反义cyclinD1基因转染后人角膜基质细胞增生改变的实验研究

目的探讨反义cyclinD1基因转染对人角膜基质细胞增生的作用效果。方法从沈阳军区总医院眼库获取人角膜组织,体外培养获得第2代人角膜基质细胞用于实验。阳离子脂质体lipofectamine介导进行反义cyclinD1基因转染(实验组),对照组分别为PBS替代cyclinD1质粒及lipofectamine(对照1组)和PBS代替cyclinD1质粒(对照2组)。通过免疫细胞化学法统计人角膜基质细胞的cyclinD1蛋白表达情况,利用四甲基偶氮唑盐法分析人角膜基质细胞增生情况,锥虫蓝染色计算活细胞比率。结果反义cyclinD1转染后,人角膜基质细胞仅有少量细胞核cyclinD1染色呈阳性,cyclinD1蛋白表达明显降低,A570值显著下降,与对照1组和对照2组比较,差异存在显著性(P<0.05)。对照1组和对照2组比较,差异无显著性(P>0.05)。锥虫蓝染色显示3组活细胞比率均超过90%。结论反义cyclinD1基因转染具有抑制人角膜基质细胞增生的作用,并且细胞毒性不明显,可以作为基因治疗的相关依据。

miR-218慢病毒干扰对糖尿病肾病大鼠肾小球系膜细胞外基质增生及Nrf2信号通路的作用机制

目的探究miR-218慢病毒干扰对糖尿病肾病(ND)大鼠肾小球系膜细胞外基质增生及(Nrf)2信号通路的作用机制。方法把40只大鼠随机分为正常组(NC组)、模型组(DN组)、空载慢病毒组(Vector组)和慢病毒组(miR-218组)各10只,分别对大鼠肾小球细胞的增殖情况、大鼠组织中miR-218表达情况进行比较;观察各组DN指标24 h蛋白尿、肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)含量、肾组织病理改变、细胞外基质增生及蛋白表达水平的差异性[Nrf2和(HO)-1蛋白]。结果和NC组相比,DN组肾组织中miR-218显著高表达,肾小球系膜细胞活性明显增加(P<0.05);干预后的miR-218组肾小球系膜细胞增殖活性较DN组和Vector组明显降低,且细胞增殖受到了明显的抑制(P<0.05)。与NC组相比,DN组和Vevtor组Upro/24 h含量明显增加,血清中Scr和BUN含量均显著增加(P<0.05);干预后的miR-218组Upro/24 h含量及血清中Scr和BUN含量较DN组均明显降低(P<0.05)。与NC组比较,DN组细胞外基质增生明显增加(P<0.05);miR-218组细胞外基质增生较DN组明显减少(P<0.05)。Nrf2和HO-1蛋白在DN组中低表达(P<0.05);低表达miR-218干预后发现Nrf2和HO-1蛋白得到明显促进(P<0.05)。结论低表达miR-218可抑制DN大鼠肾小球系膜细胞增殖活性,减少外基质增生,有效调控Nrf2/HO-1信号通路,进而改善大鼠DN。

肝素和干扰素对角膜基质细胞的影响

目的寻求预防或减轻PRK术后上皮下浑浊（haze）形成的药物。方法进行兔角膜基质细胞的原代和早期传代培养，并用MTT自动比色法检测肝素和干扰素-γ（IFN-γ）对免角膜基质细胞增生的影响。结果肝素浓度＞1000u/ml，或IFN-γ浓度>500u/ml作用48h和72h对角膜基质细胞增生均有明显抑制作用（P＜0.05）。两药作用72h抑制率高于作用48h。结论肝素和IFN-γ可望成为减轻PRK后haze形成的药物。

瘦素与子宫内膜异位症

子宫内膜异位症(EMs)是与免疫相关的慢性炎症性疾病。腹腔内异位内膜的黏着、侵袭、血管形成是EMs发生发展的基本环节。近年研究发现,瘦素作为人体内重要的激素和效应因子,具有改变腹腔微环境、促进子宫内膜基质细胞增生、调节基质金属蛋白酶及其抑制物比例、参与新生血管形成及抑制凋亡等功能。EMs时异常表达的瘦素系统在上述各环节中起着重要的调节作用,与EMs的发生发展密切相关。就瘦素在EMs中的多重调节效应进行综述。