条带回收并克隆后，经点杂交和Northern杂交排除假阳性，并进行测序和同源性分析．结果：获得满意的差示PCR反应参数，并以高敏感度荧光染料SYBR””GREENI替代同位素放射自显影，改良了显示系统．以此为基础，得到了两条高转移亚系所特有的差异DNA片段，命名为MGI和MGZ，测序后分析显示它们具有较长的开放读框，与Genebank和EMBL数据库已知基因比较无明显同源性．结论：优化了差示PCR反应体系；分离筛选出2个人成骨肉瘤转移基因片段，已向Genebank申请登录．本实验为骨肉瘤转移的机制研究奠定了实验基础．

比较基因组杂交技术:贲门癌和淋巴结转移灶的染色体变化特征

目的:探测河南食管贲门癌高发区居民贲门癌及其淋巴结转移灶中染色体基因组的变化特征,为进一步筛选与贲门癌变和淋巴结转移相关基因提供理论依据和范围. 方法:应用比较基因组杂交技术(comparative genomic hybridization,CGH)来分析原发性贲门癌患者30例及其相应淋巴结转移灶7例中染色体基因组的变化. 结果:在贲门癌30个样本中总共有126增加和117丢失:每例患者平均DNA拷贝数的增加和丢失分别为4.2 和3.9.染色体基因组增加频率最高的是20q(43%),其次为6q(40%),8q(37%),7p(27%),6p(33%),7q(33%), 1q(30%),13q(23%),11q(20%)和5p(20%).染色体基因组丢失频率最高的是17p(57%),其他为19q(50%), 1p(47%),3p(30%)和4p(20%).在贲门癌淋巴结转移灶7例中,总共有75增加和58个丢失,平均DNA 拷贝数的增加和丢失分别为10.7和8.3.染色体增加为8q(5/7),20(4/7)和1q,2p,3q,6,7,11P11- q13,11q14-q23,13(均为3/7),染色体的丢失为9p13-qter(4/7),4(3/7)和1pter-1q33,7p12-qter, 16p,17p,18(均为2/7). 结论:20q,6q,8q,7p,6p,7q,1q,13q,11q, 5p的染色体基因组增加和17p,19q,1P,3p,4p 的丢失与贲门癌相关,而8q,20的增加和9p13-qter, 4Pq的丢失可能与贲门癌的淋巴结转移相关.

应用抑制性消减杂交技术筛选成骨肉瘤转移相关基因

目的 :探讨与人成骨肉瘤转移相关的基因表达变化 .方法 :通过抑制性消减杂交技术从一对同一亲本、转移表型不同的人成骨肉瘤细胞株中分别提取细胞总RNA ,筛选差异表达基因并测序 ,将结果与核酸数据库进行同源性比较 .结果 :获得 1 2个在低转移成骨肉瘤中高表达的、均与已知的人类基因片段有很高同源性的核甘酸片段 .结论 :差异表达的基因可能与成骨肉瘤细胞转移生物学特性呈密切相关 ,特别是在维持肿瘤细胞自身稳定。

基因治疗中基因转移技术研究进展

自1990年9月美国首次成功地进行ADA缺乏症的基因治疗以来,基因治疗已成为当前生物医学领域中进展最快的领域之一。迄今为止,已有70余项人体基因治疗计划获美国FDA和重组DNA咨询委员会(RAC)的批准,进入临床试验。基因治疗研究的范围也由最初的遗传病迅速扩展到肿瘤、心血管疾病。

转基因和基因转移技术在动脉粥样硬化研究中的应用

转基因和基因转移技术在动脉粥样硬化研究中的应用范乐明（南京医科大学动脉粥样硬化研究中心，南京２１００２９）将基因构件（包括编码和调节序列）导入生殖／胚胎细胞或体细胞；以改变其遗传特性、表达新表型性状并传递至后代的技术被分别称为＂转基因作用＂（ｔｒａｎ...

基因转移技术及其在牙周组织再生中的应用

组织工程技术现正成为牙周组织再生研究中的一个重要方向,而基因转移技术不断发展并已应用于组织工程领域。通过基因转移可使外源性调节因子表达于修复区,并诱导牙周细胞的分化,促进牙周组织再生,具有良好的应用前景。

生物弹技术在禾谷类植物基因转移中的应用

近年来植物基因转移,遗传转化技术取得了很大的进展,但将外源基因导入禾谷类植物细胞,获得转基因单株的成功事例很少,这主要是因禾谷类植物细胞的特殊性和现有基因转移技术固有的缺陷所致。由Sanford等发明的生物弹基因转移技术可克服上述不足,成功地将外源基因导入细胞。本文综述了该技术的发明、作用、特点及在禾谷类植物基因转移中的应用,并分析了该技术的优缺点,认为生物弹基因转移技术可望成为实验室常规的基因转移技术。

动物基因转移技术的研究进展

综述了动物转基因技术当中关于转移基因的选择、导入方法以及整合和表达方面的研究进展，指出了该技术目前存在的问题，并对其前景进行了展望。

心血管外科中基因转移技术的研究

如何将目的基因导入心脏和血管是基因治疗和基因预防在心血管外科中应用的特殊问题,本文概述目前采用的几种方法。

动物基因转移技术

所谓基因转移(transgensis),是指借助基因工程技术将确定的外源基因导入动植物的染色体上,使其发生整合并遗传的过程。从广义上讲,所有向微生物、动植物细胞以及动植物个体导入外源基因,都可称为基因转移。应用转基因技术培育成功的携带外源基因并能遗传的动物个体或品系,就是转基因动物。人们可以根据自己的意愿和需要。

应用抑制消减杂交技术克隆鼻咽癌转移调控基因

目的:分离并鉴定高低转移表型不同的人鼻咽癌细胞株差异表达cDNA序列,了解鼻咽癌转移抑制基因或具有抑制活性的核苷酸序列。方法:以具有高低转移潜能不同的人鼻咽癌细胞株为研究对象,应用抑制消减杂交技术(suppression sub tractivehybrid ization,SSH)和T/A克隆法构建差异表达cDNA消减文库,对差异表达的cDNA进行测序和生物信息学分析。结果:成功构建人鼻咽癌细胞克隆株差异表达cDNA消减文库,从随机测序10个克隆中获得6个在低转移鼻咽癌细胞株中高表达cDNA序列,它们都与已知的人类基因片段具有高度同源性。结论:应用抑制消减杂交技术,从一对具有高低转移表型差异的鼻咽癌细胞株中获得6条可能与肿瘤转移抑制相关的cDNA序列,它们可能在维持肿瘤细胞的稳定和抑制肿瘤转移中起重要作用。

动物基因转移技术的研究进展及应用前景

本文系统探讨了动物基因转移技术中的三个关键环节:转移基因的选择、导入方法以及整合和表达;指出了该技术目前存在的问题,并预测了其应用前景。