大肠癌患者基质分解素-1基因表达增强

目的了解大肠癌患者癌组织中基质分解素-1基因表达情况方法 50例大肠癌患者术中取癌组织及正常组织;提取组织总RNA;用共扩增逆转录定量 PCR 方法测定基质分解素-1基因表达水平.结果大肠癌组织基质分解素-1(MMP_3)的基因表达水平(1.96±0.44)明显高于正常大肠组织(0.43±0.12);(P<0.001).伴有局部淋巴结转移者组织基质分解素-1基因表达水平(3.32±0.62)明显高于无局部淋巴转移者(1.66±0.40)(P<0.01).结论基质分解素-1在大肠癌的浸润、转移中可能起重要作用.

白介素-1和血小板源性生长因子对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-3表达的影响

目的 :观察白介素 -1(IL -1)和血小板源性生长因子 (PDGF)对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶 -3 (MMP -3 )表达的影响。方法 :用Western蛋白印迹法 (Westernblot)检测MMP -3蛋白水平 ,采用电泳迁移率变动分析 (EMSA)法测AP -1结合活性 ,用RT -PCR法检测MMP -3的mRNA水平。结果 :白介素 -1(2 0 μg/L)和PDGF(2 0μg/L)联合使用显著增加MMP -3蛋白表达 ,提高AP -1结合活性 ,使MMP -3的mRNA水平明显增高。 结论 :白介素 -1和血小板源性生长因子联合使用可刺激MMP

胃癌组织中基质分解素-1基因表达的研究

目的 了解基质分解素-1(MMP_3)基因在胃癌组织的表达水平。方法 43例胃癌患者胃镜下取癌组织及正常胃粘膜,提取组织总RNA,用逆转录共扩增定量PCR方法测定MMP_3基因表达水平。结果 胃癌组织MMP_3,基因表达水平(2.02±0.34)明显高于正常胃粘膜组织(0.63±0.10,P<0.01),局部淋巴结受累者MMP_3基因表达水平(2.46±0.39)明显高于局部淋巴结未受累者(1.60±0.30,P<0.01)。结论 基质分解素-1在胃癌的浸润、转移中可能起重要作用。

基质溶解素和肿瘤的关系

基质溶解素是基质金属蛋白酶的一种 ,其基因表达受转录因子AP 1和Ets的调控 ,其对细胞外基质和基底膜的溶解 ,为肿瘤细胞的浸润和转移以及肿瘤的血管生成提供了空间和细胞因子 ,从而从多方面促进了肿瘤的扩散和转移。

半乳糖凝集素3抑制剂对大鼠椎间盘软骨终板细胞基质金属蛋白酶-3、趋化因子(C-C基元)配体3及聚蛋白多糖表达的影响

目的探讨半乳糖凝集素3对大鼠椎间盘软骨终板细胞基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、趋化因子(C-C基元)配体3(CCL3)、聚蛋白多糖表达的影响。方法将P2代大鼠软骨终板细胞分为2组,一组加入含25μmol/L GB1107半乳糖凝集素3抑制剂(抑制剂组),另一组加入等体积空白溶剂(对照组),采用MTT法检测2组12 h、24 h及48 h细胞的增殖情况;于加入溶剂后24 h收集2组细胞,采用实时荧光定量PCR法检测细胞中MMP-3、CCL3及聚蛋白多糖的mRNA表达水平,采用蛋白质印迹法检测细胞中MMP-3、CCL3及聚蛋白多糖的蛋白表达水平。结果抑制剂组大鼠软骨终板细胞的细胞增殖活性加入抑制剂后12 h开始随时间延长不断降低,加入抑制剂后12 h、24 h、48 h各时间点的细胞增殖活性均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。抑制剂组大鼠软骨终板细胞中MMP-3、CCL3及聚蛋白多糖的mRNA和蛋白表达水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抑制半乳糖凝集素3可降低大鼠终板细胞中MMP-3、CCL3及聚蛋白多糖的表达,提示半乳糖凝集素3可能通过调节细胞外基质的降解、炎性细胞浸润和合成代谢共同影响椎间盘退行性变进程。

白细胞介素6对人冠状动脉平滑肌细胞基质金属蛋白酶系统分泌平衡的影响

目的:研究表明,白细胞介素6等多种炎症因子与急性冠状动脉综合征斑块的稳定性下降有着密切联系;金属蛋白酶组织抑制因子的分泌失衡,也可能是斑块稳定性的原因之一。实验拟证明白细胞介素6对人冠状动脉平滑肌细胞的基质金属蛋白酶3及金属蛋白酶组织抑制因子1分泌平衡的影响。方法:实验于2006-12/2007-04在解放军第三○五医院老年病中心实验室完成。①实验材料:人冠状动脉平滑肌细胞(Casecade公司);白细胞介素6(PeProtech公司)。②实验过程:培养人冠状动脉平滑肌细胞,传代至5～7代。一期:分别加入0和10μg/L白细胞介素6(0μg/L为对照组)刺激人冠状动脉平滑肌细胞,分别孵育2,4,8,24,36h,收集细胞培养液上清。二期:分别采用0,5,10,50μg/L白细胞介素6刺激人冠状动脉平滑肌细胞(0μg/L为对照组),6h后收集细胞培养液上清。③实验评估:应用酶联接免疫吸附剂测定方法检测细胞培养液上清内基质金属蛋白酶3、金属蛋白酶组织抑制因子1的表达量。结果:①加入白细胞介素6后,基质金属蛋白酶3、金属蛋白酶组织抑制因子1的表达量在2h时开始增加,并随时间的延长而不断增加;随着白细胞介素6剂量的增加,表达量均不断增加。②基质金属蛋白酶3/金属蛋白酶组织抑制因子1在2h开始升高,8h达到顶峰,而后缓慢下降,与对照组比较,P均<0.05;随着白细胞介素6剂量的增加,表达量均不断升高,10μg/L和50μg/L组与对照组比较,P<0.05。结论:白细胞介素6可使人冠状动脉平滑肌细胞分泌不稳定斑块标记物--基质金属蛋白酶3、金属蛋白酶组织抑制因子1及基质金属蛋白酶3/金属蛋白酶组织抑制因子1增加,且呈剂量和时间依赖效应,说明炎症可能是急性冠状动脉综合征发生发展的机制之一。

缺血再灌注后关节软骨中金属基质蛋白酶-3/组织抑制剂-1比例变化与关节软骨损伤的关系

目的探讨缺血再灌注后关节软骨中金属基质蛋白酶-3/组织抑制剂-1(MMP-3/TIMP-1)比例变化与软骨破坏、关节功能障碍的因素。方法采用大鼠后肢股动脉夹闭的方法模拟缺血再灌注的动物模型,用Wistar大鼠40只,随机分成正常对照组(NG)、肢体单纯缺血组(IG)和缺血再灌注组(IR)。运用免疫组化技术,分别测定TIMP-1和MMP-3在关节软骨中不同时相的表达变化并进行半定量分析,观察关节软骨病理改变及蛋白多糖(PG)的变化。结果缺血再灌注后,关节软骨中的MMP-3和TIMP-1表达均有增加,但MMP-3增加的幅度大于TIMP,导致MMP-3/TIMP-1比值增大,与再灌注后引起的关节软骨损伤相关。结论MMP/TIMP的失平衡表达是导致缺血再灌注后关节软骨损伤的重要因素。

冠状动脉支架置入术后患者基质金属蛋白酶变化对再狭窄的影响

目的探讨急性冠状动脉综合征患者支架置入术后基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-9及基质金属蛋白组织抑制剂(TIMP-1)水平变化及其对术后再狭窄的影响。方法选择急性冠状动脉综合征患者255例(治疗组)支架置入术前、术后即刻、术后8、48 h和术后1周的股动脉血标本,采用ELISA法检测标本中MMP-3、MMP-9和TIMI-1水平;其中99例患者随访5～9个月后行冠状动脉造影术,根据冠状动脉造影术结果分为再狭窄患者20例,非再狭窄患者79例;另选同期行冠状动脉造影术结果完全正常者50例为对照组。结果与对照组比较,治疗组患者术前MMP-3和MMP-9水平升高(P<0.01),而TIMP-1水平差异无统计学意义。与术前比较,治疗组患者MMP-3和MMP-9水平明显升高,48 h达高峰,1周时仍明显升高,TIMP-1水平也具有类似的变化,但升高时间延迟。与非再狭窄患者比较,再狭窄患者随访时MMP-3和MMP-9均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MMP-3和MMP-9水平升高参与急性冠状动脉综合征患者支架置入术后的病理生理过程,并可能是术后再狭窄的预测因素。

类风湿关节炎治疗前后血清基质金属蛋白酶-3的变化

目的:检测活动期类风温关节炎(RA)患者治疗前后血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)水平,探讨MMP-3在RA中的作用,为RA的疗效判断寻找新的指标。方法:分别检测45例RA患者和20例健康体检者血清MMP-3水平。MMP-3检测采用酶联免疫吸附法(ELISA)。结果:治疗前活动期RA患者血清MMP-3水平为(372.34±198.24)ng/mL,显著高于正常对照组的(27.46±16.83)ng/mL(P<0.001)。治疗前活动期RA患者血清MMP-3水平与DAS评分呈正相关关系(r=0.526,P<0.05)。治疗后MMP-3水平下降,其中病情缓解者下降差异有显著性[(361.27±193.83)ng/mLvs(192.52±107.33)ng/mL,P<0.05];进一步的相关分析显示,治疗后MMP-3的降低水平与DAS评分下降值亦呈正相关关系(r=0.493,P<0.05)。结论:RA患者血清MMP-3水平显著升高,可作为疾病活动性指标之一,并可作为了解RA治疗效果和预后评估的重要手段。

基质金属蛋白酶-3在评价Etanercept治疗强直性脊柱炎疗效中的价值

目的:通过检测强直性脊柱炎(AS)患者血清和关节液,以及Etanercept治疗前后基质金属蛋白酶-3(MMP-3)浓度的变化,分析与AS疾病活动的相关性,探讨MMP-3在评价肿瘤坏死因子抑制剂治疗强直性脊柱炎疗效中的价值。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA),检测48例AS患者在Etanercept治疗前0周,治疗后6周、12周的血清MMP-3浓度,同时对比检测30例健康志愿者外周血清标本和10例AS患者膝关节液中MMP-3水平。结果:48例AS患者血清MMP-3表达水平均明显高于正常对照组,AS患者膝关节液中MMP-3浓度也显著高于其血清中的浓度。有外周关节炎组AS患者的血清MMP-3浓度明显高于无关节炎组(P<0.001),而红细胞沉降率(ESR)与C反应蛋白(CRP)在两组比较中差异无统计学意义。AS患者在Etanercept治疗后第6周、第12周,血清MMP-3的表达水平明显下降(P<0.01),ESR和CRP,以及评价AS疾病的活动指数(BASDAI)和功能指数(BASFI),也均有下降趋势,并有统计学意义(均P<0.01)。在Etanercept治疗前(0周),血清MMP-3浓度与ESR、CRP、BASDAI、BASFI之间均具有显著相关性(P<0.05),ESR与CRP、BASFI亦有相关性,但与BASDAI的相关性无统计学意义(r=0.361,P=0.071)。在治疗12周后,血清MMP-3浓度仍与ESR、CRP、BASDAI呈很好的相关性(P<0.05),但与BASFI的相关性无统计学意义(P=0.339);ESR与CRP之间具有显著相关性,但与BASDAI、BASFI无统计学意义。BASDAI与BASFI有显著相关性(r=0.818,P=0.001)。结论:MMP-3可以作为评价AS患者病情活动性的客观指标,并且有可能比常规评价指标如ESR和CRP具有更强相关性。MMP-3也可以检测Etanercept治疗AS患者后的疗效,有可能成为客观评价昂贵生物制剂疗效的指标之一。

基质金属蛋白酶3在创伤愈合中作用的实验研究

目的探讨基质金属蛋白酶3(MMP3)在创伤愈合过程中的变化及其意义。方法采用本研究前期建立的方法分离大鼠皮肤伤后伤口液和真皮多能干细胞。取伤后1天伤口液作为创伤修复启动微环境刺激真皮多能干细胞,24h后通过免疫组化方法检测MMP3表达水平的变化。同时制作单纯创伤和难愈创伤动物模型,观察伤口局部炎性细胞浸润、肉芽组织形成、成纤维细胞数量、表皮再上皮化程度等创伤愈合过程变化,并通过免疫组化和图像分析方法观察伤后不同时相(3、5、7、10、14天)伤口组织MMP3含量变化。结果创伤早期伤口液作用后,真皮多能干细胞MMP3表达显著增加。正常大鼠皮肤组织可见一定量的MMP3表达,阳性细胞主要为表皮细胞、毛囊外根鞘细胞、真皮成纤维细胞、血管内皮细胞等。单纯创伤大鼠伤后各时相点MMP3表达均显著增加,尤以真皮组织为著,其峰值在伤后5～7天。难愈创伤组大鼠伤后各时相点MMP3含量亦显著增加,但其表达峰值延迟,为伤后10天,且伤后3、5、7天真皮组织的表达水平显著低于单纯创伤组。结论MMP3是一种重要的创伤愈合调节分子;高表达MMP3可能是真皮多能干细胞参与创伤修复的途径之一。

强直性脊柱炎患者血清基质金属蛋白酶-3水平及意义

目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的水平及意义,为临床治疗、判断预后提供新的理论依据。方法采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定175例AS患者(就诊前6个月内未用过慢作用药及糖皮质激素)和95名健康对照者血清MMP-3的水平,同时测定其治疗前的其他实验室指标:红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、骶髂关节X线。分析它们与MMP-3的相关性。结果 AS患者血清MMP-3水平[(226±169)ng/ml]明显高于健康对照组[(53±21)ng/ml],P<0.05;不同临床特点AS患者血清MMP-3水平差异无统计学意义(P>0.05);MMP-3水平与AS患者的ESR、C反应蛋白(CRP)、患者血清CRP、BASDAI评分、白细胞介素6(IL-6)、TNF-α呈正相关(P<0.05);而与发病年龄、病程、晨僵时间、X线分级无明显关系(P>0.05)。结论 MMP-3在AS患者血清中高水平存在。它既能够反映AS关节骨质破坏,又能更好地反映疾病活动程度,可作为除ESR、CRP外提示AS疾病进展与改善的血清学指标。

基质金属蛋白酶-3基因多态性与胃癌新辅助化疗疗效的关系

目的探讨基质金属蛋白酶(MMP)-3基因多态性与胃癌新辅助化疗疗效的关系及其作用机制。方法 MMP-3基因型检测采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析。结果携带5A/5A基因型的10例胃癌患者均化疗无效,而在有效患者中只有1例携带该基因型,其分布在无效组(9.3%)和有效组(1.4%)中差异有统计学意义(P=0.03)。其OR值有统计学意义(OR=8.24,95%CI=1.03～177,P=0.022)。另外,5A/5A+5A/6A基因型频率在无效组和有效组中分布差异无统计学意义(χ2=2.13,P=0.14)。结论胃癌患者各MMP-3基因型的新辅助化疗的有效率不同,5A/5A基因型的胃癌患者新辅助化疗有效率明显低于5A/6A组和6A/6A组,MMP-3单核苷酸多态性可能对胃癌新辅助化疗患者的筛选有潜在的应用前景。

基质金属蛋白酶-3与细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在乳腺癌演变过程中的表达及意义

目的:检测基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)在乳腺癌演变过程中的表达并探讨其意义。方法:应用免疫组化二步法,检测58例乳腺癌、28例非典型导管增生、40例普通导管增生及20例正常乳腺组织中MMP-3和EMMPRIN蛋白的表达,并采用原位杂交法检测各种病变及正常乳腺组织各20例中MMP-3mRNA、EMMPRIN mRNA的表达。结果:MMP-3、EMMPRIN及MMP-3mRNA、EMMPRIN mRNA在乳腺癌组织(16.98±1.47,20.42±1.54,12.88±1.34,12.30±1.25)和非典型导管增生组织(19.05±1.38,17.38±1.69,13.18±1.34,13.49±1.25)中的IOD值较普通导管增生组织(10.96±1.20,10.23±1.09,10.47±1.12,10.23±1.09)及正常乳腺组织(10.36±1.05,10.22±1.20,10.47±1.14,10.21±1.06)高(P<0.01)。MMP-3、EMMPRIN和MMP-3 mRNA、EMMPRIN mRNA在乳腺癌和非典型导管增生组织中的表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。EMMPRIN蛋白在乳腺癌伴腋下淋巴结转移组的表达高于无淋巴结转移组(t=2.55,P<0.05)。结论:MMP-3、EMMPRIN过表达在非典型导管增生向乳腺癌转变的过程中可能起重要作用。EMMPRIN高表达的乳腺癌患者更易发生腋下淋巴结转移。

系统性红斑狼疮患者外周血基质金属蛋白酶-3检测及其临床意义

目的 :研究基质金属蛋白酶_3(MMP_3)在系统性红斑狼疮 (SLE)中的作用和意义。方法 :采用ELISA方法检测正常人、系统性红斑狼疮活动期与非活动期患者血浆中MMP_3的水平。结果 :系统性红斑狼疮活动期患者血浆中 ,MMP_3水平显著高于非活动期和正常对照组 (P<0.05) ;系统性红斑狼疮活动期患者中 ,出现临床肾损害和神经精神症状的患者血浆MMP_3水平分别明显高于无上述临床症状者 (P<0.01) ;而出现颊部红斑和 (或 )光敏感以及多发性关节炎的患者 ,与无上述症状的患者血浆中MMP_3水平比较均无显著性差异 (P>0.05) ;抗dsDNA抗体阳性、低补体C3血症、低白蛋白血症、高IgG血症以及血肌酐升高的患者血浆中MMP_3水平分别显著高于无上述症状者 (P<0.05)。结论 :在系统性红斑狼疮患者外周血中MMP_3呈高水平表达 ,与疾病活动性密切相关 。

基质金属蛋白酶3与动脉粥样硬化关系研究的进展

本文概述了基质金属蛋白酶3与动脉粥样硬化之间的关系,并重点介绍了基质金属蛋白酶家族及其来源,基质金属蛋白酶分类、结构、调节、共同特征,以及基质金属蛋白酶-3在动脉粥样硬化中的表达及作用。

C57黑鼠骨关节炎模型的关节病理积分与血清及滑膜中基质金属蛋白酶-3白细胞介素-1水平的相关性研究

目的探讨基质金属蛋白酶（MMP）-3与白细胞介素（IL）-1在骨关节炎（OA）发病中所起的作用及其用于临床判断OA早期病理变化的可能性。方法采用C57黑鼠OA模型。在自然增龄基础上，又对小鼠进行运动负荷训练。应用形态学方法对模型关节的病理切片观察，进行OA积分评分。研究采用酶联免疫吸附试验（ELISA）的方法，检测血清及滑膜中MMP-3、IL-1的水平。采用相关性分析来检验血清和滑膜中MMP-3、IL-1水平之间的关系，以及与OA积分评分之间的相关性。结果①形态学观察：C57黑鼠具有自发OA特征，其OA严重程度与周龄相关，且运动负荷可加快有自发OA倾向的小鼠关节软骨病理改变。②ELISA检测：运动负荷组滑膜中MMP-3[（84±6）ng／ml]、IL-1[（48±3）ng／ml]及血清中IL-1[（38．3±5．0mg／m1]含量高于自然增龄组[滑膜MMP-3（71±5）ng／ml；IL-1（42±3）ng／ml；血清IL-1（8．1±2．4）ng／m1]，差异有统计学意义（P〈0．01）；血清与滑膜中MMP-3、IL-1水平、OA评分存在线性相关[r均〉0．67，P均〈0．01]。结论联合检测MMP-3及IL-1在OA血清中的含量，有助于疾病的诊断与病情的判断。特别是MMP-3对于OA的早期诊断具有更为重要的意义。

MMP-9/TIMP-1在胎膜早破孕妇胎膜组织中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶 (matrixmetalloproteinases ,MMP 9)及基质金属蛋白酶抑制剂 (tissueinhibitormatrixmetalloproteinases,TIMP 1)在胎膜早破患者胎膜组织中的表达及意义。方法随机选择胎膜早破孕妇 37例 ,包括 :Ⅰ组为足月胎膜早破 2 2例 ,Ⅱ组为未足月胎膜早破患者 15例。Ⅲ组为正常足月孕妇 2 5例作为对照组。采用免疫组化染色法测定胎膜组织中MMP 9及TIMP 1的水平。结果胎膜早破患者胎膜组织中MMP 9的水平明显高于正常对照组 ,具有显著性差异 (P<0 .0 1) ;胎膜早破患者胎膜组织中TIMP 1的水平与正常对照组相比 ,无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;胎膜早破患者MMP 9/TIMP 1的比值与正常对照组相比 ,有明显差异 (P >0 .0 5 )。结论MMP 9在感染引起的胎膜早破中起关键性作用 ,MMP 9/TIMP

TIMP-3质粒脂质复合体防止移植物慢性排斥反应的实验研究

目的防止移植物慢性排斥反应(CR),提高移植物存活时间,通过对CR模型转染TIMP3质粒,探讨其防止CR发生的作用。方法Wistar大鼠120只,5D系大鼠60只,分成A、B、C3组,A、B组为异系(SD Wistar)移植组,C组为同系(Wistar Wistar)移植组。对原位大鼠腹主动脉移植模型不同时点,通过形态学观察、免疫组织化学SP染色法测定移植段腹主动脉内MMP2、TIMP2,3及Fas的表达,TUNEL法测定凋亡指数(AI),Northern杂交定量分析MMP2表达,酶图分析术后MMP2的活性,判断TIMP3质粒在防止CR的作用。结果①移植段腹主动脉内膜厚度增生程度由强到弱依次为A、B、C组。②同系移植组MMP2较低,MMP2、TIMP2峰值均出现于术后第4w;B组MMP2表达显著增加,峰值出现于术后第2周;A组与术后1、2wTIMP3表达(1.7±1.1和0.9±0.4)较B、C组明显增强(P<0.05)。③A组术后2w时内膜和中膜出现较多Fas染色阳性细胞(2.7±0.8和1.8±0.9),与B组及C组比较,均有显著差异(P<0.05),同期A组内膜层的凋亡指数(AI)值为14.9%±6.8%,与B、C组比较也有显著差异(P<0.05)。结论CR发生的早期阶段导入外源性TIMP3基因,既可干预MMPS/TIMPS间的平衡,抑制MMPS对基质的降解,阻碍SMC向内膜层迁移,又促进了增殖的内膜层细胞凋亡,可能是减缓CR发生的有效途径。

MMP-3启动子区域5A/6A基因多态性在急性心肌梗死中的作用

目的探讨MMP-3启动子区域5A/6A基因多态性是否参与急性心肌梗死发生发展的过程。方法顺序入选同期住院患者416例,随机分为急性心肌梗死组(218例)和对照组(198例),PCR检测MMP-3基因多态性,ELISA检测MMP-3含量。结果急性心肌梗死组携带MMP-3启动子区域突变型基因(5A/5A+5A/6A)患者比例高于对照组(39.91%vs 24.75%,P<0.01),MMP-3 5A等位基因频率也高于对照组(21.56%vs 13.64%,P<0.01);MMP-3血清含量也明显高于对照组[(13.15±2.16)μg/L vs(7.06±1.98)μg/L,P<0.01]。结论携带MMP-3 5A等位基因患者更易引起局部动脉粥样硬化斑块的破裂,从而导致急性心肌梗死的发生。