探讨TRPP2和基质相互作用因子1在高盐诱导高血压大鼠脑血管平滑肌细胞中的变化及对血管收缩的调节作用

目的研究高盐诱导高血压大鼠基底动脉血管平滑肌细胞收缩功能的改变,探讨钙库操纵的钙内流(SOCE)及其组成分子TRPP2和基质相互作用因子1(STIM1)对血管收缩的调节作用。方法应用鼠尾血压测量仪检测不同时间大鼠血压的变化;应用离体血管培养技术,分别特异性地敲低基底动脉血管中TRPP2和STIM1的蛋白表达;应用离体血管张力检测实验,利用内皮素1(ET-1)清空细胞内钙库,并用维拉帕米阻断L型钙离子通道,观察基底动脉平滑肌中SOCE的变化;应用Western蛋白印迹法和免疫组化法检测脑血管中TRPP2和STIM1的表达水平。结果高盐饮食4周后,与对照组(123.7±3.6)mmH g相比,高盐摄入组收缩压(161.5±3.2)mmHg显著升高。张力结果显示,高盐摄入增强了ET-1诱导的SOCE引起的收缩。如果TRPP2和STIM1被特异性siRNA敲低,则激动剂诱导的SOCE引起的收缩显著降低。Western蛋白印迹法和免疫组化结果显示,高血压组脑血管中TRPP2和STIM1的表达水平较对照组增高。结论高盐诱导高血压大鼠基底动脉平滑肌中SOCE所引起的收缩显著增强,可能与TRPP2和STIM1蛋白表达增加有关。

Orai1和STIM1在衰老大鼠平滑肌细胞中的变化及对血管收缩的调节作用

目的研究衰老引起的大鼠颈总动脉血管平滑肌细胞(VSMC)收缩功能的改变,并探讨钙库操纵的钙内流(SOCE)及其组成分子Orai 1和基质相互作用因子1(STIM1)对血管收缩的调节作用。方法应用离体血管实验,通过特异性细胞内钙泵阻断剂毒胡萝卜素,清空细胞内钙库,并用维拉帕米阻断L型钙离子通道,特异性观察不同月龄大鼠VSMC中SOCE的变化;采用免疫荧光染色法检测Orai 1和STIM 1蛋白在不同月龄大鼠颈总动脉VSMC中的表达。结果与年轻大鼠相比,老年大鼠颈总动脉对60 mmol/L高钾去极化引起的收缩显著增强(P<0.05),但SOCE引起的血管收缩在高钾引起的收缩中所占百分比显著减小(P<0.05)。与年轻大鼠相比,老年大鼠VSMC中Orai 1和STIM1蛋白表达水平降低。结论与年轻大鼠相比,老年大鼠颈总动脉VSMC中SOCE显著减弱,可能与Orai 1和STIM 1蛋白表达减少有关。

视觉系统中钙库操纵钙内流通路的研究进展

钙库操纵的钙通道(store operated Ca2+channel,SOCC)和钙库操纵的钙内流(store-operated calcium entry,SOCE)普遍存在于细胞之中,是非兴奋细胞主要的钙内流方式,参与了机体众多的生理过程。许多眼科疾病的发生和发展与SOCE的异常密切相关。本文就近年来对SOCE途径的机制、STIM和Orai不同亚型的结构及在眼科疾病中的作用研究进行了回顾,以期为眼科疾病治疗提供新的思路。

HT22细胞缺血再灌注损伤后钙池操纵钙通道蛋白中STIM的表达及意义

目的 探讨钙池操纵钙通道蛋白组成成分——基质相互作用因子（STIM）在细胞缺血再灌注损伤后的表达变化及意义. 方法 将HT22细胞系随机分为正常对照组及缺血再灌注损伤后1、3、6、12、24h组;正常对照组不做任何处理,缺血再灌注各组细胞通过无糖培养基和氮气箱内培养6h建模.利用荧光免疫组化法检测STIM1和STIM2的空间表达情况;利用实时定量PCR（RT-PCR）、Western blotting法检测STIM1和STIM2的蛋白及mRNA水平表达变化. 结果 （1）荧光免疫组织化学检测发现,缺血再灌注损伤后,特别是损伤后12 h,STIM1染色呈阳性,阳性染色呈颗粒状,分布在胞膜、胞浆和部分胞核上.而STIM2的阳性颗粒则主要表达在细胞核上;（2）RT-PCR检测发现,STIM1在正常对照组和缺血再灌注损伤后各组HT22细胞中高表达,但表达量差异无统计学意义（p＞0.05）.与正常对照组比较,STIM2则在缺血再灌注损伤后1h、6h和24 h有3个表达高峰,表达量差异有统计学意义（P＜0.05）.（3）Western blotting检测结果显示,STIM1持续稳定高表达,各组之间差异无统计学意义（p＜0.05）.STIM2蛋白在缺血再灌注损伤后各组中均明显升高,其中1h、3h、6h及12h组与正常对照组比较差异有统计学意义（p＜0.05）. 结论 缺血性损伤后,STIM1和STIM2均在HT22细胞上表达,但其空间和时间表达变化规律不同,可能通过影响钙库调控的钙内流等机制在脑缺血性损伤的病理生理过程中发挥作用.

支气管哮喘发病机制研究进展

气道重塑是一个复杂的过程,在支气管哮喘发病机制中越来越受到重视。其产生的原因很多,但血小板衍生生长因子-BB的刺激、STIM 1/Orai1介导的Ca2+内流的确切机制还不清楚,阐明这些因素将为发现新的防治或逆转气道结构变化的治疗方法提供帮助。

支气管哮喘发病机制研究进展

气道重塑是一个复杂的过程，在支气管哮喘发病机制中越来越受到重视。其产生的原因很多，但血小板衍生生长因子-BB的刺激、STIM 1／Orail介导的Ca^2＋内流的确切机制还不清楚，阐明这些因素将为发现新的防治或逆转气道结构变化的治疗方法提供帮助。