中药复方AC_(960)对人肝癌细胞p21^(ras)、bal-2、P^(53)基因表达调控作用的研究

目的：研究中药复方ＡＣ９６０对人肝癌细胞基因、抑癌基因表达的影响，探讨其抗癌作用机制。方法：ＡＣ９６０灌胃给药后，采集大鼠血清，处理人肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１，３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察细胞增殖，流式细胞仪分析细胞周期和ｐ２１ｒａｓ、ｂａｌ－２、Ｐ５３基因蛋白表达。结果：ＡＣ９６０具有显著抑制 ＳＭＭＣ－７７２１细胞增殖和促进细胞凋亡作用，细胞周期分析，ＤＮＡ直方图上见典型凋亡峰，２４ｈ时为２１．２５％，４８ｈ时为２７．７７％，早期（２４ｈ）Ｓ期细胞比例增加，Ｇ２／Ｍ期减少，后期（４８ｈ），Ｇｏ／Ｇ１期细胞增多，Ｓ期减少。Ｐ５３、ｂａｌ－２、ｐ２１ｒａｓ在 ＳＭＭＣ－７７２１细胞中都有不同程度表达，ＡＣ９６０处理后，Ｐ５３表达增强，ｂｃｌ－２、ｐ２１ｒａｓ表达降低。结论：抑制癌基因、增强抑癌基因表达，阻断细胞增殖周期，抑制人肝癌细胞增殖，促进癌细胞凋亡可能是ＡＣ９６０抗肝癌主要作用机制。

多形性腺瘤及恶变组织中bal-2表达

采用免疫组化方法，观察ｂｃｌ－２（Ｂｃｅｌｌｙｍｐｈｏｍａ－２）基因产物在多形性腺瘤及其恶变组织中的表达与分布，以图像分析仪进行计数分析。结果显示肿瘤组织中以导管样上皮细胞、粘液样细胞以及软骨样细胞的阳性表达较高，而鳞状上皮团块中，ｂｃｌ－２表达极低。各组阳性病例比例：对照组５例慢性诞腺炎为８０％（４／５），１５例多形性腺瘤为８０％（１３／１５），７例多形性腺瘤恶性病变为８６％（６／７）。图像分析仪计数阳性细胞显示慢性诞腺炎为５％，多形性腺瘤为４２％，而恶性病变为５７％，统计与分析表明良性及恶性多形性腺瘤与对照组比较，差异有显著性（Ｐ＜０．０５），而良性和恶性组间，差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。

镉对16HBE细胞凋亡及Bal-2、Bax基因表达影响

目的探讨镉恶性转化人支气管上皮细胞(16HBE细胞)过程中细胞凋亡状况以及Bal-2和Bax表达变化。方法采用流式细胞术和实时荧光定量PCR法检测16HBE细胞、氯化镉恶性转化16HBE细胞不同阶段(第5、15、35代细胞及成瘤细胞)的细胞凋亡和Bal-2和Bax基因mRNA表达情况。结果 16HBE细胞和恶性转化细胞系第5、15、35代细胞及成瘤细胞的凋亡率分别为0.65%、1.14%、1.87%、3.78%和4.93%;细胞的Bal-2和Bax的mRNA表达量分别为(9.067±0.155)、(8.183±0.206)、(5.971±0.015)、(4.533±0.030)、(4.863±0.066)和(5.973±0.026)、(6.012±0.112)、(6.659±0.028)、(7.032±0.045)、(7.519±0.022),随着转化代数增加,Bal-2 mRNA表达量逐渐降低,Bax的mRNA表达量逐渐上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论氯化镉恶性转化16HBE细胞过程中能引起细胞凋亡,抑止Bal-2基因的表达和上调Bax基因表达。