绿原酸通过基因编码基质相互作用分子/钙释放激活钙调节蛋白通路改善糖尿病小鼠动脉粥样硬化的机制

目的探讨绿原酸(CGA)通过基因编码基质相互作用分子1(Stim1)/钙释放激活钙调节蛋白1(Orai1)通路改善糖尿病小鼠动脉粥样硬化(AS)的机制。方法将30只C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组、模型组、CGA组,每组各10只。采用高脂饲料饲养加腹腔注射50 mg/kg的链脲佐霉素(STZ)建立糖尿病AS小鼠模型,对照组采用普通饲料+等量生理盐水,CGA组建立模型后给予CGA干预,模型组给予等量生理盐水。HE染色、油红O染色观察动脉斑块情况;CCK-8检测主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖活力;qPCR检测Stim1、Orai1表达水平。结果CGA组、模型组的斑块沉积面积大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而CGA组的斑块沉积面积小于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组、CGA组的VSMCs增殖率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而CGA组的VSMCs增殖率低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组、CGA组的Stim1、Orai1水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而CGA组的Stim1、Orai1水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CGA能够改善糖尿病AS及VSMCs增殖,其机制可能与调节Stim1/Orai1通路有关。

基质相互作用分子1/钙通道蛋白1在哮喘气道高反应性中的上皮表达和作用

目的 探讨基质相互作用分子1(STIM1)/钙通道蛋白1(Orail)在哮喘气道高反应性(AHR)中的上皮表达和作用。方法 将小鼠分为对照组、鸡卵清蛋白(OVA)组和OVA+sh-STIM1组,每组12只。除对照组外,其余组建立OVA诱导的小鼠急性哮喘模型。OVA+sh-STIM1组通过鼻内给予sh-STIM1进行干预。通过免疫荧光染色检查肺组织中STIM1表达。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子水平。分析在人气道平滑肌细胞(HASMC)中,STIM1敲低对气道平滑肌(ASM)细胞的收缩力和钙离子(Ca2+)流入的影响。结果 STIM1主要在支气管上皮中表达,鼻内给予sh-STIM1可减轻小鼠的AHR和炎症。体外实验中,STIM1敲低通过阻断Oria1介导钙库操纵的钙内流来抑制HASMC细胞收缩。结论 上皮细胞中STIM1调节气道平滑肌收缩和AHR,其作用机制与激活Oria1介导的钙内流有关。

基质相互作用分子1基因敲除抑制血管平滑肌细胞增殖

目的探讨基质相互作用分子1（STIM1）基因敲除对血管平滑肌细胞内钙浓度和细胞增殖的调控作用。方法原代培养血管平滑肌细胞，用构建好的大鼠STIM1干扰腺病毒载体（Ad—si／rSTIMl）和人重组STIM1腺病毒载体（Ad-hSTIM1）进行转染，Western blot检测细胞STIM1表达，^3H胸腺嘧啶核苷（^3H—TdR）掺入法和细胞计数测定细胞增殖，激光共聚焦检测细胞内钙变化。结果Ad—si／rSTIM1转染后48h后细胞STIM1表达与转染对照腺病毒载体比较明显降低（P〈0．05），细胞内钙浓度也明显下降（P〈0．05），细胞增殖被显著抑制（P〈0．05）；Ad—hSTIM1共转染后48h细胞STIM1表达恢复到正常水平；细胞内钙浓度和细胞增殖恢复到正常水平。结论STIM1调节血管平滑肌细胞内钙浓度，并进而参与对血管平滑肌细胞增殖的调控。

基质相互作用分子1在红藻氨酸致癫大鼠的表达及依达拉奉的干预作用

目的观察基质相互作用分子(STIM)1在红藻氨酸(KA)致癫大鼠的表达及依达拉奉的干预作用。方法 50只雄性Wistar大鼠被随机分为5组,每组10只。正常组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、癫痫组,治疗组1(地西泮治疗组),治疗组2(地西泮+依达拉奉治疗组)。癫痫组在大鼠右侧海马以每公斤体重注射1.5μg/μl KA,PBS组采取同样的方法在相同部位注入等量PBS,治疗组1在癫痫模型成立后给予10 mg/kg地西泮终止癫痫,治疗组2在治疗组1的基础上1 h后再给予依达拉奉30 mg,12 h一次,正常组不注射任何药物。结果用激光共聚焦显微镜观察,癫痫组STIM1的表达密度显著高于PBS组及正常组(P<0.05),治疗组较正常组、PBS组及癫痫组表达增高(P<0.05)。治疗组1较治疗组2表达增高(P<0.05)。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酯胺凝胶(SDS-PAGE)分析显示STIM1的相对分子质量分别46 k D,并且发现其在癫痫组的表达较正常组及PBS组增加,治疗组较癫痫组相比降低,所得结果与激光共聚焦的结果相一致(P<0.05)。结论 STIM1表达增加对大鼠癫痫后海马的神经元损伤具有细胞保护作用。

活血通窍汤辅助治疗对动脉瘤性蛛网膜下腔出血并发脑血管痉挛临床疗效及对血清基质金属蛋白酶-9同型半胱氨酸和可溶性细胞间黏附分子-1水平的影响

目的分析活血通窍汤辅助治疗对动脉瘤性蛛网膜下腔出血(SAH)并发脑血管痉挛(CVS)挛患者临床疗效及对血清基质金属蛋白酶(MMP)-9、同型半胱氨酸(Hcy)和人可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)的影响。方法选择浙江省义乌市中心医院2021年4月至2022年4月收治的SAH并发CVS患者78例,运用随机数字表法分为对照组(39例)与治疗组(39例)。对照组给予盐酸法舒地尔注射液治疗,治疗组在对照组基础上服用活血通络汤。2组均治疗2周。比较2组治疗疗效,治疗前后中医证候积分、血流动力学、神经功能和认知功能、MMP-9、Hcy和sICAM-1水平变化。结果治疗组总有效率高于对照组(P<0.05)。2组治疗后患者头痛、恶心呕吐和颈项抵抗积分较治疗前降低(P<0.05),治疗组低于对照组(P<0.05)。2组治疗后颈内动脉颅外段平均注速(VICA-Vm)和大脑中动脉平均注速(MCA-Vm)较治疗前降低(P<0.05),治疗组治疗后低于对照组(P<0.05)。2组治疗后mRS评分较治疗前降低,MoCA评分较治疗前升高(P<0.05);治疗组治疗后改良Rankin量表(mRS)评分低于对照组,蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分高于对照组(P<0.05)。2组治疗后MMP-9、Hcy和sICAM-1水平较治疗前降低(P<0.05);治疗组治疗后MMP-9、Hcy和sICAM-1水平低于对照组(P<0.05)。结论活血通窍汤辅助治疗SAH并发CVS患者疗效良好,患者血流动力学改善,神经功能改善,可降低MMP-9、Hcy和sICAM-1水平。

上皮-基质相互作用1基因在肿瘤及免疫系统疾病中的研究进展

近年来,肿瘤发病率和病死率持续升高,已成为威胁中国居民生命健康的重要公共卫生问题。早发现、早诊断和早治疗是提高肿瘤患者生存率的关键。目前关于上皮-基质相互作用1(EPSTI1)基因的研究备受关注,其可在多种肿瘤及免疫系统疾病中异常表达,参与调节多种生物学功能,与肿瘤和免疫相关疾病的发生发展及预后相关。本文对EPSTI1在肿瘤及免疫系统疾病中的研究进展进行综述,旨在寻找潜在的治疗靶点和预后标志物,从而为临床诊断、治疗提供新思路。

妇炎舒胶囊治疗湿热瘀结型慢性盆腔炎的临床效果及对炎症因子、细胞间黏附分子-1、基质金属蛋白酶-2的影响

目的探讨妇炎舒胶囊治疗湿热瘀结型慢性盆腔炎的临床效果及对炎症因子、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的影响。方法选取永州市中心医院2021年3月至2024年2月收治的100例湿热瘀结型慢性盆腔炎患者作为研究对象,按照随机数字表法分为西医组(n=50)与中西医组(n=50)。西医组予以左氧氟沙星治疗,中西医组予以左氧氟沙星联合妇炎舒胶囊治疗。比较两组中医证候积分、炎症因子水平、ICAM-1与MMP-2水平、临床疗效及不良反应发生情况。结果治疗后,中西医组主证、次证评分低于西医组(P<0.05)。中西医组白介素-6、白介素-26、肿瘤坏死因子-α水平低于西医组(P<0.05)。中西医组ICAM-1水平低于西医组,MMP-2水平高于西医组(P<0.05)。中西医组临床总有效率高于西医组(P<0.05)。两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论妇炎舒胶囊治疗湿热瘀结型慢性盆腔炎的临床效果较好,可减轻症状及炎症反应,改善ICAM-1与MMP-2水平,且不增加不良反应,值得推行。

基质相互作用分子1特点及其在纤维化疾病发生发展中的作用机制研究进展

纤维化是感染、炎症以及免疫反应等多种致病因素长期或反复刺激引起器官组织损伤,且损伤部位纤维结缔组织异常增多、实质细胞坏死减少的一种病理状态,其主要特征是成纤维细胞和上皮细胞等过度增殖、活化、分化或转分化为肌成纤维细胞,细胞外基质反复破坏、修复、重建和病理性沉积,若持续进展可导致器官结构破坏和功能障碍。基质相互作用分子1(STIM1)是一种位于内质网膜或肌浆网膜上的单程跨膜蛋白,充当Ca^(2+)浓度感受器,通过调节钙池调控Ca^(2+)内流通道的开放与关闭,影响细胞内外的Ca^(2+)平衡,参与细胞分泌、增殖、分化、凋亡和基因转录等多种生理功能。STIM1通过Ca^(2+)和多种信号通路介导成纤维细胞增殖分化、细胞凋亡、内质网应激和间充质细胞转分化,对心肌纤维化、肺纤维化、肾纤维化等纤维化疾病的发生发展都有着重要的调控作用,有望成为治疗纤维化疾病新的作用靶标。

基质相互作用分子1的结构和功能及其在疾病中的作用研究进展

基质相互作用分子1(STIM1)为细胞内钙库的钙离子浓度感受器,主要以二聚体形式散在分布于内质网膜上,表达于神经细胞、骨骼肌细胞、心肌细胞、上皮细胞、内皮细胞和免疫细胞等各类细胞中。其功能主要是调控钙池操纵钙内流通道的开放与关闭,影响第二信使钙离子的浓度变化,进而调控细胞的分泌、增殖、基因转录、分化、凋亡、迁移和黏附等一系列的细胞生理功能。现在越来越多的研究表明,STIM1不仅与肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭及转移等恶性行为存在着关联,还是启动机体免疫细胞的开关,同时在心脑血管疾病、重要器官损伤中扮演着重要角色。本文结合STIM1结构特点、作用机制和功能研究,阐述其与肿瘤、免疫系统疾病和心脑血管疾病等多种疾病的关系,以期为相关疾病的防治提供参考。

基质相互作用蛋白分子1在肿瘤发生发展和临床应用中的研究进展

基质相互作用蛋白分子1(STIM1)与肿瘤的发生发展密切相关,其参与多种癌症细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭的调节过程。阻断或敲除STIM1可以显著抑制癌细胞的增殖和迁移。阐明STIM1在癌症细胞中的调节机制,将有助于新的治疗靶点的确定。本文对STIM1分子在不同肿瘤中的作用机制及临床应用前景作一综述。

不同分子亚型乳腺癌患者基质相互作用分子1表达水平的研究

目的检测不同分子亚型无淋巴结转移的乳腺癌组织中stim1表达水平变化,探讨其在乳腺癌中的作用.方法选择肿瘤生物样本库中保存的无淋巴结转移的三阴性、Her-2阳性、LuminalA型、LuminalB型乳腺癌组织各5例.Westernblot检测不同分子亚型乳腺癌组织中stim1的表达水平.纳入肿瘤的最大直径、分子亚型、病理分期和stim1蛋白表达量为变量,分析这4个变量对患者总生存(OS)和无复发生存(RFS)的影响.结果在四种不同亚型的乳腺癌组织中,stim1蛋白表达水平在三阴性乳腺癌中最高,其次为Her-2阳性,LuminalA型最弱.与三阴性和Her-2阳性乳腺癌组织相比,LuminalA型和LuminalB型乳腺癌组织stim1蛋白的表达水平均显著降低(P<0.01).不同分子亚型乳腺癌组织中肿瘤的最大直径、病理分期和stim1蛋白表达量与患者总生存和无复发生存均无相关性,各指标差异无统计学意义(P>0.05),可能与样本数少有关.结论Stim1的表达水平与乳腺癌恶性程度有关.

血清基质相互作用分子1水平变化与原发性高血压患者左心室肥厚的关联性分析

目的:探究血清基质相互作用分子1(STIM1)水平变化与原发性高血压患者左心室肥厚的关联性。方法:选取2019年1月-2020年2月我院原发性高血压患者86例为观察组,同期选取48例健康体检者为对照组。对比两组室间隔厚度(IVST)、左室后壁厚度(LVPWT)、左室质量指数(LVMI)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TB)、尿酸(UA)及血清STIM1水平,分析STIM1与上述指标的相关性,并对比观察组伴及不伴左心室肥厚患者血清STIM1水平。结果:观察组TG、ALT、AST、TB、UA、LVPWT、IVST、LVMI高于对照组(P<0.05);观察组血清STIM1水平高于对照组(P<0.05);观察组STIM1与LVMI呈正相关(P<0.05);观察组伴左心室肥厚者血清STIM1水平高于不伴左心室肥厚者(P<0.05)。结论:原发性高血压患者血清STIM1水平异常升高,且与左心室肥厚有关,有望成为新的治疗靶点。

基质衍生因子-1与急性白血病细胞的相互作用

基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)是一种由骨髓基质细胞释放的趋化因子,是趋化因子CXC亚家族的成员之一。近年的研究表明,SDF-1不仅与正常机体造血功能的维持及造血干/祖细胞的回髓定位和植入有密切的关系,同时与各种白血病细胞的移动和功能之间也存在着复杂的相互作用。本文重点就SDF-1与急性白血病细胞之间的相互作用的研究现状作一综述。

探讨TRPP2和基质相互作用因子1在高盐诱导高血压大鼠脑血管平滑肌细胞中的变化及对血管收缩的调节作用

目的研究高盐诱导高血压大鼠基底动脉血管平滑肌细胞收缩功能的改变,探讨钙库操纵的钙内流(SOCE)及其组成分子TRPP2和基质相互作用因子1(STIM1)对血管收缩的调节作用。方法应用鼠尾血压测量仪检测不同时间大鼠血压的变化;应用离体血管培养技术,分别特异性地敲低基底动脉血管中TRPP2和STIM1的蛋白表达;应用离体血管张力检测实验,利用内皮素1(ET-1)清空细胞内钙库,并用维拉帕米阻断L型钙离子通道,观察基底动脉平滑肌中SOCE的变化;应用Western蛋白印迹法和免疫组化法检测脑血管中TRPP2和STIM1的表达水平。结果高盐饮食4周后,与对照组(123.7±3.6)mmH g相比,高盐摄入组收缩压(161.5±3.2)mmHg显著升高。张力结果显示,高盐摄入增强了ET-1诱导的SOCE引起的收缩。如果TRPP2和STIM1被特异性siRNA敲低,则激动剂诱导的SOCE引起的收缩显著降低。Western蛋白印迹法和免疫组化结果显示,高血压组脑血管中TRPP2和STIM1的表达水平较对照组增高。结论高盐诱导高血压大鼠基底动脉平滑肌中SOCE所引起的收缩显著增强,可能与TRPP2和STIM1蛋白表达增加有关。

基质相互作用分子蛋白介导的钙池调控的钙离子内流与神经退行性疾病

神经元的钙离子内流主要依赖于电压门控钙通道和谷氨酸受体通道。最近研究表明,还存在另一种通过基质相互作用分子(STIM)蛋白介导的钙池调控的钙离子内流(SOCE)方式,这种方式在神经退行性疾病中发生变化,SOCE的恢复以及STIM蛋白表达的正常化可能为神经退行性疾病的治疗带来潜在的益处。本文对STIM蛋白介导的SOCE在神经元生理及神经退行性变的病理情况下的作用方式进行综述。

细胞间黏附分子-1、基质金属蛋白酶9及基质金属蛋白酶组织抑制物-1在非小细胞肺癌中的表达及与患者临床特征的关系

目的探讨细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)及基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与患者临床特征的关系。方法选取82例NSCLC患者,免疫组化法检测肿瘤组织及癌旁组织中ICAM-1、MMP9及TIMP-1的表达情况,并分析其与患者临床特征的关系,相关性分析采用Spearman等级相关分析。结果NSCLC患者肿瘤组织中ICAM-1、MMP9及TIMP-1阳性表达率均明显高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。病理类型为腺癌、临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移的NSCLC患者肿瘤组织中ICAM-1的阳性表达率均明显高于病理类型为鳞状细胞癌、临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01);临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移的NSCLC患者肿瘤组织中MMP9、TIMP-1的阳性表达率均明显高于临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。Spearman相关分析显示,NSCLC患者肿瘤组织中ICAM-1的表达与MMP9的表达呈正相关(r=0.618,P﹤0.01),ICAM-1的表达与TIMP-1的表达呈正相关(r=0.584,P﹤0.01),MMP9的表达与TIMP-1的表达呈正相关(r=0.641,P﹤0.01)。结论ICAM-1、MMP9及TIMP-1在NSCLC患者肿瘤组织中阳性表达率高,且与NSCLC的发生发展密切相关。

基于网络药理学和分子对接研究高山金莲花素对颞下颌关节骨关节炎细胞模型的作用机制

目的运用网络药理学与分子对接方法探讨高山金莲花素(alpinumisoflavone,AIF)对颞下颌关节骨关节炎(temporomandibular joint osteoarthritis,TMJOA)细胞模型的作用机制,为AIF治疗TMJOA提供研究基础。方法运用GeneCards、OMIM、DisGeNET和PharmGKB数据库获取TMJOA疾病靶点,PharmMapper和HERB获取AIF作用靶点,取化合物与疾病交集靶点上传至STRING数据库得到关键靶点后做GO和KEGG富集分析,分子对接评估相关信号通路中关键靶点。获得医院伦理委员会的审批,提取3周龄SD大鼠髁突软骨细胞。CCK8检测AIF对髁突软骨细胞的毒性。用10 ng/mL白细胞介素⁃1β(interleukin 1β,IL⁃1β)诱导髁突软骨细胞24 h构建TMJOA细胞模型。实验分为3组,其中,对照组:DMEM培养基培养髁突软骨细胞48 h;IL⁃1β组(TMJOA细胞模型):预使用DMEM培养基培养髁突软骨细胞24 h后,保留原培养基的情况下加入IL⁃1β使终浓度达10 ng/mL继续培养24 h;IL⁃1β+10μmol/L AIF组:预使用含10μmol/L AIF的DMEM培养基培养髁突软骨细胞24 h,保留原培养基情况下加入IL⁃1β使终浓度达10 ng/mL继续培养24 h,流式细胞术检测AIF对TM⁃JOA细胞模型中的髁突软骨细胞凋亡的影响。进一步,实验分为对照组、IL⁃1β组、IL⁃1β+10μmol/L AIF组和IL⁃1β+30μmol/L AIF组共4组,其中,IL⁃1β+30μmol/L AIF组:预使用含30μmol/L AIF的DMEM培养基培养24 h,保留原培养基情况下加入IL⁃1β使终浓度达10 ng/mL继续培养24 h;其余3组方法同前。以qPCR与Western blot分别检测AIF对TMJOA细胞模型中与细胞凋亡相关的B淋巴细胞瘤2(B⁃cell leukemia/lymphoma⁃2,Bcl2)、天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific protease 3,Caspase⁃3)及基质降解相关的解聚蛋白样金属蛋白酶4(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 4,ADAMTS4)、基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase 3,MMP3)和基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP13)mRNA和蛋白的表达。结果PharmMapper与HERB数据库检索得到AIF化合物靶点300个,GeneCards、OMIM、DisGeNET和PharmGKB数据库检索得到TMJOA疾病靶点378个,将化合物与疾病靶点交集得33个潜在靶点,将其上传至STRING数据库得31个关键靶点,主要与细胞凋亡和细胞外基质降解相关。这一过程可能涉及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen⁃activated protein kinase,MAPK)、雌激素及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)等信号通路。分子对接结果表明AIF与MAPK和雌激素信号通路中的关键靶点细胞外信号调节激酶1/2(extracellular sig⁃nal⁃regulated kinase 1/2,ERK1/2)和雌激素受体基因1/2(estrogen receptor gene 1/2,ESR1/2)具有较好的结合活性。CCK8结果表明AIF对髁突软骨细胞无明显细胞毒性。与IL⁃1β组相比,IL⁃1β+10μmol/L AIF组中AIF可抑制髁突软骨细胞凋亡;与IL⁃1β组相比,IL⁃1β+10μmol/L AIF组和IL⁃1β+30μmol/L AIF组中AIF可上调Bcl2和下调Caspase⁃3 mRNA和蛋白表达,抑制ADAMTS4、MMP3和MMP13 mRNA和蛋白表达。结论AIF可通过上调Bcl2与下调Caspase⁃3 mRNA和蛋白表达抑制TMJOA细胞模型中髁突软骨细胞凋亡,同时抑制由IL⁃1β诱导的细胞外基质降解,延缓TMJOA进展。

基质细胞衍生因子-1/受体生物轴相互作用的研究进展

趋化因子又称趋化性细胞因子,是一类能趋化白细胞定向移动的小分子分泌蛋白。其受体是GTP-蛋白偶联的跨膜受体（G protein-coupled receptors,GPCRs）。基质细胞衍生因子-1（stromal cell derived factor-1,SDF-1）归属于A类趋化因子,也叫趋化因子配体12（CXC chemokine ligand-12,CXCL12）.

HIV-1蛋白酶与抑制剂3G3相互作用机制的分子动力学研究

HIV-1蛋白酶已经成为治疗艾滋病药物设计的重要靶标.本文采用分子动力学模拟和MM-PB/SA方法计算了抑制剂3G3与HIV-1蛋白酶的结合自由能,结果表明范德华作用驱动了3G3与蛋白酶的结合.同时也采用了基于残基的自由能分解方法计算了抑制剂-残基相互作用,结果证明残基Ala28,Val32/Val32′,Ile47,Gly49,Ile50/Ile50′,Ile84/Ile84′和Pro81′能与蛋白酶产生较为强烈的相互作用,同时也表明CH-π,π-π和CH-O相互作用控制了3G3与蛋白酶的结合.我们期望这个研究能为抗艾滋病的药物设计提供理论上的指导.

钙离子感受蛋白STIM1与Orai1在钙敏感受体介导钙内流及NO生成中的相互作用

目的:研究Ca^(2+)感受蛋白[基质相互作用分子1(STIM1)与钙释放激活钙通道蛋白1(Orai1)]在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)钙敏感受体(Ca SR)介导的钙内流和一氧化氮(NO)生成中的相互作用。方法:将Ca SR激动剂精胺[钙池操纵性钙通道(SOC)和受体操纵性钙通道(ROC)均激活]单用或与ROC模拟剂12-O-十四烷酰佛波醇-13-醋酸酯(TPA)+Ca SR负性变构调节剂Calhex 231(激活ROC、阻断SOC)、蛋白激酶C(PKC)抑制剂Ro 31-8220和PKCα/β1选择性抑制剂Go 6976(激活SOC、阻断ROC)联合孵育HUVECs;利用免疫荧光技术检测HUVECs中STIM1和Orai1的蛋白表达和共定位;免疫共沉淀法检测STIM1和Orai1之间的相互作用;取2~3代HUVECs随机分为特异性的质粒转染组(sh STIM1+sh Orai1组)、空质粒组(vehicle-STIM1+vehicle-Orai1组)和未转染组(control组),将3组细胞分别加入上述4组不同药物刺激,采用荧光探针Fura-2/AM检测HUVECs中Ca^(2+)浓度的变化,NO荧光探针DAF-FM DA负载方法同步检测HUVECs中NO生成的变化。结果:STIM1和Orai1蛋白表达共定位于胞浆,与control组相比,加入Calhex 231+TPA、Ro 31-8220和Go 6976刺激后,STIM1和Orai1在胞浆中的定位均减少,且二者的相互作用均减弱;在4种不同处理因素作用下,sh STIM1+sh Orai1组细胞内Ca^(2+)浓度和NO净荧光强度均明显降低(P<0.05)。结论:STIM1与Orai1以二元复合物的形式共同调节Ca SR,并通过激活SOC和ROC介导钙内流及NO生成。