先天性巨结肠症WNT8b和SHH基因的突变与表达

目的 探讨WNT8b和SHH基因突变与中国儿童先天性巨结肠症（HSCR）发病的关系.方法 收集东北地区72例散发性HSCR患儿术前全血标本（病例组）,同时选取72名性别、年龄相匹配的健康儿童外周血作为对照（对照组）.提取上述外周血标本基因组DNA后,应用PCR方法对WNT8b基因第1外显子和SHH基因第1外显子进行基因突变的检测,将突变样品进行自动测序分析.采用荧光实时定量PCR（qRT-PCR）方法检测外周血WNT8b和SHH基因的mRNA水平.结果 病例组72例HSCR患儿的WNT8b基因测序结果显示,13例WNT8b基因编码区发生突变,其中杂合性缺失（A缺失）8例（11.1%）,碱基置换突变5例（6.9%） SHH基因测序结果显示,11例SHH基因编码区发生突变,其中杂合性缺失（A缺失）7例（9.7%）,碱基置换突变4例（5.6%） 从而引发氨基酸的改变 而对照组均未发现上述突变.病例组与对照组外周血WNT8b和SHH mRNA表达水平分别为30.01±1.13、17.33±0.62和28.25±1.27、18.94±0.31,差异有统计学意义（均P＜0.05）.结论 HSCR患儿外周血WNT8b和SHH基因存在突变和异常表达,这两种基因可能与东北地区中国儿童HSCR的发生有关.