期刊文献+
共找到1篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
pNZ8149-IL21基因乳酸菌表达载体的构建与表达特性 被引量:3
1
作者 卓倩 韩煜东 +3 位作者 徐文雨 袁婷 王庆苓 赵树立 《药物生物技术》 CAS 2019年第2期105-109,共5页
构建重组质粒pNZ8149-IL21,并将其转到乳酸球菌中,利用Nisin诱导基因表达系统分析重组质粒在乳酸球菌中的表达。采用基于聚合酶链式反应的精确合成(PCR-based accurate synthesis,PAS)的方法,合成目的基因IL21,连入载体pUC57,获得重组质... 构建重组质粒pNZ8149-IL21,并将其转到乳酸球菌中,利用Nisin诱导基因表达系统分析重组质粒在乳酸球菌中的表达。采用基于聚合酶链式反应的精确合成(PCR-based accurate synthesis,PAS)的方法,合成目的基因IL21,连入载体pUC57,获得重组质粒pUC57-IL21;对含有目的基因的pUC57-IL21和pNZ8149质粒进行双酶切后,构建pNZ8149-IL21质粒;采用电转化方法将连接产物转化进NZ3900,涂板挑取12个单菌落培养后,进行PCR验证,筛选出阳性克隆,从诱导剂Nisin的浓度(30,50和100 ng/m L)和诱导时间(12和24 h)进行诱导条件优化分析IL21在乳酸菌中表达。目的蛋白在乳酸菌NZ3900中得到表达,在50 ng/m L的Nisin诱导24 h可见目的蛋白在相对分子质量15 k左右有条带表达,Nisin诱导24 h的效果优于12 h。结果说明选择乳酸菌作为载体表达系统,构建IL21高表达的重组乳酸菌是可行的。 展开更多
关键词 基因il21 重组质粒pUC57-il21 重组质粒pNZ8149-il21 乳酸乳球菌NZ3900 表达鉴定 Nisin诱导基因表达系统
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部