丝氨酸蛋白酶编码基因prtP对副干酪乳杆菌黏附特性的影响

为探讨丝氨酸蛋白酶编码基因prtP对副干酪乳杆菌黏附特性的影响,利用λRed重组系统敲除副干酪乳杆菌的prtP基因,构建副干酪乳杆菌prtP基因缺失突变株,比较突变株与亲本株的表面结构、黏附特性的差异。结果表明,prtP基因缺失突变株的生长速度变慢,疏水性和自聚合性明显下降,抑菌效果无显著性差异,对抗生素的敏感性发生了显著变化,体外对细胞的黏附性显著降低。可见,prtP基因对副干酪乳杆菌的黏附特性十分重要,该基因缺失将改变菌株的生物学特性。

基因prtP编码的细胞膜丝氨酸蛋白酶lactocepin对干酪乳杆菌体内外黏附性的影响

[目的]研究基因prtP编码的细胞膜丝氨酸蛋白酶lactocepin对干酪乳杆菌体内外黏附性的影响。[方法]利用荧光标记技术对干酪乳杆菌亲本株(L.c)及prtP基因缺失突变株(L.cΔprtP)进行标记,对6~8周龄的BALB/c小鼠进行干预,测定亲本株和突变株体内黏附菌体数量的差异,同时测定其在体外对小鼠肠黏液的黏附性。[结果]L.cΔprtP的黏附率总体上较L.c低,黏附能力较L.c弱。说明干酪乳杆菌的黏附性受lactocepin的影响很大。[结论]干酪乳杆菌体内外黏附性与基因prtP编码的细胞膜丝氨酸蛋白酶lactocepin有关。

prtP基因对副干酪乳杆菌调节小鼠肠道免疫作用的影响

目的研究副干酪乳杆菌丝氨酸蛋白酶编码基因prtP对小鼠肠道免疫调节作用的影响。方法BALB/c雌性小鼠随机分7组：PBS对照组、副干酪乳杆菌亲本株（Lactobacillus paracasei, Lp）、prtP缺失突变株（Lp△prtP）及回复株ReLp△prtP对应的高、中剂量组（1×109 CFU/ml、5×108 CFU/ml）连续灌胃0～21 d后对免疫器官指数、脾脏淋巴细胞转化试验、巨噬细胞能量代谢水平、腹腔巨噬细胞吞噬能力、细胞因子、脾脏CD11c＋、CD80＋有核细胞数进行检测。 结果与prtP基因缺失突变株相比，副干酪乳杆菌亲本株能显著提高小鼠脾脏淋巴细胞转化率、腹腔巨噬细胞的能量代谢水平以及腹腔巨噬细胞吞噬能力，能显著提高血清中IFN-α、IL-10、IFN-γ的表达，显著提高CD11c＋、CD80＋双阳性细胞数量。结论副干酪乳杆菌对肠道免疫功能的促进作用与prtP基因有关。