基因-病毒载体的研制及其抗肿瘤作用的初步研究

目的 研究一种结合肿瘤基因治疗与病毒治疗优势的新型肿瘤治疗载体系统 ,即基因 病毒载体系统。方法 利用病毒重组技术将抗癌基因插入肿瘤细胞特异性的增殖病毒的病毒基因组中 ,通过细胞病理作用、荧光显微镜、免疫酶链技术及电镜等技术分别观察病毒的杀伤效应、报告基因绿色荧光蛋白、抗癌基因小鼠白细胞介素 12表达量及病毒复制情况。结果 构建了一种新型基因 病毒载体系统 ,该载体系统腺病毒E1b 5 5 0 0 0蛋白缺失 ,保留了腺病毒E1a蛋白。该载体系统具有肿瘤增殖病毒ONYX 0 15的相似功能 ,即它可在肿瘤细胞内复制及增殖 ,而在正常细胞内不能复制及增殖 ,从而特异性杀灭肿瘤细胞。该载体系统还可携带各种抗癌基因以进一步提高抗肿瘤的疗效。应用该载体系统携带该报告基因绿色荧光蛋白可使绿色荧光蛋白在肿瘤细胞内高效表达 ,其表达量明显高于传统基因治疗的腺病毒载体系 ,而在正常细胞内低表达 ,表达量与传统腺病毒载体系统相似或更低。应用该载体系统携带抗癌基因小鼠白细胞介素 12 ,也产生类似结果。电镜也证实该载体系统携带抗癌基因小鼠白细胞介素 12可在肿瘤细胞株中复制及增殖。结论 基因 病毒载体将抗癌基因插入肿瘤增殖病毒基因组 ,可数百倍乃至上万倍提高抗癌基因的表达量 。

重组腺病毒载体介导共刺激分子B7.1基因对儿童肝母细胞瘤体外淋巴细胞增值的影响

目的研究含hB7-1基因的重组腺病毒载体对儿童肝母细胞瘤体外淋巴细胞增值的影响。方法以腺病毒为载体,将hB7-1基因转入HepG2细胞,以FCM检测HepG2和HepG2/hB7-1细胞表面B7-1分子的表达情况。观察HepG2和HepG2/hB7-1细胞的生长曲线。用混合淋巴细胞培养法检测瘤苗对T淋巴细胞增殖的影响。结果HepG2细胞表面B7-1分子表达水平低,其阳性率为1.1%。而HepG2/hB7-1的B7-1分子表达阳性率达到18.5%,B7-1基因的表达水平提高16.8倍。HepG2和HepG2/BB-102的生长曲线相比,后者生长曲线上升减缓,生长速度减慢。B7-1分子的表达促进了淋巴细胞的增殖,较对照组有显著性差异(P<0.05)。结论1.HepG2表面B7-1分子低水平表达是其弱免疫原性的主要原因。2.含hB7-1基因的重组腺病毒载体转染HepG2可以获得B7-1分子高表达的细胞株。3.重组腺病毒载体的转染可以降低肝母细胞瘤细胞的恶性表征。4.转染含hB7-1基因的瘤苗可以促进T淋巴细胞的增殖。

肿瘤靶向且高效表达抗癌基因的基因 病毒载体系统(英文)

目的 研究一种结合肿瘤基因治疗与病毒治疗优势的新型肿瘤治疗载体系统 ,即基因 病毒载体系统。方法 利用病毒重组技术将抗癌基因插入肿瘤细胞特异性的增殖病毒基因组中 ,通过细胞病理作用、荧光显微镜、免疫酶链技术及电镜等技术分别观察病毒的杀伤效应、报告基因绿色荧光蛋白、抗癌基因小鼠白细胞介素 12表达量及病毒复制情况。结果 构建了一种新型基因 病毒载体系统 ,该载体系统腺病毒E1b 5 5kDa蛋白缺失 ,保留了腺病毒E1a蛋白。该载体系统具有肿瘤增殖病毒ONYX 0 15相似功能 ,即它可在肿瘤细胞内复制及增殖 ,而在正常细胞内不能复制及增殖 ,从而特异性杀灭肿瘤细胞。它还具有更大的优势 ,即该载体系统可携带各种抗癌基因以进一步提高抗肿瘤的疗效。应用该载体系统携带该报告基因绿色荧光蛋白可使绿色荧光蛋白在肿瘤细胞内高效表达 ,其表达量明显高于传统基因治疗的腺病毒载体系 ,而在正常细胞内低表达 ,与传统腺病毒载体系统相似或更低。应用该载体系统携带抗癌基因小鼠白细胞介素 12 ,也产生类似结果 ,并在电镜中证实该载体系统携带抗癌基因小鼠白细胞介素 12可在肿瘤细胞株中复制及增殖。结论 基因 病毒载体是将抗癌基因插入肿瘤增殖病毒基因组 ,通过肿瘤增殖病毒在肿瘤细胞内特异性复制?

主体分子型非病毒基因载体的基础应用

设计并制备了一种新的具有分子探针功能的主体分子型非病毒载体-邻菲啰啉-β-环糊精衍生物主体分子(DZY-1),应用凝胶电泳法研究探讨了DZY-1与DNA相互作用及客体分子对该主体分子诱导DNA凝聚的影响;并进一步研究探讨了单一主体分子、主/客体分子配合物诱导DNA分子凝聚和聚合所形成的超分子聚合物抗限制性内切酶(HindⅢ)酶解的特性.应用扫描电子显微镜(SEM)观测到该主体分子、主/客体分子配合物与DNA分子相互作用形成超分子聚合物的微观结构形态.阐述了其作为非病毒基因载体可能的传递机制,为设计、制备新的非病毒基因载体提供了一种新途径.