用基因重组法育成抗条纹叶枯病水稻

日本农水省农研中心育种工程研究室大??义昭室长和农业生物资源研究所的研究人员,应用基因重组方法,成功地育成了抗条纹叶枯病的水稻.将目标基因导入水稻在世界上尚属首创,从而使基因重组技术的应用得到了很大的发展.

检测饮用水中雌激素物质的方法——结合S9代谢活化的重组基因酵母法

采用将大鼠肝脏微粒体酶系统（S9）代谢活化体系和重组基因酵母测试体系相结合的方法检测饮用水中的间接雌激素物质。通过对双酚A代谢活化前后的活性对比,优化了S9代谢活化方法,并将该方法应用于南方某水厂饮用水处理工艺样品的雌激素效应检测。研究表明水样中存在间接雌激素效应物质,经S9代谢活化后可检出其活性。原水中的间接雌激素物质在混凝、砂滤两工艺段得到有效去除。检测标准样品和实际样品的应用研究表明,重组基因酵母检测方法结合S9代谢活化步骤简单、方便,更全面地反映了样品潜在的雌激素水平,有望在水质安全评价上得到广泛的应用。

重组基因酵母法研究酞酸酯类化合物的类雌激素作用

为了检测五种酞酸酯类化合物的类雌激素活性,采用重组人雌激受体α、相关效应元件以及β-半乳糖苷酶报告基因酵母分别测定17β-雌二醇（E）2、邻苯二甲酸二甲酯（DMP）、邻苯二甲酸二乙酯（DEP）、邻苯二甲酸二丁酯（DBP）、邻苯二甲酸二辛酯（DOP）、邻苯二甲酸丁苄酯（BBP）单独作用时诱导酶活并计算其EC50。通过各化合物与E2的EC50的比以及最大β-半乳糖苷酶活性来比较酞酸酯类化合物的类雌激素活性。五种酞酸酯类化合物的实验浓度范围为1.0×10^-3-1.0×10^-11 mol/L。结果表明,DEP（1×10^-7-1×10^-9 mol/L）、DBP（1×10^-6－1×10^-9 mol/L）、BBP（1×10^-3－1×10^-6 mol/L）具有明显的类雌激素活性,诱导的最大酶活分别为：1.515、0.832 2、1.669,而DMP和DOP并未检出明显的类雌激素活性。DEP、DBP、BBP与E2的EC50的比分别为8.85×10-2、2.54×10^-2、8.82×10^-6。说明DEP、DBP在低浓度就表现出类雌激素活性,而BBP在较高浓度才表现出类雌激素活性。

基因重组抗原酶联免疫法检测兔出血症病毒抗体及其标准化

以重组兔出血症病毒 (RHDV) VP6 0蛋白为抗原 ,建立了 RHDV抗体间接 EL ISA检测方法。优化的试验反应条件为 :重组 VP6 0的包被质量浓度为 1.0 mg/ L ,用 10 %牛血清封闭 ,以大肠杆菌提取物稀释被检血清以消除非特异性反应。将所建立的 EL ISA与现行血凝抑制 (HI)试验比较发现 ,不同免疫状态的兔血清的 RHDV EL ISA抗体与 HI抗体均呈正相关。对 11个 RHD免疫兔场 1130份血清样品的抗体检测表明 ,各免疫兔群血清 RHDV抗体水平不完全一致 ,D值在 1.0 9～ 1.76之间 ,显著高于非免疫兔 (0 .0 5 )及 SPF兔 (0 .0 2 ) ,低于高免兔 (2 .34)。在此基础上 ,研制了RHDV抗体酶联免疫检测试剂盒 ,测定了其主要指标 ,制定了各成分的质量控制标准 。

海藻糖的制备方法

综合介绍了海藻糖的几种主要制备方法 ,并分析了各种方法的优缺点 .

Hoechst公司结束了重组胰岛素的临床试验但绿党阻挠建厂

西德Hoechst公司结束了利用基因重组生产的胰岛素的临床试验。在西德国内结束重组医药的试验还是第一次。该公司计划在年内申请制造承认。 Hoechst公司现在销售通过酶法将从猪抽提的胰岛素变换成人型的半合成人胰岛素。预计将来全面转换成基因重组法。

药物体外肝代谢研究方法

体外代谢研究对阐明药效物质基础及作用机制有重要意义。常见的体外肝代谢研究方法有肝微粒体体外温孵法、肝细胞体外温孵法、肝灌流技术、肝组织切片技术、基因重组P450酶系等。药物体外肝代谢不能全面反映体内药物的综合代谢情况,与体内的真实代谢情况存在差异,今后需结合体内实验等方法来完善药物在体内外的药物代谢转运的研究。目前肝灌流技术和基因重组P450酶系等体外肝代谢研究方法对设备、实验操作成本、数据处理技术等要求较高,其运用和推广仍然受到一定的约束和限制,今后需建立简单、快速、经济、高效的科学技术方法和手段。由于药物体外肝代谢对新药研究与开发、正确指导临床合并用药有着巨大的推动作用,因此该文将对其进行重点论述。

镉、汞、锌3种重金属的雌激素样作用

为探讨镉、汞、锌3种重金属的雌激素样作用,采用双杂交酵母法测定了醋酸镉、氯化汞、醋酸锌单独作用时对重组基因酵母β-半乳糖苷酶诱导活性的EC50值.实验结果表明,醋酸镉浓度为1.0×10-5mol·L-（1实验浓度范围10-7~10-2mol·L-1）,氯化汞浓度为5.0×10-7mol·L-（1实验浓度范围10-9~10-5mol·L-1）,醋酸锌浓度为1.0×10-4mol·L-（1实验浓度范围10-9~10-2mol·L-1）时对酵母β-半乳糖苷酶诱导活性最大,分别达到1.3、0.95和1.1U.不能求出镉、汞、锌单独作用时对β-半乳糖苷酶诱导活性的EC50值.一味计算EC50值不仅难以评价重金属的雌激素活性,而且限制重组受体基因酵母法的普遍运用.一些重金属通过MCF-7细胞法（E-screen）呈阳性,通过重组hERα酵母法YES检测呈阴性,有可能是重金属通过与ERβ作用而产生效应.若构建出含ERβ基因的双杂交酵母菌株,与现有的方法互补将能完善环境雌激素的体外测评系统.

污水处理工艺中雌激素活性的分布与去除研究

文章探讨了某城市污水处理厂不同处理工艺流程中污水雌激素活性的分布情况及去除效果。利用固相萃取/重组基因酵母法测定污水样品雌激素活性的分布,计算污水处理厂雌激素活性的去除效率。结果表明污水水样中均存在一定的雌激素活性,总进水口、初沉池、二沉池和出水口水样的雌二醇当量浓度分别为(11.03±0.16)、(9.62±0.61)、(1.11±0.08)、(1.04±0.30)ng/L。该厂Ⅰ、Ⅳ、Ⅵ系列对雌激素活性的去除率分别为76.87%、92.43%、87.59%,总去除率达到88.78%。Ⅳ、Ⅵ系列的去除效率基本相同,且都高于Ⅰ系列。二级生物处理对雌激素活性的去除起主导作用。该污水处理厂对雌激素活性的去除效率较高,但处理后污水的大量排放对受纳水体具有一定的潜在环境风险。

开发抗病虫害的玉米

利用基因工程的方法,现在实现了在农业方面培育高产、抗病虫害和除草剂的玉米.美国Monsanto Agricultural公司和Dekalb Genetics公司在科罗拉多州Keystone召开的讨论会上报告了可育性的基因重组玉米. 在Winston J.Brill&Associates公司从事农业生物技术的W.Brill说:“这项研究是为提高玉米、小麦、燕麦、大麦、稻等谷物产量,生物技术的重要的实际应用.这次成功所用的基因操作的材料受到注目.如果使用有效的基因重组法就能很容易跟踪基因导入后的行踪.”

用20升培养物生产5克降钙素

三得利公司确立了一种基因重组法,可大量生产酰胺化的人降钙素(hCT),结果在4月东京召开的日本农艺化学会上发表.使用基因重组生产的α酰胺化酶作用于用基因重组大量生产的目的蛋白,获得活性蛋白.用20升培养物能制造4～5克酰胺化活性型hCT.用这项技术还能大量生产由于酰胺化而产生活性的其它蛋白.三得利公司最近打算向厚生省申请批准生产hCT. hCT的生产程序如下:首先用基因重组大肠杆菌生产与融合有β半乳糖苷酶片段的蛋白,然后用蛋白酶V8切出hCTGKKR(hCT-Gly-Lys-Lys-Arg)。

药物体外肝代谢研究进展

目的介绍药物体外肝代谢方法的最新研究进展。方法根据近几年的文献资料进行分析、综合、归纳。分别按照肝微粒体体外温孵法及基因重组P450酶系法、肝细胞体外温孵法、离体肝灌流法及器官组织切片法进行介绍。结果药物体外代谢酶系的研究是药物体外肝代谢的研究热点。结论药物体外肝代谢的研究对新药研究与开发、正确指导临床合理用药具有巨大的推动作用。

苏大育成天然彩茧蚕种

苏州大学农业科技学院的科研人员通过基因重组法选育高产彩色茧蚕品种获成功。