不同的引导肽对丝状噬菌体基因8蛋白展示外源多肽的影响

为了研究不同的引导肽对在基因8蛋白上展示外源多肽的影响,利用基因工程方法将一短肽插入基因8蛋白的N端,并将引导多肽去除或用基因3蛋白的引导肽序列替代基因8的引导肽序列.采用放射性脉冲追踪技术检测不同的引导肽对在基因8蛋白上展示外源多肽的作用.结果表明,无引导肽序列的引导,蛋白前体无法向成熟蛋白转化.基因3蛋白的引导肽可以引导展示有外源多肽的基因8蛋白,完成从前体向成熟蛋白的转化,但转化率明显下降.研究结果对阐明噬菌体外壳蛋白在大肠杆菌中的跨膜机制具有重要的意义.

亚洲带绦虫60S核糖体蛋白L8基因的克隆表达和免疫学分析

目的原核克隆表达亚洲带绦虫成虫60S核糖体蛋白L8基因(TaRPL8),探索其应用前景。方法用RT-PCR方法从亚洲带绦虫成虫cDNA中获取RPL8基因,克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物通过SDS-PAGE进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹进行免疫学分析。结果 PCR、双酶切及DNA测序结果均表明pET-28a(+)-TaRPL8重组质粒构建成功。SDS-PAGE结果表明目的基因在大肠埃希菌BL21/DE3中获得高效表达,亲和层析获得了高纯度蛋白。重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清识别但不能够被正常大鼠血清识别,表明其具有免疫原性。结论亚洲带绦虫成虫TaRPL8基因可在大肠埃希菌BL21/DE3中获得具有免疫原性的表达,为进一步的功能研究奠定了基础。

锌转运蛋白-8及转录因子7类似物-2基因多态性与中国南方汉族人2型糖尿病的相关性

目的研究锌转运蛋白-8基因(SLC30A8)多态性位点rs13266634及转录因子7类似物-2基因(TCF7L2)多态性位点rs11196218与2型糖尿病(T2DM)以及相关代谢指标的关系。方法T2DM患者(T2DM组)259例,健康者(NC组)200名,均来自上海及周边地区。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术判断标本基因型,同时进行人体测量学及代谢指标的检测,并分别采用稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛B细胞分泌功能指数(HOMA-B)评估胰岛素抵抗和胰岛B细胞功能。结果①T2DM组中,rs13266634的C等位基因频率和CC基因型频率分别为57.3%和33.6%,均显著高于NC组的45.4%和17.2%(P值均<0.05)。②C等位基因携带者患T2DM的风险是T等位基因携带者的1.59倍(OR=1.59,95%CI为1.19～2.11,x^2=9.831,P=0.002)。与TT基因型相比,CC基因型患T2DM的风险增加2.63倍(OR=2.63,95%CI为1.42～4.87,x^2=9.69,P=0.002)。③T2DM组与NC组的TCF7L2(rs11196218)基因型及等位基因频率的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。④T2DM组中,CC基因型的HOMA-B显著低于TT基因型(P=0.002)。结论SLC30A8基因rs13266634多态性位点的C等位基因可能是中国人T2DM的风险等位基因,而TCF7L2基因rs11196218单核苷酸多态性可能与T2DM的遗传易感性无关。

丝裂原活化蛋白激酶8基因在3T3-L1细胞诱导分化中表达水平的变化及肿瘤坏死因子-α对其调节的作用

目的 观察丝裂原活化蛋白激酶8（MAPK8）基因在3T3-L1脂肪前体细胞诱导分化过程中表达水平的变化，探讨TNF-α1对成熟脂肪细胞中MAPK8基因表达水平的调节作用，分析MAPK8基因与脂肪细胞分化、脂质形成及肥胖问的关系。方法体外培养3T3-L1脂肪前体细胞，在诱导其分化成熟的基础上，采用RT-PCR技术检测诱导分化不同时段（0～10d）脂肪细胞中MAPK8基因的表达水平；应用重组TNF-α（0．1，1．0，10．0μg／L）干预分化成熟的脂肪细胞，采用RT-PCR技术检测1NF-α干预后不同时间（0．5，2，6，12，24h）脂肪细胞中MAPK8基因的表达水平。结果 1．3T3-L1前体脂肪细胞中，MAPK8基因表达水平较高。应用地塞米松（DEX）、1-甲基-3-异丁基黄嘌呤（MIX）、胰岛素后脂肪细胞逐渐分化成熟，MAPK8基因mRNA表达水平逐渐减低。MAPK8基因表达水平除在诱导分化前至d4、d2～5、d6～10时段内无显著性差异外（P均〉0．05），余各时段问表达水平均有显著差异（P均〈0．01）；2．不同浓度重组TNF-α干预成熟脂肪细胞，均能显著上调MAPK8基因的表达，并呈现随TNF-α浓度增加、刺激时间延长，表达调控作用逐渐增强的总体趋势。TNF-α浓度为0．1μg／l，时，MAPK8基因的表达水平于干预12h时间点开始出现明显上调；浓度增加至1．0μg／L,时，MAPK8基因表达水平开始显著上调的时间点提前至干预2h时，但24h时间点的表达水平未见继续上调；TNF-α浓度为10．0μg／L时，除2h时间点MAPK8基因表达开始显著上调外，12～24h时段的表达也呈上调趋势。结论 1．MAPK8基因在3T3-L1细胞分化过程中表达逐渐下调，其机制可能有利于脂肪细胞的分化成熟和脂质积聚，与肥胖发生有关；2．TNF-α能够上调成熟脂肪细胞中MAPK8基因的表达，其效应总体趋势上呈现剂量及时间反应性特征。

敲除hdac8基因对斑马鱼低温耐受能力的影响

为探究敲除组蛋白去乙酰化酶8基因(histone deacetylase 8,hdac8)对斑马鱼(Danio rerio)低温耐受能力的影响,采用组织学、生理和生化等方法,研究了低温(8℃)短期胁迫下hdac8基因敲除(hdac8^(-/-))斑马鱼和野生型(WT)斑马鱼的组织损伤、氧化应激相关指标及其凋亡相关基因表达的变化。结果表明:低温胁迫下,hdac8^(-/-)斑马鱼的半数致死时间(LT50)明显缩短,hdac8^(-/-)斑马鱼的LT50为14.5 h,WT斑马鱼的LT50为21.5 h;HE染色显示,低温胁迫下,hdac8^(-/-)斑马鱼鳃丝、肝脏和骨骼肌相较于WT斑马鱼损伤更加严重;28℃下,WT和hdac8^(-/-)斑马鱼的活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)水平无显著性变化(P>0.05),而hdac8^(-/-)斑马鱼的ATP水平则显著降低(P<0.05);低温胁迫下,hdac8^(-/-)斑马鱼的ROS和MDA水平显著高于WT斑马鱼(P<0.05),而ATP水平则显著低于WT斑马鱼(P<0.05);RT-qPCR显示,28℃下,hdac8^(-/-)斑马鱼caspase3基因表达显著上调(P<0.05),其他抗氧化与凋亡相关基因无显著性变化(P>0.05);低温胁迫下,WT和hdac8^(-/-)斑马鱼sod、cat、caspase3、caspase9和bax基因表达水平显著上调(P<0.05),且hdac8^(-/-)斑马鱼的这5种基因表达水平均显著高于WT斑马鱼(P<0.05)。研究表明,敲除hdac8基因显著降低了斑马鱼的低温耐受能力,并促进了低温氧化应激损伤和细胞凋亡。

PAX-8蛋白在宫颈腺上皮病变鉴别诊断中的作用

目的探讨配对盒基因8(PAX-8)蛋白在宫颈腺上皮病变鉴别诊断中的作用。方法收集25例良性宫颈腺上皮(BEG)、14例原位宫颈腺癌(AIS)、19例浸润性宫颈腺癌(ECA)和20例子宫内膜样腺癌(UEC)活检或手术标本,应用免疫组织化学染色检测各组织中PAX-8蛋白的表达情况。结果 PAX-8蛋白在BEG中呈弥漫性的强阳性核表达,在AIS和浸润性ECA中呈斑片或局灶性的弱阳性核表达。PAX-8蛋白在BEG、AIS、浸润性ECA组织中的阳性表达率分别为100%(25/25)、92.8%(13/14)、73.7%(14/19),其中BEG的PAX-8蛋白阳性表达率高于浸润性ECA,而BEG与AIS、AIS与浸润性ECA的PAX-8蛋白阳性表达率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。PAX-8蛋白在UEC组织中的阳性表达率为100.0%(20/20),高于浸润性ECA(P<0.05)。结论 PAX-8在宫颈腺上皮良性与恶性病变以及浸润性ECA与UEC的鉴别诊断中具有一定的作用。

成年及幼年Long-evans大鼠视皮层HSP8基因的表达差异

目的:观察热休克蛋白8(heat shock protein 8,HSP8)基因在幼年和成年Long-evans大鼠视皮层中的表达水平,探讨其在视觉可塑性关键期中的作用。方法:采用半定量RT-PCR方法,分析处于视觉可塑性关键期内的幼年Long-evans大鼠和处于视觉可塑性关键期后的成年Long-evans大鼠视皮层中HSP8基因的表达水平。结果:幼年大鼠和成年大鼠视皮层间HSP8mRNA表达量有显著性差异,成年大鼠视皮层中HSP8/G3PDH为0.68±0.03,幼年大鼠视皮层中HSP8/G3PDH为0.14±0.06,HSP8mRNA在成年大鼠视皮层中表达水平显著高于幼年大鼠(P<0.05)。结论:HSP8基因在视觉可塑性关键期后的成年大鼠视皮层中呈高水平表达,是视觉可塑性关键期终止相关的候选基因。

甲状腺癌PCDH8基因的转录调控及临床意义

目的研究甲状腺乳头状癌、甲状腺滤泡状腺瘤、结节性甲状腺肿和正常甲状腺组织中原钙黏蛋白8(PCDH8)基因转录调控表达水平,分析PCDH8基因表达与甲状腺乳头状癌患者临床病理特征的关联性。方法选择该院2013~2015年的甲状腺组织标本118例,根据病理结果分为甲状腺乳头状癌组36例、甲状腺滤泡状腺瘤组30例、结节性甲状腺肿组31例和正常甲状腺组织组21例。采用荧光定量PCR法检测各组标本PCDH8基因的表达情况,分析PCDH8基因的表达情况与甲状腺乳头状癌患者临床病理特征的关联性。结果荧光定量PCR的结果显示,正常甲状腺组织组的PCDH8阴性表达率为28.57%,低于甲状腺乳头状癌组(63.89%)和甲状腺滤泡状腺瘤组(60.00%),差异有统计学意义(P<0.05);但与结节性甲状腺肿组(54.84%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。PCDH8基因mRNA转录表达情况与肿瘤大小有显著关联(P<0.05)。结论甲状腺乳头状癌中PCDH8基因表达下调,并与肿瘤大小存在关联,在甲状腺乳头状癌的诊断与治疗中有可能成为一种有潜在价值的生物学肿瘤标志物。

敲低ACTL8基因对子宫内膜癌细胞增殖与迁移的影响

目的探讨采用携带shRNA特异序列的载体转染子宫内膜癌细胞敲低肌动蛋白样蛋白8(ACTL8)基因对细胞增殖、侵袭迁移能力的影响及其机制。方法选取人子宫内膜癌Ishikawa细胞株进行实验研究,以携带shRNA特异序列的载体及空载质粒分别转染Ishikawa细胞株,形成敲低ACTL8基因的shACTL8组和以空载质粒转染的对照组。荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测两组细胞中ACTL8 mRNA表达,Western blot法检测两组细胞ACTL8蛋白表达,Transwell迁移和侵袭实验分析Ishikawa细胞侵袭和迁移能力,CCK8细胞增殖实验及平板克隆实验检测细胞的增殖情况,Western blot法检测两组细胞的E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、P21蛋白的表达情况。结果shACTL8组的ACTL8 mRNA、ACTL8蛋白相对表达强度均低于对照组(P<0.05);shACTL8组的Ishikawa细胞侵袭、迁移水平均低于对照组(P<0.05);在细胞培养后1天、2天、3天,shACTL8组的Ishikawa细胞数目测定OD值显著低于对照组(P<0.05);平板克隆实验培养3天,可见shACTL8组培养皿中细胞生长数目明显少于对照组(P<0.05);shACTL8组E-cadherin蛋白、P21蛋白表达强度高于对照组(P<0.05);shACTL8组N-cadherin蛋白、MMP-9蛋白表达强度低于对照组(P<0.05)。结论敲低ACTL8基因抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、迁移、侵袭。

RNA干扰乳腺癌MCF-7细胞HSPA8基因表达

目的:构建并筛选高干扰率的热休克蛋白8(HSPA8)(相对分子质量70000)基因干扰质粒,为进一步研究HSPA8基因在乳腺癌中的作用提供材料。方法:根据GenBank所发表的HSPA8的基因序列合成4个干扰片段,依次构建1、2、3和4组干扰质粒:pGPU6/GFP/Neo-349、pGPU6/GFP/Neo-818、pGPU6/GFP/Neo-931和pGPU6/GFP/Neo-1180,将这4组干扰质粒分别转染至人乳腺癌MCF-7细胞,并设阴性及空白对照组。经过G418筛选后得到稳定转染的细胞株,采用RT-PCR和Westernblotting方法分别从mRNA和蛋白质水平检测各组干扰质粒对HSPA8基因的干扰效果。结果:RT-PCR检测转染shRNA干扰质粒的各组MCF-7细胞的HSPA8基因mRNA转录水平与未转染组比较,干扰质粒1组HSPA8基因的表达量下降了25.0%,干扰质粒2组下降了37.5%,干扰质粒3组下降了43.7%,干扰质粒4组下降了68.5%。Westen-blotting检测结果显示:各实验组与对照组之间蛋白表达比较差异有显著性(P<0.05),pGPU6/GFP/Neo-1180干扰质粒的干扰效率最高。结论:成功构建了HSPA8基因的干扰质粒,提示HSPA8基因及其表达产物为研究HSPA8基因在乳腺癌的发生、发展中的作用提供了材料。

基因DCAF8在多发性骨髓瘤中的临床意义

目的:寻找多发性骨髓瘤(MM)基因芯片数据集中的潜在致病基因、疾病诊断和预后相关因子并阐明其作用机制。方法:获取基因芯片数据集GSE13591和Zhan Myeloma,使用R语言进行基因差异表达分析。对共同高表达基因进行Meta分析,得到P值中位秩次TOP10基因。CCLE数据库分析TOP10基因在各肿瘤细胞系中的mRNA表达情况,筛选出蛋白酶体通路相关基因8(DCAF8)。cBioPortal数据库中分析DCAF8基因在各肿瘤细胞系的突变率。WB检测DCAF8蛋白在骨髓瘤细胞系中的表达情况。SPSS和Graph Pad软件分析DCAF8表达量和MM患者临床特征之间的相关性,进行受试者工作特征曲线(ROC曲线)绘制和生存分析。R语言Custer Profiler Package和Metascape数据库对DCAF8互作蛋白基因和共表达基因进行GO和KEGG功能富集分析。结果:数据集GSE13591和Zhan Myeloma的上调基因取交集得到477个共同高表达基因。在合并数据集中对上述基因进行Meta分析,得到P值中位秩次TOP10基因,DCAF8在MM细胞系中的平均表达水平最高。DCAF8基因在浆细胞骨髓瘤中的突变率位于各肿瘤细胞系的第一位。DCAF8蛋白在多种MM细胞系中的表达量显著升高(P<0.01)。DCAF8表达量与MM患者的肿瘤负荷显著正相关,1q21扩增阳性组的DCAF8的表达量显著高于1q21阴性组。ROC曲线显示DCAF8的表达水平可以很好地区分MM患者和正常人(P<0.01)。DCAF8高表达组比DCAF8低表达组中位生存时间显著缩短。蛋白互作网络显示DCAF8可与XPO1蛋白直接相互作用。GO和KEGG功能富集分析结果表明,DCAF8与蛋白酶体功能、剪切体活性、组蛋白乙酰化酶活性、RNA转运等功能相关。结论:DCAF8在MM中显著高表达,其表达水平可以很好地区分MM患者和正常人;其高表达与MM患者的生存预后显著负相关,且与1q21扩增和XPO1蛋白相关。

ABCG8期多态性与胆囊结石易感性关系的Meta分析

目的 探讨ATP结合盒B亚族成员8转运蛋白基因（ABCG8） D19H位点2号染色体5’端编码区第55对核苷酸（ G55 C）多态性与胆囊结石易感性的关系。方法 制定检索策略，检索中外文数据库，收集有关ABCG8 D19 H位点G55 C多态性与胆囊结石易感性相关性的研究，对胆囊结石患者（胆结石组）和健康者（对照组） G55 C等位基因型（C/G）、共显性模型（CC/GG和CG/GG）、显性模型（CC＋CG/GG）和隐性模型（CC/CG＋GG）等所占比例进行分析，同时按地域人种（黄种人与白种人）进行亚组分析。结果 共7篇文献纳入研究，胆结石组1116例，对照组2239例，入选文献无发表偏倚。统计分析显示，ABCG8 D19H位点G55C多态性与胆囊结石形成有关（C/G：OR＝2．22，95％CI＝1．66～2．96；CG/GG：OR＝2．37，95％CI ＝1．72～3．26；CC ＋CG/GG：OR＝2．39，95％CI ＝1．76～3．26）。结论 ABCG8 D19H位点G55C多态性可能与胆囊结石易感性有关。

MRP8过表达促进重组酿酒酵母外切纤维素酶生产

增强酿酒酵母纤维素酶分泌能力,为提高利用联合生物加工生产纤维素乙醇的效率提供基础。采用CRISPR/Cas9基因组编辑技术,在分泌表达外切纤维素酶CBH1的酿酒酵母Y294中过表达线粒体核糖体蛋白基因MRP8。与对照菌株相比,过表达MRP8重组酵母的胞外CBH1酶活提高了约80%。实时定量PCR结果分析表明,在MRP8过表达突变体中,CBH1转录水平高于对照菌株,但是与蛋白折叠和分泌相关的关键基因转录水平没有明显变化。在刚果红平板和含有衣霉素或二硫苏糖醇的平板上生长没有受到影响。胞内ATP含量和活性氧积累未发现显著差别。本研究表明MRP8过表达促进外切纤维素酶的生产。

基于CGGA数据库的325例脑胶质瘤患者PSMB8表达水平与临床特征的相关性研究

利用CGGA数据库,采集325例胶质瘤患者基因表达和临床信息,探讨蛋白酶体亚单位β-8(PSMB8)mRNA表达水平与胶质瘤患者临床特征及预后的关系。结果显示PSMB8 mRNA在高级别胶质瘤患者和异柠檬酸脱氢酶1野生型(IDH1-wt)患者中高表达。Pearson相关分析显示PSMB8与其他PSMB基因相关,表明PSMB8 mRNA表达与胶质瘤的恶性表型呈正相关,与总生存期(OS)呈负相关。推测抑制PSMB8可作为治疗PSMB8高表达胶质瘤的一种新方案。

锌转运蛋白-8基因单核苷酸多态性和基因-吸烟的交互作用及与维吾尔族人群2型糖尿病的关联研究

目的 探讨锌转运蛋白-8（SLC30A8）基因单核苷酸多态性和基因-吸烟交互作用及与维吾尔（维）族人群T2DM的关联性.方法 采用病例-对照研究方法以1 000例确诊为T2DM者作为病例组,按照与病例组同民族年龄相差±3岁的原则选取1 010例为对照组.收集研究对象血液标本5 ml,提取基因组DNA.应用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术（MALDI-TOF）检测SLC30A8的单核苷酸多态性,采用SPSS 16.0统计软件分析数据.结果 SLC30A8的rs13266634位点等位基因频率在两组间的差异有统计学意义,C为危险等位基因OR=1.194（95％CI：1.044～1.366）;rs13266634基因型分布频率在调整被动吸烟、主动吸烟、SBP、TC、HDL-C、LDL-C、BMI后,两组间差异均有统计学意义（P＜0.05）.基因模型分析显示rs13266634在显性模型中有意义（OR=1.640,95％CI：1.072 ～ 2.510）.病例组中被动吸烟所占比例高于对照组,主动吸烟两组间差异无统计学意义（P＞0.05）.rs13266634与主动吸烟及被动吸烟的乘积项均无统计学意义（P＞0.05）,二者对维族T2DM均无相乘交互作用;rs13266634与主动吸烟及被动吸烟的相加交互作用指标RERI、AP和S及其95％CI分别为0.301（-1.314 ～ 0.712）、0.204（-0.854 ～ 0.446）、0.612 （0.186 ～ 2.013）和0.125（-0.805 ～ 1.055）、0.052（-0.353～ 0.456）、1.096（0.500 ～ 2.403）,说明对维族T2DM无相加交互作用.结论 SLC30A8的rs13266634位点单核苷酸多态性与维族T2DM有关联性,TT为保护型基因型,rs132666334位点突变可能降低维族人群患T2DM的风险;CC、CT基因型及被动吸烟可能增加维族人群患T2DM的风险.

维吾尔族2型糖尿病与锌转运蛋白-8基因单核苷酸多态性及其交互作用的相关性分析

目的探讨锌转运蛋白-8基因（SLC30A8）的4个单核苷酸多态性（SNP）位点与维吾尔族T2DM的关联,以及SNP位点间交互作用对T2DM易感性的影响。方法选取维吾尔族T2DM患者（病例组）和健康体检者（对照组）,各932名。通过体格及生化检查获得临床资料,并进行SLC30A8基因多态性检测。结果 SLC30A8基因的4个SNP中,rs13266634基因型频率、等位基因频率分布在调整协变量前后,组间比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;rs13266634的风险等位基因为C[P〈0.05,OR（95%CI）：1.186（1.031~1.364）];SLC30A8基因模型分析显示,调整协变量后,两组rs13666334的加性模型[OR（95%CI）：0.841（0.722~0.980）]、rs3802177的显性基因模型[OR（95%CI）：0.621（0.338~0.995）]、rs3802177-rs13266634单倍型（T-T）[OR（95%CI）：0.846（0.734~0.976）]比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;广义多因子降维法（GMDR）分析显示,各SNP位点间协变量调整前后均无交互作用（P〉0.05）。结论SLC30A8基因rs13666334、rs3802177与维吾尔族T2DM的易感性有关,且rs13666334位点的突变呈保护作用,其风险等位基因C有累加性,rs3802177-rs13266634单倍型（T-T）可能是维吾尔族T2DM的保护因素之一。

过表达肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8家族样蛋白2基因诱导大鼠心脏移植免疫耐受的研究

目的观察过表达肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8家族样蛋h2（TIPE2）基因能否影响受体自身免疫捌协和移植免疫排斥反应，并探讨该基因诱导受体大鼠产生免疫耐受的可能性以及其具体作用机制。方法构建大鼠TIPE2基因载体，使其在大鼠心脏移植模型受体中过表达TIPE2，观察其能否延长供心存活时间，许检测相天指标的变化。结果供心存活时间：A组：（9．0±1．6）d；B组：（26．3±3．8）d；C组：（33．4±3．5）d；D组：（48．0±6，6）d；E组：（28．8±6．1）d。实验组供心仔活时间较对照组明显延K，差异有统计学意义（P〈0．05）；CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）比例：A组：（1．70±0．66）％；B组：（6．42±1．17）％；C组：（9．38±1．13）％；D组：（31．34±2．23）％；E组：（1．70±0．72）％。文验组CD4^＋CD25^＋Treg细胞较对照组明显升高，差异有统计学意义（P〈0．05）；与A、B、C、E组相比，D组受体大鼠外周血中白细胞介素（IL）-2、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素（IFN）-γ表达明显降低，而IL4、IL—10表达明显升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论TIPE2在诱导心脏移植免疫耐受中发挥重要作用。

胃癌组织长链非编码RNA ZDHHC8P1、MEG3、TUG1表达与临床病理特征及预后的关系研究

目的:探讨胃癌组织长链非编码RNA(lncRNA)DHHC型锌指蛋白8假基因1(ZDHHC8P1)、母系表达基因3(MEG3)、牛磺酸上调基因1(TUG1)表达与临床病理特征和预后的关系。方法:选取2013年1月至2016年1月我院病理科收集的83例胃癌患者经手术切除或胃镜活检的癌组织及癌旁组织石蜡标本,检测胃癌和癌旁组织中ZDHHC8P1、MEG3、TUG1表达。分析ZDHHC8P1、MEG3、TUG1表达与胃癌临床病理特征的关系。随访所有患者,分析ZDHHC8P1、MEG3、TUG1表达与患者预后的关系。结果:胃癌组织中ZDHHC8P1、TUG1表达量均高于癌旁组织(P<0.05),MEG3表达量低于癌旁组织(P<0.05)。ZDHHC8P1表达与肿瘤直径、分化程度、浸润深度、TNM分期、淋巴结转移、远处转移有关(P<0.05),MEG3、TUG1表达与分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示ZDHHC8P1、TUG1高表达患者无疾病进展生存(PFS)率、总生存(OS)率低于ZDHHC8P1、TUG1低表达患者(P<0.05),MEG3低表达患者PFS、OS率低于MEG3高表达患者(P<0.05)。Cox风险回归分析结果显示淋巴结转移、ZDHHC8P1高表达、TUG1高表达、MEG3低表达是胃癌患者不良预后的危险因素(HR=1.613、1.956、2.512、-0.824,P<0.05)。结论:胃癌组织中ZDHHC8P1、TUG1呈高表达,MEG3呈低表达,ZDHHC8P1、TUG1、MEG3表达均与胃癌临床病理特征和预后有关,可作为胃癌患者预后评估的辅助指标。

细胞自噬相关蛋白在大鼠脾脏撞击伤后12小时内脾组织中的表达

目的观察自噬基因相关蛋白在大鼠脾脏撞击伤后12 h内脾组织内的表达情况。方法选用清洁级健康SD大鼠20只,随机分为正常对照组(A组)、创伤后2 h组(B组)、创伤后8 h组(C组)、创伤后12 h组(D组),每组5只。B、C、D组利用生物撞击机建立脾脏撞击伤模型,A组只麻醉不撞击,麻醉后立即处死取出脾脏,B、C、D组分别于撞击后相应时间取出脾脏,评估脾脏出现损伤的程度。创伤脾组织标本进行HE染色,显微镜下观察受损脾组织的特征。大体标本观察造模是否成功。采用免疫组织化学法及Western blot法检测各组脾组织酵母自噬相关基因Atg6的同源物(Beclin1)、酵母自噬相关基因Atg8的同源物微管相关蛋白1轻链蛋白3(LC3)蛋白的表达。结果 (1)脾撞击伤模型均造模成功。同一撞击力度下不同受伤时间模型组大鼠脾脏裂伤长度和深度基本一致(P均> 0. 05)。(2) HE染色显示模型组脾组织符合脾破裂征象。(3)免疫组织化学法及Western blot法检测显示,模型大鼠随创伤后时间推移(2 h组→8 h组→12 h组),其脾组织Beclin1、LC3Ⅱ蛋白相对表达量递升(P均<0. 05),且模型大鼠各时间组均高于对照组(P均<0. 05)。结论脾脏撞击伤可导致脾组织自噬水平的上升;脾脏撞击伤后12 h内脾组织自噬相关蛋白水平随时间的推移,表达逐渐升高。