慢性肾脏病患者血浆非活性形式非羟化基质γ羧基谷氨酸蛋白的检测及意义

目的探讨慢性肾脏病（CKD）患者血浆非活性形式非羟化基质γ羧基谷氨酸蛋白（dp-ucMGP）的检测及意义。方法检测120例CKD分级为2。5D级患者血浆dp-ucMGP水平，并接受多层螺旋CT扫描量化主动脉钙化情况，对患者的病死率进行前瞻性研究。结果随着CKD分级进展，患者血浆dp-ucMGP水平逐步增加，2-3级、4-5级和5D级CKD患者血浆dp-ucMGP水平比较差异有统计学意义（P〈0．05）。CKD分级、血红蛋白、CT计分、C反应蛋白、年龄和香豆素应用与血浆dp-ucMGP水平具有独立相关性。此外，血浆dp-ucMGP水平和年龄与CT计分呈正相关。随访（712±411）d，死亡38例（其中23例为心血管事件）。初步分析显示，血浆dp-ucMGP≥915pmol／L与总病死率具有相关眭；但是经年龄和CT计分校正后其相关性消失。结论随着CKD分级进展，患者血浆dp-ucMGP水平逐步增加，且与严重的主动脉钙化相关。血浆dp-ucMGP可以作为CKD患者血管钙化的客观指标。

基质γ-羧基谷氨酸蛋白对冠心病的诊断价值研究

目的探讨基质γ-羟基谷氨酸蛋白(MGP)对冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)的诊断价值。方法采用酶联免疫吸附法检测健康者和不同冠状动脉钙化积分(CACS)CHD患者血清MGP水平,并进行统计分析。以受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析MGP对CHD的诊断价值。结果 CHD患者与健康者之间,以及不同CACS水平CHD患者之间血清MGP水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。CACS与血清MGP水平呈正相关(P<0.05)。MGP诊断CHD的ROC曲线下面积为0.667,诊断阈值为70.69pg/mL,诊断灵敏度为58.80%,特异度为83.70%,约登指数为0.425。结论 CHD患者血清MGP水平存在明显异常,血清MGP水平与CACS呈正相关。MGP对CHD的诊断价值明显,对疾病的临床预防和早期诊断具有重要作用。

基质γ-羧基谷氨酸蛋白与肾结石形成

肾结石形成以肾小管或肾间质的结晶异常沉积为特征,是一个多蛋白相互作用和多信号通路参与的复杂的生物学过程。与血管钙化机制类似,肾脏通过表达和分泌一些大分子蛋白参与和影响肾脏钙化。本文简介基质γ-羧基谷氨酸蛋白与肾结石形成的关系。

强直性脊柱炎患者血清非磷酸化基质γ-羧基谷氨酸蛋白和巨噬细胞集落刺激因子水平与骨代谢生物化学指标的相关性

目的研究强直性脊柱炎患者血清非磷酸化基质γ-羧基谷氨酸蛋白(dp MGP)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)水平与骨代谢生物化学指标的相关性。方法选择信阳市中心医院2014年4月至2016年8月收治的强直性脊柱炎患者82例为观察组,另选取体检健康者54例作为对照组。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验测定2组患者血清中M-CSF、骨碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(OC)水平,采用竞争性酶联免疫吸附试验检测血清dp MGP水平,分析dp MGP、M-CSF与BALP、OC的相关性。结果观察组患者血清中dp MGP、M-CSF水平高于对照组(P<0.05);2组研究对象血清中BALP、OC水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。2组研究对象血清dp MGP水平与BALP、OC无相关性(r=-0.326、0.427,P=0.084、0.125);血清M-CSF水平与BALP、OC呈负相关(r=-0.357、-0.538,P=0.043、0.047)。结论强直性脊柱炎患者血清M-CSF水平与BALP、OC呈负相关,可通过检测M-CSF水平来判断骨代谢情况。

脑出血大鼠血肿周围脑组织含水量与基质金属蛋白酶-9、组织基质金属蛋白酶抑制剂-1及谷氨酸表达水平的关系

目的探讨脑出血大鼠血肿周围脑组织含水量与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)及谷氨酸表达水平的关系。方法雄性Wistar大鼠48只,随机分为正常对照组(n=8)、假手术组(n=8)、脑出血组(n=32),脑出血组又分为脑出血后12 h、24 h、72 h、7 d 4个亚组,每亚组8只大鼠。采用自体血尾状核注入法制备脑出血模型。采用干湿重法测定脑含水量,免疫组化法检测血肿周围脑组织MMP-9、TIMP-1及谷氨酸的表达。结果脑出血组各时间点亚组大鼠血肿周围脑组织含水量与MMP-9、TIMP-1及谷氨酸表达水平均显著高于正常对照组和假手术组(均P<0.01)。脑出血组中,72 h亚组大鼠脑组织含水量及MMP-9、TIMP-1表达水平最高(P<0.01);24 h亚组大鼠脑组织谷氨酸表达水平最高(P<0.01)。多重线性回归分析结果显示,脑组织含水量(Y)与脑组织MMP-9(X1)及谷氨酸(X3)表达水平呈直线关系,多元回归方程为Y=68.894+0.281X1-0.052X3。结论脑出血后血肿周围组织含水量及MMP-9、TIMP-1、谷氨酸的表达水平明显增高,MMP-9、谷氨酸在脑出血后血肿周围组织水肿的发生发展中具有重要作用。

谷氨酸和基质金属蛋白酶-9与脑梗死相关性研究

目的:通过观察脑梗死患者血清谷氨酸(Glu)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平的动态变化与梗死面积、神经损害的关系,从临床方面探讨二者在脑梗死发展过程中的作用。方法:对70例脑梗死患者发病第3天和第14天的血采用高效液相色谱法测定Glu,采用酶联免疫法测定MMP-9,进行不同时程和同期神经功能缺损程度、脑梗死体积进行相关分析,并与30例正常人做对照分析。结果:70例脑梗死患者发病第3天时血浆Glu、MMP-9浓度均显著高于对照组(P<0.05),CTV≥10cm3与CTV<10cm3比较差异有统计学意义(P<0.05),CSS>30与CSS≤30之间比较差异有统计学意义(P<0.05),第3天Glu、MMP-9水平呈正相关,r=0.499,P<0.001。结论:Glu和MMP-9参与脑梗死的病理过程,脑梗死急性期血浆Glu、MMP-9水平可作为判断梗死面积大小、病情轻重及预后的客观指标。

基质谷氨酸蛋白在家猪主动脉瓣间质细胞钙化中的表达

目的研究家猪主动脉瓣间质细胞（AVIC）体外钙化诱导过程中基质谷氨酸蛋白（MGP）的变化。方法处死健康成年雄性家猪6只,取下心脏,分离、培养AVIC,并进行细胞表型鉴定。取2~5代AVIC,分为在标准培养基中培养的对照组与在钙化诱导培养基（标准培养基内加入钙化诱导剂）中培养的钙化诱导组,分别采用茜素红染色及Western blot、半定量聚合酶链反应技术检测2组细胞在1、7、14 d的钙化情况及MGP在蛋白及mRNA水平的表达情况。结果对照组细胞在7、14 d出现少量钙化结节[每孔（2.38±0.97）个、（9.47±1.59）个],钙化诱导组细胞在7、14 d出现明显钙化结节[每孔（37.55±6.70）个、（78.29±9.14）个];钙化诱导组细胞在7、14 d钙化情况明显高于对照组（P〈0.05）。在7、14 d,钙化诱导组细胞内活化型MGP蛋白水平及MGP mRNA表达水平明显低于对照组（P〈0.05）。结论在钙化诱导条件下,AVIC内钙化抑制剂MGP抑制钙化能力下调。

脑出血患者治疗前后谷氨酸、基质金属蛋白酶-2及基质金属蛋白酶-9表达分析

目的探讨脑出血患者治疗前后谷氨酸、基质金属蛋白酶(MMP)-2及MMP-9表达变化及其意义。方法对住院脑出血患者60例采用颅内血肿微创清除术治疗。2组在治疗前后进行谷氨酸、MMP-2及MMP-9表达测定,同时进行预后CSS评分与疗效评价。结果本组患者痊愈35例,显著进步15例,进步7例,无变化3例,无死亡患者,有效率为95%。同时治疗后CSS评分有明显下降(P<0.05)。脑出血患者治疗后的谷氨酸、MMP-2及MMP-9表达量明显高于入院时,有显著性差异(P<0.05)。入院时与治疗后患者的谷氨酸、MMP-2及MMP-9含量与NDS评分都有明显正相关性(P均<0.05)。结论脑出血患者治疗前后谷氨酸、MMP-2及MMP-9表达变化可反应预后情况,可作为评价治疗效果的生物学指标。

出生年干支运气与肝细胞核因子-1β-血管紧张素转换酶2-基质γ羟基谷氨酸蛋白通路血清表达水平的关联性研究

目的:探讨血清肝细胞核因子-1β(Hepatocyte Nuclear Factor 1β,HNF-1β)-血管紧张素转换酶2(Angiotensin Converting Enzyme 2,ACE2)-基质γ羟基谷氨酸蛋白(Matrix Gamma Hydroxyglutamate Protein,MGP)通路与人群出生时干支运气的相关性。方法:按照随机数字表法,收集2021年1-2月体检的健康人群64例,通过酶联免疫吸附测定法检测血清中HNF-1β、ACE2、MGP浓度。结果:血清ACE2水平在男性体内低于女性,且与年龄呈负相关;出生年是丁干,火行,丑、卯、辰、巳、酉支以及阳明、太阴、太阳司天的人群的血清ACE2水平较低;出生年是戊、庚、壬干,子、申支,水行,及少阴、少阳、厥阴司天人群的血清ACE2较高(P <0.05)。出生年是水运、寅、午、酉、戌支人群血清MGP水平较高,出生年是金运、申、丑、亥支人群的血清MGP水平较低(P <0.05)。HNF-1β与MGP呈正相关,ACE2与MGP呈负相关(P <0.05)。结论:出生年干支运气会影响HNF-1β-ACE2-MGP通路的指标水平,初步揭示了运气学说的科学性。

复元胶囊对膝骨关节炎模型Ⅱ型胶原羧基端肽、基质金属蛋白酶-13的影响

目的观察复元胶囊对实验性大鼠膝骨关节炎(KOA)模型病理形态、血清Ⅱ型胶原羧基端肽(CTX-Ⅱ)及基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的影响。方法 72只雄性老年SD大鼠随机分成正常组、模型组、抗骨增生胶囊组、复元胶囊组(高、中、低剂量组),每组12只。除正常组外,其余各组采用Hulth法建立OA动物模型。造模2 w后,各实验组给予相应的药物灌胃,正常组、模型组给予等量生理盐水。灌胃后48、1、2 w分别随机选取各组4只处死,比较各组关节软骨病理变化;免疫组化法比较MMP-13水平变化;酶联免疫吸附法(ELISA)比较CTX-Ⅱ水平变化。结果实验组Mankin评分明显低于模型组(P<0.01);复元胶囊中、高剂量组MMP-13及CTX-Ⅱ较模型组表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论复元胶囊能够抑制关节软骨MMP-13及降解产物CTX-Ⅱ的表达,对防治关节软骨退变有一定的积极意义。

重组纤维连接蛋白羧基端细胞结合域对骨髓基质干细胞黏附力的影响

目的:研究增强骨髓基质干细胞黏附力的方法。方法:去细胞猪主动脉瓣叶分别用纤维连接蛋白(Fn)和重组纤维连接蛋白羧基端细胞结合域(FnCTD64)及牛血清白蛋白(BSA)浸泡预涂处理12 h,对照组未预涂蛋白。采用间隔24 h、3次种植的方法种植骨髓基质干细胞(BMSCs),于种植后第8天进行细胞计数及MTT法检测比较去细胞瓣叶上黏附、增殖的细胞数量,同时取瓣叶进行组织学检测观察瓣叶表面BMSCs覆盖情况。结果:采用预涂Fn和FnCTD64后的去细胞猪主动脉瓣叶,预涂Fn组的细胞计数为(9.085±0.622)×104,MTT的吸光值为0.537±0.022;预涂FnCTD64组的细胞计数为(9.111±0.607)×104,MTT的吸光值为0.540±0.025;预涂BSA组的细胞计数为(4.593±0.464)×104,MTT的吸光值为0.360±0.018;对照组的细胞计数为(4.460±0.441)×104,MTT的吸光值为0.353±0.019;前两组明显高于后两组(P<0.01)。预涂Fn组和FnCTD64组无显著性差异。瓣叶经H-E染色,可见预涂Fn和FnCTD64组细胞覆盖情况优于预涂BSA组和对照组。结论:Fn和FnCTD64能明显增加BMSCs在去细胞猪主动脉瓣叶表面的黏附和增殖。

血清Ⅰ型胶原羧基末端肽、基质金属蛋白-2水平与冠状动脉病变的关系

目的探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者血清Ⅰ型胶原羧基末端肽(ICTP)、基质金属蛋白-2(MMP-2)的水平变化与冠状动脉粥样硬化病变的关系。方法根据2007年ACC/AHA及2006年欧洲心脏学会(ESC)诊断标准入选178例患者,冠心病(CHD)组136例,其中急性冠脉综合征(ACS)组88例,稳定型心绞痛(SAP)组48例,另选42例冠状动脉造影阴性患者作为对照组,比较不同冠状动脉病变支数、程度、类型的ICTP和MMP-2水平。结果 ACS组、SAP组ICTP、MMP-2水平较对照组升高,ACS组较SAP组升高明显,差异有统计学意义(P<0.05)。单支、双支、三支病变组,轻度、中度、重度组,A型、B型、C型病变组与对照组ICTP浓度比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。双支、三支病变组,中度、重度组,B型、C型病变组与对照组MMP-2浓度比较,差异均有统计学意义(P<0.05),单支,轻度,A型病变组与对照组MMP-2浓度比较,无统计学差异(P>0.05)。ICTP与MMP-2呈正相关。结论冠心病Ⅰ型胶原羧基末端肽、基质金属蛋白-2活性增高是严重冠状动脉病变的相关危险因素。

血清泛素羧基末端水解酶L1、基质金属蛋白酶-9与高血压脑出血患者神经损伤及预后的关系

目的探讨泛素羧基末端水解酶L1(ubiquitin C-terminal hydrolase-L1,UCH-L1)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)与高血压性脑出血(hypertensive intracerebral hemorrhage,HICH)患者神经损伤及预后的关系。方法选取2018年10月至2021年2月皖西卫生职业学院附属医院收治的63例HICH患者为观察组,并选取同期本院健康体检者52例作为对照组。比较两组血清UCH-L1、MMP-9水平差异,并分析观察组中血清UCH-L1、MMP-9与神经损伤和预后情况的相关性。结果观察组血清UCH-L1、MMP-9水平高于对照组,且观察组中相关指标与神经功能损伤及预后情况均有密切联系(P<0.05);血清UCH-L1、MMP-9单独检测评估HICH预后的曲线下面积低于两者联合检测(P<0.05)。结论 HICH患者血清UCH-L1、MMP-9水平与神经损伤程度相关,对其早期诊断、病情及预后评估均有一定的应用价值。

7-酮基胆甾醇-9-羧基壬烷通过SREBP1c通路缓解油酸诱导HepG2细胞脂质生成（英文）

本研究目的是为了探究7-酮基胆甾醇-9-羧基壬烷(OXL-1)对油酸诱导的HepG2细胞形成的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)细胞模型中脂质生成的潜在抑制作用。油红染色显示OXL-1能显著降低油酸诱导的甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)的脂质生成。基因芯片分析发现,与对照组相比,HepG2细胞经OXL-1处理后固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP1c)、脂肪酸合酶(FAS)及乙酰辅酶a羧化酶α(ACCα)转录表达显著降低。相比较于对照组,OXL-1组甘油三脂减少56. 87%±9. 08%(P <0. 01),总胆固醇减少24. 96%±5. 45%(P <0. 01)。同时也使SREBP1c、FAS和ACCα蛋白质表达水平降低。OXL-1组相比OA组,其SREBP1c、FAS和ACCα的蛋白质表达分别下调52. 62%±6. 38%(P <0. 01)、51. 14%±8. 75%(P <0. 01)和19. 46%±3. 64%(P <0. 05)。结果说明,OXL-1可能经由SREBP1c、FAS和ACCα的转录和蛋白质水平的调控作用来阻止OA诱导的脂质蓄积。综上结果揭示,OXL-1可能在非酒精性脂肪肝病细胞模型中作为一种阻止脂质积累的新型化合物。

冠心病患者血清Ⅰ型胶原羧基末端肽的表达变化及临床意义

目的：检测冠心病患者血清中Ⅰ型胶原羧基末端肽（ICTP）的水平变化，探讨其与MMP-2、MMP-9相关性，及在冠心病中的临床意义。方法纳入2013年10月-2014年03月在我院门诊和住院的冠心病患者103例，其中稳定型心绞痛（SAP）患者39例，不稳定型心绞痛（UA）患者39例，急性心梗（AMI）患者25例，选取38名非冠心病患者为对照组（Control, C）。留取研究对象5 ml静脉血，用夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测静脉血清（基质金属蛋白-2）、MMP-9、ICTP水平，组间比较采用单因素方差分析。结果 SAP与C组比较，血清MMP-2，MMP-9，ICTP水平稍增高，P〈0.05。UA组与SAP组、C组比较血清MMP-2、MMP-9、ICTP水平升高，P〈0.05。AMI组与SAP组及C组比较，血清MMP-2、MMP-9、ICTP升高，P〈0.05。AMI组与UA组比较，血清MMP-2、MMP-9、ICTP均无显著差异，P〈0.05。ICTP与MMP-2、MMP-9都具有正相关性（P〈0.05）；与斑块纤维组成比例呈负相关，与脂质比例呈正相关（P〈0.05）。结论冠心病患者血清ICTP水平升高可提示粥样斑块的不稳定性，与MMP-2水平相关，可作为无创性的ACS的预测指标。

急性脑梗死患者血清Ⅰ型胶原羧基末端肽改变及其与颈动脉粥样硬化斑块的关系

目的:探讨急性脑梗死患者血清Ⅰ型胶原羧基末端肽(ⅠCTP)的变化情况,及其与颈动脉粥样硬化斑块的关系。方法:本研究共纳入266例急性脑梗死患者,按照颈动脉超声结果分为稳定斑块组73例,不稳定斑块组116例和无斑块组77例,另选择80例无颈动脉狭窄的老年健康体检者作为对照组。收集所有患者颈动脉超声检查结果及其他临床资料,并采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清ⅠCTP,及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9水平。结果:梗死组(无斑块组、稳定斑块组和不稳定斑块组)和对照组比较,血清ⅠCTP、MMP-2和MMP-9水平均显著升高,不稳定斑块组较稳定斑块组血清ⅠCTP、MMP-2和MMP-9均显著升高,稳定斑块组和无斑块组比较,仅血清ⅠCTP明显升高。双侧颈动脉存在粥样硬化斑块患者血清ⅠCTP,MMP-2和MMP-9水平均显著高于单侧颈动脉斑块患者。不同狭窄程度患者血清ⅠCTP、MMP-2和MMP-9水平差异具有统计学意义。结论:急性脑梗死患者血清ⅠCTP水平显著升高,且与动脉粥样硬化斑块形成及稳定性均密切相关。

FnCBD64增强骨髓基质干细胞黏附力的实验研究

目的观察预涂蛋白对细胞黏附的影响,以寻找增强细胞黏附力的有效方法。方法①取四个96孔板分为四组:Fn、FnCBD64(重组纤维连接蛋白羧基端细胞结合域)、牛血清白蛋白BSA及未预涂组,前三种蛋白分别预涂孔底,未预涂组为对照组。分八个时点,间隔30min,每孔接种骨髓基质干细胞悬液,细胞数为5×104个,MTT检测;②无菌条件下将脱细胞瓣叶圆片置入12孔板中(心室面向上)别给,分予Fn、FnCBD64、牛血清白蛋白BSA预先包埋,未预包埋作为对照组。接种细胞悬液,每只瓣叶种植细胞数为3×10个。在开始种植细胞的第8天取瓣叶进行细胞计数和MTT检测。结果各组随着时间的延长5MTT的OD吸光值增加,组内各时点比较有显著性差异。经Fn和FnCBD64预涂组其MTT的OD吸570570光值在各时点均明显高于预涂BSA和对照组。Fn组与FnCBD64组相比无显著性差异。脱细胞瓣叶进行预处理后再种植骨髓基质干细胞,经Fn和FnCBD64预处理组,其细胞计数、MTT的OD570明显高于预涂牛血清白蛋白及对照组。结论Fn和FnCBD64促进细胞的聚集、黏附及增殖,是制备组织工程瓣的有用方法。

基质γ-羧基谷氨酸蛋白与主动脉僵硬度的关系

基质γ-羧基谷氨酸蛋白（matrix gamma linolenic acid protein，MGP）是钙化的天然抑制剂，与冠状动脉钙化程度密切相关。维生素K是MGP活化的必要辅助因子，MGP的非磷酸化未羧化亚型（dp—ucMGP）反映了这种维生素的状态。研究人员从普通人群中随机抽取样本，

体外沉默ICMT基因对人唾液腺腺样囊性癌细胞侵袭和迁移的影响

目的 探讨异戊二烯基半胱氨酸羧基甲基转移酶(isoprene cysteine carboxymethyl transferase,ICMT)基因对唾液腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)细胞迁移和侵袭的影响及相关机制,为SACC的分子靶向治疗提供实验依据。方法 体外培养腺样囊性癌细胞SACC-LM和SACC-83,采用脂质体载体瞬时转染的方法,将ICMT siRNA转染至人SACC-LM和SACC-83细胞中(实验组),并分别设置空白对照组和阴性对照组(转染NC-siRNA)。通过qRT-PCR检测转染后各组细胞中ICMT和RhoA的m RNA表达并明确沉默效率;Western blot检测各组的ICMT、膜RhoA、总RhoA、Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1(Rho associations contain curly helical binding protein kinase 1,ROCK1)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)蛋白表达;通过CCK-8实验检测SACC细胞的增殖能力;通过比较细胞划痕实验的相对愈合面积和Transwell实验细胞穿膜数目,分别检测SACC细胞的迁移和侵袭能力。结果 SACC-LM和SACC-83细胞转染ICMT-siRNA后,实验组相较于空白对照组和阴性对照组,ICMT mRNA和蛋白表达显著下降(P<0.05),但RhoA mRNA和RhoA总蛋白表达均无显著性差异(P>0.05);膜RhoA、ROCK1、MMP-2、MMP-9的蛋白表达显著下降(P<0.05),细胞增殖能力明显下降(P<0.05),迁移和侵袭能力明显降低(P<0.05)。结论 体外沉默ICMT基因可有效抑制人SACC-LM和SACC-83细胞迁移及侵袭能力,其机制可能与RhoA-ROCK信号通路有关。