乳腺癌组织中雌激素受体与C-erbB-2基因、多药耐药基因MDR1表达

目的观察乳腺癌组织中雌激素受体(ER)与C-erbB-2基因、多药耐药基因MDR1(P-gp)蛋白表达并探讨其相互关系。方法用免疫组织化学法(S-P法)对162例乳腺癌手术切除标本进行ER、C-erbB-2、MDR1(P-gp)检测,结果作统计学分析。结果ER、C-erbB-2、MDR1(P-gp)的阳性表达率各为53.7%、37.0%和27.7%。ER在分化越高和无腋窝淋巴结转移者的乳腺癌中其阳性表达率高,C-erbB-2在分化越差的乳腺癌中其阳性表达率高,组间相比有显著差异(P<0.05)。在有腋窝淋巴结转移的乳腺癌中C-erbB-2、MDR1(P-gp)表达率明显升高。C-erbB-2与MDR1(P-gp)的阳性表达率间具有一定的正相关性,C-erbB-2表达与ER表达呈负相关。结论ER、C-erbB-2基因、MDR1(P-gp)在乳腺癌中有一定的内在联系,联合检测有助于乳腺癌预后的判断,为合理制定综合治疗方案提供依据。

愈痫灵方对KA致痫大鼠海马及颞叶皮质多药耐药基因MDR1b表达的影响

目的探讨愈痫灵方对耐药性癫痫模型大鼠海马及颞叶皮质多药耐药基因MDR1b表达的影响。方法 1造模:在脑立体定位仪引导下,海马区微量进样器注入红藻氨酸(KA)1.0μL(浓度为1.0μg/μL)点燃造模,选取发作行为级别在Racines标准Ⅳ级以上者,以丙戊酸钠及卡马西平灌胃干预14 d,再次亚惊厥剂量0.5μL KA复燃,选择再次发作级别在Ⅳ级以上或持续状态大鼠,且脑电图检测有癫痫样波发放者筛选为造模成功的耐药难治性癫痫模型鼠。2分组与处理:造模成功鼠随机分为愈痫灵干预组、拉莫三嗪对照组、模型组,另设假手术对照组、空白对照组共计5组,每组12只。分别给予愈痫灵汤剂、拉莫三嗪及同等体积的蒸馏水(2 m L/d)灌胃30 d。3标本处置与检测:采用荧光实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,分别检测海马区与颞叶皮层MDR1b的表达。结果与假手术对照组、空白对照组间比较,造模成功组海马区MDR1b的表达水平明显升高(P<0.01),颞叶皮质区差异无统计学意义(P>0.05);所有造模组的海马区MDR1b表达高于颞叶皮质,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,愈痫灵、拉莫三嗪干预后能显著降低KA致痫鼠海马区MDR1b的表达水平(P<0.05);愈痫灵方组与拉莫三嗪组间比较,海马与颞叶皮质之间差异均无统计学意义(P>0.05);各组间颞叶皮质区MDR1b表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 KA造模耐药性癫痫大鼠模型海马区多药耐药基因MDR1b的表达较皮质区明显升高。愈痫灵方降低海马区MDR1b的表达,可能是其抗耐药性癫痫作用机制之一。

探析多药耐药基因MDR1在卵巢癌化疗中的价值

目的探析多药耐药基因MDR1在卵巢癌化疗中的价值。方法收集我院2012年2月至2014年2月收治的卵巢癌患者160例初治卵巢癌患者肿瘤组织标本,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测MDR1基因表达情况,同时用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测肿瘤细胞对抗癌药的敏感性。结果 91例(56.875%)卵巢癌患者MDR1基因表达阳性;耐药组和敏感组与MDR1基因表达阳性和阴性的总符合率为81.08%(P>0.05);卵巢癌组织中的MDR1表达与年龄无关(P>0.05)。MDR1基因表达阳性和阴性与化疗预后有关(P<0.05)。结论 MDR1基因表达阴性患者应用MDR相关药物是有效的,阳性患者应避免应用MDR相关药物。MDR1的表达阴阳性的检测对临床用药有一定的指导价值,作为判断卵巢癌患者预后的一个指标。

穴位埋药线对难治性癫痫大鼠大脑海马及皮质多药耐药基因MDR1b的影响

目的探讨穴位埋药线对难治性癫痫大鼠大脑海马及皮质中多药耐药基因MDR1b的影响。方法选用雄性SD大鼠120只,随机分为空白对照组、模型组、拉莫三嗪组、普通线组、药线组。普通线组与药线组均取大椎、肝俞(双)、血海(双)、丰隆(双)穴,先埋一侧穴位,间隔15 d后埋对侧穴位;拉莫三嗪组按照人用拉莫三嗪剂量为5 mg/(kg·d)换算灌胃大鼠,每日2次;模型组给予灌胃同等体积(2 mL/d)的蒸馏水,均干预30 d。采用荧光实时定量聚合敏链反应(RT-PCR)的方法检测多药耐药基因MDR1b在海马与颞叶皮层的表达。结果与模型组相比,药线、普通线、拉莫三嗪干预后能降低致痫大鼠海马区多药耐药基因MDR1b的表达水平(P<0.05);与空白对照组比较,模型组中致痫鼠海马区多药耐药基因MDR1b的表达水平明显升高(P<0.01);与普通线组比较,药线组明显降低致痫大鼠海马区多药耐药基因MDR1b的表达水平(P<0.05);模型组的海马区与颞叶皮质区多药耐药基因表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论埋药线逆转与降低致痫大鼠海马区及皮质区多药耐药基因的表达水平,可能是其抗癫痫生物学作用机制之一。

基因mdr1高表达多药耐药肿瘤细胞对力达霉素的药物敏感性

目的利用经药物诱导获得的mdr1基因高表达细胞株以及通过mdr1基因转染建立的稳定高表达细胞株,研究多药耐药肿瘤细胞对力达霉素(C-1027)的药物敏感性。方法构建mdr1重组真核表达质粒pcDNA3.1/mdr1,利用脂质体转染技术,获得mdr1高表达HepG2肝癌细胞。经RT-PCR、细胞荧光免疫化学及罗丹明外排实验,鉴定了细胞的mdr1表达水平和药物外排活性。MTT方法测定敏感细胞及相对应的多药耐药细胞对力达霉素等多种抗肿瘤药物的药物敏感性。结果mdr1稳定转染细胞株HepG2/mdr1、多药耐药KBv200细胞和MCF-7/ADR细胞对力达霉素的IC50值分别为(0.020±0.011)nmol.L-1,(0.24±0.20)nmol.L-1和(0.028±0.011)nmol.L-1。相对于各自的敏感细胞,多药耐药细胞HepG2/mdr1,KBv200和MCF-7/ADR对力达霉素的抗药倍数分别是1.3,6.8和1.6倍,对阿霉素的抗药倍数分别是8.8,37.2和181.3倍,对紫杉醇的抗药倍数分别是40.3,336.8和49.2倍。结论mdr1高表达的多药耐药肿瘤细胞对力达霉素仍高度敏感,未表现出抗药性。

靶向肿瘤多药耐药基因mdr1的siRNA的构建与鉴定

mdr1基因及其表达产物P-gp是引起肿瘤细胞多药耐药(MDR)的主要原因,抑制mdr1基因的表达可用于逆转MDR.RNAi可用于特异抑制靶基因的表达,本研究的目的是构建获得可特异有效靶向mdr1基因的siRNA元件.应用siRNA设计软件与mRNA结构分析软件设计构建了3个分别靶向mdr1基因mRNA环结构和茎结构的siRNA元件,同时构建了携带mdr1基因序列的luc报告质粒,通过siRNA表达质粒与携带靶序列的报告质粒的共转染抑制实验检测不同siRNA的抑制效率,结果显示靶向环结构siMDR1B具有较好的抑制效率和特异性.进一步将siMDR1B表达载体与mdr1基因表达载体共转染细胞,应用免疫流式细胞术检测显示,相比对照细胞,siMDR1B可显著抑制其转染后mdr1基因产物P-gp蛋白的表达活性.同时采用CCK-8细胞活性检测试剂评价了siMDR1B对细胞活性的影响,结果显示siMDR1B不会影响细胞活性,具有良好的特异性.本研究获得的可有效靶向mdr1基因的siRNA元件可为进一步开展逆转MDR研究提供重要基础.

多药耐药基因MDR1及P-gp蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的检测乳腺癌组织中多药耐药基因MDR1及P-gp蛋白的表达,并探讨其表达与临床病理因素的关系及MDR1与P-gp的相关性。方法采用荧光定量RT-PCR(FQ-RT-PCR)法检测61例乳腺癌、22例对照组(包括11例乳腺良性疾病、11例癌旁正常组织)中MDR1基因的表达,同时采用免疫组化法检测上述标本中P-gp蛋白的表达。结果乳腺癌组织中MDR1基因扩增率为50.82%(31/61),与正常对照组相比差异有统计学意义,P=0.0006。乳腺癌中P-gp蛋白阳性率为42.62%(26/61),其表达与年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、ER、PR、月经状况无关;MDR1基因扩增率高于P-gp蛋白表达,二者呈高度相关,但并不完全相符。结论乳腺癌中存在多药耐药基因MDR1及P-gp蛋白的表达,且其表达呈正相关。检测上述基因及其蛋白的表达,可预测乳腺癌的多药耐药。

人多药耐药基因mdr1野生型mRNA转导脐血干细胞提高其对化疗耐药性的体外研究

目的:将人类多药耐药基因(mdr1)全长野生型mRNA 转导至人脐带血干细胞,分析其P糖蛋白的表达及干细胞的耐药性。方法: 通过体外转录方法经人野生型mdr1 基因全长cDNA制备相应的mRNA, 经脂质体介导转染人造血干细胞,采用RT- PCR 和Western blot 检测转染效果,流式细胞仪检测蛋白表达、体外培养及细胞活率计数观察耐药性。结果: 转染后P糖蛋白表达丰度为9 .05%,对照组为1. 01%; 转染后具有Rhodamin 123 排泌功能的细胞占98 .72%, 对照组为66. 83%;转染后细胞耐药性明显增强,P=0 .002。结论: 通过脂质体介导,将人类mdr1基因野生型全长mRNA转导入脐血干细胞,增加了P糖蛋白的表达,提高了细胞的耐药性。该系细胞可用于缓解和治疗恶性肿瘤化疗带来的骨髓抑制。

肾细胞癌肿瘤抑制基因VHL的变异多药耐药基因Mdr的表达

目的 探讨人肾细胞癌中的VHL肿瘤抑制基因的变异和Mdr基因的表达水平 ,同肾癌发生发展的关系。方法 采用多聚酶链式反应 (PCR) ,DNA单链多态性分析和DNA测序的方法分析了 4 0例肾细胞癌标本 (其中包括 30例富糖原型 ,6例是嗜染型、3例多形性、1例颗粒型 )。用免疫组织化学法检测了正常肾组织和 35例肾细胞癌组织切片。结果 19 30 ( 63% )的富糖原型肾细胞癌的VHL肿瘤抑制基因发生了变异 ,其中包括 13例缺失、3例插入、2例错译和 1例无义。而在对照组未发现基因变异。而Mdr表达与组织学类型相关 ,且表达量与肿瘤分级有关。结论 富糖原型肾细胞癌可能在分子遗传学水平上与其它类型的肾细胞癌有所区别。

P-糖蛋白编码基因mdr1在肝细胞癌中差异表达的定量检测

化疗药对于肝细胞癌（HCC）的疗效较差,有研究表明其与多种多药耐药（multidrug resistance,MDR）基因有关[1],而多药耐药基因1（mdr1）的编码蛋白P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）在其中占有重要地位[2],本研究利用逆转录实时荧光聚合酶链反应（Real-time PCR）技术定量检测了mdr1基因在肝细胞癌中的表达.

糖尿病患者多药耐药基因mdr1的表达

目的:体外观察糖尿病患者肝细胞诱导发生胰岛素抵抗(IR)中多药耐药基因mdr1的表达。方法:采用高浓度胰岛素诱发肝源性细胞HepG2建立IR细胞模型(HepG2 IR细胞),GOD-POD微量化法测定葡萄糖消耗量,RT-PCR检测胰HepG2 IR细胞mdr1基因和胰岛素受体(InsR)mRNA的表达,流式细胞术(FCM)检测P-糖蛋白(P-gp)和InsR蛋白水平。结果:胰岛素诱发HepG2发生IR后,HepG2 IR细胞葡萄糖消耗量降低约10%～45%,InsR基因mRNA表达显著下调、受体表达量降低50.2%～82.9%。胰岛素诱导HepG2细胞产生抗性的过程中,耐药基因mdr1基因表达同步显著增强,mRNA转录增高0.7～2.1倍,P-gp表达阳性细胞增加0.6～1.7倍、表达强度增高。结论:胰岛素诱发的肝脏胰岛素抵抗细胞mdr1基因和P-gp的表达显著增强,提示耐药基因可能与胰岛素抵抗相关联。

多药耐药基因MDR1在乳腺癌中的表达及意义

为探讨多药耐药基因MDRI在乳腺癌中的表达特点及意义,应用S-P法免疫组化技术检测了MDRI(Pgp)在56例乳腺癌组织中的表达。结果表明:①Pgp阳性颗粒在癌细胞中呈浆型或膜型分布,总阳性表达率为53.6%,其中粘液腺癌阳性率与浸润性导管癌、单纯癌和髓样癌相比差异有显著意义(P<0.05);②10例双侧乳腺癌的首发癌Pgp阳性表达率(6/10)低于次发癌(8/10);③48例乳腺癌术后随访结果,Pgp阴性表达者,5年无瘤生存率为72.7%(16/22),阳性表达者为38.5%(10/26),差异有显著意义(P<0.05)。结论:检测乳腺癌病人MDRI的表达水平,对判断预后有重要意义。

多药耐药性基因1(MDR1)基因多态性对丙戊酸钠治疗老年癫痫血药浓度的影响

目的探讨多药耐药性基因1(multidrug resistance 1 gene,MDR1)基因多态性对丙戊酸钠治疗老年癫痫血药浓度的影响。方法选择2021年10月1日—2022年10月1日于淮北矿工总医院诊治的老年癫痫患者86例为研究对象,采用多聚酶连锁反应限制性片段长度多态性(Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)和测序技术确定MDR1 C3435T位点基因型分布情况,采用柱前衍生化法(HPLC法)测定丙戊酸血清药物浓度,分析MDR1 C3435T基因多态性与丙戊酸钠治疗老年癫痫血药浓度的相关性。结果不同MDR1 C3435T基因型患者丙戊酸钠血药浓度差异有统计学意义(P<0.05)。与CC基因型组比较,TT基因型组和CT基因型组的丙戊酸钠血药浓度均显著升高(P<0.05)。老年癫痫患者使用丙戊酸钠后,突变组胃肠道反应、嗜睡、肝功能异常、肾功能异常等总不良反应发生率显著高于CC基因型组(P<0.05)。结论MDR1 C3435T的TT基因型组和CT基因型组均可增加老年癫痫患者丙戊酸钠的血药浓度,但同时不良反应发生率更高。

晚期非小细胞肺癌患者XPG基因及MDR1基因单核苷酸多态性与铂类化疗疗效的相关性

目的探讨DNA修复基因XPG以及多药耐药基因MDR1的单核苷酸多态性与晚期非小细胞肺癌患者对铂类为主的化疗方案敏感性的关系。方法经病理确诊的晚期NSCLC患者101例,采用DDP为主的化疗方案,化疗2～3个周期后进行临床疗效评价。以PCR-RLFP方法进行XPG、MDR-1的基因型分析,比较不同基因型对化疗敏感性的影响。结果携带MDR1-3435等位基因C/C的患者的化疗有效率为57.8%,显著高于至少携带1个T等位基因的26.8%(OR=0.272,95%CI=0.117～0.635,P(0.05));携带MDR1-2677至少1个T等位基因的患者的化疗有效率12.8%要显著低于其他基因型患者的58.1%(OR=17.999,95%CI=4.938～65.599,P(0.01);而XPG各基因型与化疗敏感性的关系没有显著性的差异。结论MDR1基因多态性与NSCLC患者对铂类药物的化疗敏感性相关,基因XPG的多态性是否与铂类药物化疗的敏感性是否具有相关性尚需进一步的研究。

抗癫癎药物对正常幼年大鼠脑内多药耐药基因MDR1表达的影响

近年来，国内外对于难治性癫痫发病机制的研究已经证实，多药耐药基因（MDR）在癫痫病灶内存在异常高表达现象，这种高表达可能通过一种非特异性的机制将一部分结构与其底物类似的化合物，包括大部分抗癫痫药（AEDs），从其作用部位排出，造成局部药物的有效浓度降低，使癫痫发作难以控制。导致多药耐药基因1（MDR1）表达增加的原因还不清楚，可能是多方面的，绝大多数作者认为癫痫长期反复发作可以诱导MDR1的高表达，但是不同的学者对于抗癫痫药物是否会诱导MDR1表达增高还存在争议，尽管体外培养细胞显示AEDs对MDR1存在诱导作用，但是在活体动物的研究这一点却没有得到证实。儿童是癫痫的高发人群，未成熟脑既有与成熟脑相近的解剖生理结构，又有与成熟脑不同的发育中脑特征表现。目前国外的文献均限于成年动物的研究，2004年12月至2005年12月，我们以MDR1基因表达产物P糖蛋白（PGP）为观察指标，观察了AEDs对未成熟脑MDR1的表达是否存在诱导作用。报告如下。

MDR1基因C3435T多态性对精神分裂症帕利哌酮临床疗效的影响

探讨精神分裂症患者多药耐药MDR1基因C3435T多态性与帕利哌酮临床疗效的关系.对124例精神分裂症患者使用帕利哌酮缓释剂治疗8周,测定PANSS量表,并根据PANSS量表及分量表的减分率将患者分别分为总疗效、阳性症状疗效及阴性症状疗效的有效组和无效组;采用LDR-PCR技术检测MDR1基因C3435T位点的基因型.精神分裂患者中CC、CT、TT所占比例分别为24.2%、60.5%、15.3%,其中CT所占比例明显高于CC和TT基因型(P<0.05),C等位基因与T等位基因所占比例分别为54.4%和45.6%(P<0.05).帕利哌酮治疗总疗效、阳性症状疗效及阴性症状疗效的有效组与无效组相比,C3435T基因型CC、CT与TT及等位基因C、T的分布均无显著性差异(P>0.05).MDR1基因C3435T多态性可能与帕利哌酮缓释剂治疗精神分裂症的临床疗效无关.

RNA干扰技术抑制耐药细胞MDR1基因表达的研究

目的:探讨载体表达的小干扰RNA(siRNA)抑制MDR1基因的表达,并逆转卵巢癌耐药细胞多药耐药的可行性。方法:浓度梯度诱导法和人MDR1基因载体转染法建立阿霉素耐药细胞株OVCAR/AR和多药耐药亚株OVCAR/MDR细胞。脂质体介导将MDR1特异性siRNA的表达载体(pSN/mdr1a和pSN/mdr1b)转染耐药细胞,实时定量RT-PCR方法检测MDRl mRNA的表达,流式细胞术检测P-gp的表达,MTT法检测耐药细胞对化疗药的抵抗性。结果:耐药细胞OVCAR/MDR细胞MDR1 mRNA的表达高于OVCAR/AR细胞,两者均高于其亲代细胞OV-CAR-3;转染pSN/mdr1a和pSN/mdr1b可显著抑制两株耐药细胞MDR1 mRNA和P-gp的表达,OVCAR/MDR和OV-CAR/AR细胞对阿霉素抗药性的逆转率分别为79.5%和93.9%。结论:载体表达的MDR1特异性siRNA可抑制卵巢癌耐药细胞亚株MDR1基因的表达,因而增加耐药细胞对化疗药物的敏感性。

急性白血病患者bcrp、mdr-1、mrp-1和lrp耐药基因表达的临床意义

目的:定量检测急性白血病(AL)患者乳腺癌耐药相关蛋白基因(bcrp)、多药耐药基因(mdr-1)、多药耐药相关蛋白基因(mrp-1)及肺耐药相关蛋白基因(lrp)表达及其与临床的关系。方法:应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应RT-PCR(real time fluorescent quantitative RT-PCR,FQ RT-PCR)检测105例AL患者bcrp、mdr-1、mrp-1、lrp等基因的拷贝数,分析其与临床预后的关系。结果:AL组bcrp基因拷贝数(2.8×103)±(8.4×103)明显高于正常对照组(7.6×102)±(2.3×103),P<0.05;mdr-1基因拷贝数(1.3×105)±(2.2×105)及lrp基因拷贝数(8.3×105)±(1.0×106)显著高于正常对照组(P<0.01)。复发组AL患者的mdr-1拷贝数(3.7×104)±(1.1×105)明显高于初治组患者(1.1×104)±(3.6×104),P<0.05。在AL耐药组mdr-1拷贝数(2.1×104)±(9.1×104)明显高于敏感组(1.0×104)±(3.8×104),P<0.05)。经直线相关分析显示mdr-1和mrp-1,mdr-1和lrp,mrp-1和lrp之间呈显著正相关,经等级相关分析显示mdr-1和lrp的表达与耐药性密切相关。结论:急性白血病多药耐药的出现与bcrp、mdr-1、mrp-1、lrp中一项或几项过度表达有关,mdr-1较其它基因更具有预测临床预后的意义。

消化道肿瘤MDR1基因和P-糖蛋白的表达与化疗药物耐药的关系

目的探讨消化道肿瘤多药耐药基因MDR1基因和P-糖蛋白(P-gp)的表达与肿瘤化疗药物耐药之间的关系。方法选择72例消化道肿瘤患者的手术标本,采用荧光定量PCR检测MDR1 mRNA表达量,ELISA法检测P-gp表达水平,并与ATP-TCA化疗药物敏感性试验结果作对照。结果 72份消化道肿瘤组织中,MDR1 mRNA阳性表达率为75%,P-gp阳性表达率为67%。72份消化道肿瘤组织中,对10种化疗药物均不敏感的有12份,对1种化疗药物敏感的有15份,对2种化疗药物敏感的9份,对3种化疗药物敏感的有9份,对5种化疗药物敏感的有15份,对8种化疗药物敏感的有9份,对所有化疗药物均敏感的有3份。消化道肿瘤MDR1mRNA、P-gp的阳性表达率与其对化疗药物敏感程度呈负相关(r s值分别为-0.672、-0.715,均P<0.05)。结论 MDR1基因、P-gp表达与肿瘤耐药性相关,MDR1基因、P-gp阳性表达提示患者可能对化疗药物存在获得性耐药。