卵巢癌患者HPV16/18感染与抑癌基因Rap1GAP表达的关系

目的探讨卵巢癌患者人乳头瘤病毒16/18(HPV16/18)感染与抑癌基因Rap1GAP表达的相关性。方法回顾性选取2014年3月-2019年10月河南大学淮河医院妇科收治的200例卵巢癌患者作为研究对象,依据患者是否发生HPV16/18感染将其划分为感染组(n=106)和非感染组(n=94),检测和比较两组患者卵巢组织的Rap1GAP基因表达情况,分析卵巢癌患者HPV16/18感染和Rap1GAP基因表达之间的相关性。结果HPV16/18感染组Rap1GAP mRNA相对含量和表达率均低于非感染组(P<0.05),且Rap1GAP mRNA在卵巢癌中的表达与HPV16/18感染呈负相关性(r=-0.613,P=0.142)。200例卵巢癌患者中,HPV16/18感染与患者是否合并有糖尿病、肿瘤分化程度、性伴侣数、有无异体输血和Rap1GAP mRNA表达率有关(P<0.05);多因素分析结果显示,肿瘤低分化、性伴侣数≥2个和Rap1GAP mRNA表达(-)是卵巢癌患者HPV16/18感染的影响因素(P<0.05)。结论抑癌基因Rap1GAP在卵巢癌HPV16/18感染患者中的表达率和相对含量均较低,其与卵巢癌HPV16/18感染呈负相关性,Rap1GAP可能共同参与了卵巢癌的发生、发展过程。

宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP基因及蛋白水平改变关系的研究

目的研究宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP基因及蛋白水平改变的关系。方法以我院收治的70例宫颈癌患者为观察组,另选正常宫颈组织70例为对照组。分别对两组对象的宫颈组织进行DNA提取、总RNA提取、cDNA合成、PCR反应扩增。并检测HPV感染、Rap1GAP基因外显子E11和E19缺失率、Rap1GAP mRNA表达及Rap1GAP蛋白表达情况。结果观察组患者HPV感染明显高于对照组(P<0.05)。观察组HPV阳性和阴性组E11和E19的缺失率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Rap1GAP mRNA、Rap1GAP蛋白在观察组HPV阳性组组织中的表达率、阳性表达率明显低于HPV阴性组(P<0.05)。宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP mRNA的表达呈正相关(r=0.578),与Rap1GAP蛋白的阳性表达呈正相关(r=0.554)。结论宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP mRNA的表达呈正相关,与Rap1GAP蛋白的阳性表达呈正相关。

Rap1GAP基因表达上调对HL-60细胞体内及体外侵袭能力的影响

目的 探讨上调Rap1 GAP基因表达对白血病细胞株HL-60细胞体外侵袭能力的影响,并构建白血病动物模型验证体外实验的结果.方法 采用实时定量PCR及Western blot法检测已构建的Venus/HL-60细胞（空载体对照组）及Rap1 GAP过表达单克隆细胞株Rap1 GAP/HL-60 （R1、R2）细胞的Rap1GAP表达水平,Transwell方法检测空载体对照组、R1、R2细胞的体外侵袭能力,实时定量PCR检测各组细胞MMP-9 mRNA表达,并通过明胶酶谱法检测MMP-2及MMP-9活性;将4周龄BALB/c裸鼠进行预处理后接种白血病细胞,观察各组裸鼠生存时间及白血病细胞在其脏器中的浸润情况.结果 R1、R2细胞的Rap1GAP表达水平分别为空载体对照组的16.2、17.3倍,侵袭率分别为（55±5）％、（59±4）％,显著高于空载体对照组的（14±4）％（P值均＜0.001）.R1和R2细胞的MMP-9 mRNA表达水平增加,约为空载体对照组的12.0倍.动物模型实验结果显示接种R1细胞裸鼠（R1组）生存时间为（32.00±1.85）d,R2组为（33.37±2.50）d,空载体对照组为（43.62±2.32）d,R1组和R2组裸鼠生存时间较空载体对照组缩短（P＜0.05）.R1组和R2组共有3只裸鼠出现脑膜组织浸润,脑膜组织扩增出Rap1GAP和MMP-9基因,空载体对照组裸鼠各脏器白血病细胞浸润不明显.结论 Rap1GAP增强HL-60细胞侵袭能力,同时伴随MMP-9 mRNA表达水平升高,裸鼠体内实验亦证实Rap1GAP提高了HL-60细胞体内侵袭力.

实时荧光定量PCR技术运用于肝癌患者基因检测

目的探讨实时荧光定量PCR SYBR Green I探针技术在研究肝癌患者中基因表达情况的可行性。方法运用实时荧光定量PCR SYBR Green I技术,检测肝癌患者癌组织及癌旁组织RAP1GAP基因表达情况。结果实验组和对照组有明显的统计学差异。结论Real-time PCR技术检测目的基因的表达是非常方便快捷准确的方法。