基质胶提取制备与应用的研究进展

基底膜是细胞外基质的特化结构,存在于大多数的组织之中,不仅为上皮细胞、内皮细胞、神经细胞、肌肉细胞等提供支持结构,而且发挥着维持组织结构和功能的重要作用。基质胶是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取的可溶性基底膜制备物,它含有几乎所有的基底膜成分,能良好模拟基底膜细胞外基质的生物学特性,为生命科学研究中多种实验模型的构建提供了关键生物材料,尤其是类器官培养的重要载体。综述了基质胶的生物学特性、提取制备方法及主要用途,讨论了基质胶潜在应用领域与价值,分析了国内外基质胶生产的现状与存在的问题,并对基质胶产品的未来发展趋势进行了展望,以期对中国基质胶产品的研发及应用提供参考。

温度护理干预在脂肪来源干细胞基质胶面部填充术中的应用

目的:探讨温度护理干预对脂肪来源干细胞基质胶面部填充术效果的影响。方法:选取2019年1月-2020年12月于西安交通大学第一附属医院接受脂肪来源干细胞基质胶(Stromal vascular fraction-gel,SVF-gel)注射面部脂肪填充术20例患者为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和干预组,各10例。对照组采用常规护理,干预组实施温度护理干预,比较两组护理效果。结果:两组体温比较,差异有统计学意义(F组间=371.431,P组间<0.001);T_(1)、T_(2)、T_(3)、T_(4)干预组体温均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001);两组体温均有随时间变化的趋势(F时间=230.426,P时间<0.001);分组与时间有交互效应(F交互=55.439,P交互<0.001)。干预组寒战发生率为10.00%,对照组寒战发生率70.00%,干预组明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预组热舒适度出PACU时评分明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预组患者护理满意率为100.00%明显高于对照组的50.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:温度护理干预可有效保持SVF-gel移植术中患者体温的恒定,提高患者舒适度和护理满意度,减少了低温和寒颤发生。促进了患者早日康复。

FGF对兔关节软骨细胞基质胶原和蛋白多糖的影响

关节软骨的损伤与修复是目前骨科临床基础研究的一个重要课题。关节软骨损伤后的修复是极其有限的〔１〕。许多多肽生长因子在关节软骨损伤与修复中起着重要的调节作用，如成纤维细胞生长因子（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＦＧＦ）对中胚层来源的细胞...

废弃混凝土中基质胶凝组分作原料煅烧水泥熟料的研究

每年拆除建筑物所产生的废弃混凝土数量巨大,因此废弃混凝土中基质胶凝组分作原料煅烧水泥熟料的再利用研究具有重要的意义。采用热处理和加入表面活性剂与机械粉碎相结合的方法将废弃混凝土中的骨料与基质胶凝组分进行了分离。将分离出的基质胶凝组分按不同配合比制备生料,分别在1400℃,1450℃下进行了熟料煅烧试验,并进行了结构和力学性能测定。试验结果表明,水泥净浆试体的抗压强度随基质胶凝组分配合比的增大而降低,但适当掺入(小于25%)时降低幅度不大;XRD和SEM分析结果表明,1450℃煅烧的熟料矿物结构与常规原料煅烧的熟料基本相同。根据晶种理论和水化物脱水相的反应活性分析了熟料烧成机理。

脱钙骨基质和骨基质胶制备及其生物学效应

脱钙骨基质和骨基质胶制备及其生物学效应６３００４２重庆第三军医大学大坪医院柯新华，林贵德，王民刚，罗涛丽国内外文献报道的脱钙骨基质（ＤＢＭ）制备方法各异，尤其人的ＤＢＭ制备方法报道较少。本文介绍一种制备ＤＢＭ和同种骨基质胶《ＢＭＧ）的方法。１仪器骨刀...

基质胶结对土石混合体强度变形特性影响

利用应变控制式静力三轴剪切仪,对具有不同胶结程度和含石量的土石混合体试样进行了固结不排水剪切试验;通过对制备的土石混合体试样的应力-应变关系、孔隙水压力变化、有效应力路径和抗剪强度指标等试验结果的对比分析,探讨了不同胶结程度土石混合体试样的差别及产生原因。试验结果表明:不同胶结程度土石混合体破坏方式可分为剪切带破坏和鼓肚变形破坏两种基本类型;胶结使得土石混合体应力应变关系和孔隙水压力变化与未胶结土石混合体差异明显,胶结作用对土石混合体的剪胀和软化特性影响显著。在块石软硬程度、形状及试样密实度相近的条件下,不论是否胶结或胶结程度如何,土石混合体有效内摩擦角φ’与无量纲粒度分布特征参数D50WBP/D60具有较好的线性相关性。试验结论为确定不同胶结程度土石混合体强度提供了参考。

同种脱钙骨基质和骨基质胶制备及其生物学效应

同种脱钙骨基质和骨基质胶制备及其生物学效应Ｓｔｕｄｉｅｓｏｆｔｈｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｄｅｍｉｎｅｒａｌｉｚｅｄａｌｌｏｇｅｎｅｉｃｂｏｎｅｍａｔｒｉｘａｎｄｉｔｓｇｅｌａｔｉｎａｎｄｔｈｅｉｒｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｅｆｆｅｃｔｓ柯新华，林贵德，...

p38MAPK参与高糖刺激大鼠肾小管上皮细胞产生细胞外基质胶原Ⅲ

目的:探讨p38MAPK信号通路在高糖刺激大鼠肾小管上皮细胞产生细胞外基质胶原Ⅲ中的作用。方法:采用体外培养和Westernblotting等方法,以不同浓度D-葡萄糖、p38MAPK信号通路特异性阻断剂SB203580以及用不同时间刺激正常大鼠肾小管上皮细胞NRK52E,分别检NRK52E细胞p38MAPK磷酸化水平和细胞外基质胶原Ⅲ的表达。结果:随D-葡萄糖浓度增加,p38MAPK磷酸化水平、胶原Ⅲ的产生也增加,SB203580可有效阻断高糖引起p38MAPK磷酸化水平的升高和细胞外基质胶原Ⅲ的表达的增高。结论:高糖引起p38MAPK磷酸化水平的升高可能在糖尿病肾病的肾间质纤维化中发挥重要作用。SB203580有潜在的糖尿病肾病防治的临床应用价值。

自制细胞外基质胶泪道羊膜生物学特性及修复泪道损伤的实验研究

目的研究自制细胞外基质胶泪道羊膜的生物活性因子表达含量、生物力学特征以及在修复兔泪道损伤中的应用效果。方法使用放射免疫分析方法对自制细胞外基质胶泪道羊膜中表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)等10种生物活性因子的表达含量进行测定,并与新鲜泪道羊膜、干燥泪道羊膜进行对比。利用负荷传感器对比自制细胞外基质胶羊膜与新鲜泪道羊膜、干燥泪道羊膜的抗拉强度、断裂伸长率和弹性模力,且把保存12个月的自制细胞外基质胶泪道羊膜应用于修复兔泪道损伤模型,并于术后4周观察兔泪道黏膜修复及K16表达情况。结果自制细胞外基质胶泪道羊膜、干燥泪道羊膜中10种细胞因子含量均比新鲜泪道羊膜低(均为P<0.05),而ECM泪道羊膜中10种细胞因子含量均明显高于干燥泪道羊膜(均为P<0.05)。自制细胞外基质胶泪道羊膜的抗拉强度和断裂伸长率与新鲜泪道羊膜、干燥泪道羊膜相比明显增加(均为P<0.05),而自制细胞外基质胶泪道羊膜的弹性模量明显小于新鲜泪道羊膜及干燥泪道羊膜(均为P<0.05)。术后4周发现ECM-LDAM组泪道管口通畅,无明显的排斥反应和炎症反应,其下睑泪道黏膜K16表达阴性,而对照组泪道黏膜K16表达阳性。结论自制细胞外基质胶泪道羊膜含有丰富的生物活性因子和优越的生物力学特性,是一种更加安全有效的泪道修复及重建材料。

基底膜基质胶携带人脂肪组织来源间充质干细胞移植改善心肌梗死大鼠心脏功能

目的:应用基底膜基质胶(matrigel)携带人脂肪组织来源间充质干细胞(ADMSCs)在大鼠的心肌梗死部位注射,观察其对细胞存活的影响及改善心梗模型大鼠心脏功能的能力。方法:分离、培养、扩增人ADM-SCs,左冠状动脉前降支结扎法建立大鼠急性心肌梗死模型。将大鼠急性心肌梗死模型随机分为4组,对照组(PBS组)、matrigel组、PBS+ADMSCs组、matrigel+ADMSCs组,对移植4周后细胞的存活及心梗局部新生血管的密度进行测量,并利用心脏超声检测大鼠心脏功能。结果:与其它各组相比,matrigel+ADMSCs组的细胞4周存活细胞数量以及心肌梗死区域新生血管密度均显著提高,心脏超声结果也表明该组大鼠的心脏功能改善最为显著。结论:基底膜基质胶能够提高人脂肪组织来源间充质干细胞在大鼠心肌梗死部位的存活,有助于提高心肌梗死部位微血管生成并改善心肌梗死大鼠的心脏功能。

基于基质胶体外构建结肠癌类器官的初步研究

背景结肠癌类器官较传统肿瘤模型更加接近肿瘤组织的三维结构和分子特征,体外模型的构建可应用于新型抗肿瘤药物研发和肿瘤特性探究。目的利用基质胶在体外构建出结肠癌类器官。方法稳定培养商品化结肠癌细胞,经过消化、重悬后将其接种于基质胶内,在基质胶3D结构支撑下,培养形成具有空腔的立体球状(多叶)结构,即结肠癌类器官。光镜下连续观察结肠癌类器官的发育过程和形态特征变化;设置5×10^(3)/mL、5×10^(4)/mL、5×10^(5)/mL三个密度梯度,观察类器官发育最佳密度;HE染色观察结肠癌类器官形态特点;观察抗肿瘤药物顺铂对结肠癌类器官的影响。结果结肠癌细胞在基质胶中培养6 d后,形成多细胞球形团状结构,部分类器官发育出分叶状结构;类器官在5×10^(4)/mL、5×10^(5)/mL培养密度的发育情况优于5×10^(3)/mL;顺铂在15μg/mL浓度条件下对结肠癌类器官依然有明显的毒性效果。结论实现了结肠癌类器官体外培养的条件探索和形态特征观察,为结肠癌的化疗药物筛选、肿瘤行为学观察等深入研究提供了良好的平台。

异种脱钙骨基质、骨基质胶加释放系统移植的组织学和电镜观察

XDBM XBMG用小公牛长管状骨制备;释放系统由 CaSO_1、Na_2HPO_1、KH_2PO:(DSA）、Ca-Cl_2、Na_2HPO_4、KH_2PO_1(DSB)组成。Wistar大鼠24只分四组:(1)XDBM加DSA;(2)XDBM加DSB;(3)XBMG加DSA;(4)XBMG加DSB;不设对照。将四种移植物分别植入大鼠股四头肌肌穴。定期取材制片,TEM—100SX透射电镜观察。结果:2天巨噬细胞、淋巴细胞密集,细胞器发达,微绒毛状突起;4天间充质细胞贴附在XDBM、XBMG表面,细胞器发达伪足伸入移植物缝隙;8天成软骨细胞活跃,软骨细胞少;14天软骨细胞中部分细胞的细胞器固缩、溶解;22天网状骨小梁,骨细胞突起部分相互连接;34天新生骨渐成熟,骨髓细胞,个别哈氏管出现;几种生骨细胞和间充质细胞常在一个视野或网眼内,相贴很近,始终未发现破骨细胞。实验证明:XDBM、XBMG加DS诱导成骨的细胞来源是间充质细胞,直到34天仍见巨噬细胞存在尚未转化为破骨细胞。

聚乳酸/基质胶复合支架对裸鼠血管生成的促进作用

目的:观察不同时间点聚乳酸(OPLA)/基质胶(matrigel matrix,MM)在裸鼠体内的促血管生成情况,评价其促血管生成的效果。方法:以OPLA复合支架为载体,分为处理组和对照组。处理组:OPLA+MM;对照组:OPLA。选取3只雄性裸鼠,2种支架分别植入每只裸鼠的前肢与背部交接处,1、2、4周取材,进行HE染色和免疫组织化学染色,观察OPLA/MM促血管生成的效果,计算微血管密度(MVD),采用独立样本t检验法进行定量分析,比较其MVD的差异。结果:1~4周内随着时间的延长,支架与周围组织融合良好,移植物周围的血管逐渐增多,并有肉眼可见的血管长入;每个时间点OPLA+MM的MVD值较高;同时,OPLA支架随时间延长逐渐降解,支架内部被新生组织分割成小区域,并伴随有血管长入。结论:在裸鼠体内,OPLA+MM具有良好的促血管生成作用。

细胞外基质胶羊膜棒的生物学特性及其在雌兔干眼中的应用

目的研究细胞外基质胶羊膜棒的生物学特性及其在兔干眼的应用效果。方法使用放射免疫分析方法对细胞外基质胶羊膜棒中的表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)等10种生物活性因子的表达含量加以测定,同时和新鲜泪道纤维蛋白胶羊膜(fresh lacrimal duct amniotic membrane,F-LDAM)、单层泪道纤维蛋白胶羊膜(monolayer lacrimal duct amniotic membrane,M-LDAM)进行对比。此外,利用负荷传感器对比细胞外基质胶泪道纤维蛋白胶羊膜(extracellular matrix lacrimal duct amniotic membrane,ECM-LDAM)与F-LDAM、M-LDAM的弹性模量、抗拉强度、断裂伸长率,并把ECMLDAM应用于兔干眼症的治疗,术后8周观察实验兔干眼治疗前后荧光染色(fluorescein stain,FL)评分、各时段泪液分泌、FL情况和角膜共焦显微镜下角膜上皮下神经纤维密度、神经纤维分支及曲率评分。结果 ECM-LDAM、M-LDAM中EGF、NGF、HGF、TGF-β等10种因子含量均比F-LDAM低,差异均有统计学意义(均为P<0.05),而ECM-LDAM中EGF、NGF、HGF、TGF-β等10种因子含量明显高于M-LDAM,差异有统计学意义(P<0.05)。ECM-LDAM的弹性模量明显低于F-LDAM及M-LDAM,差异有统计学意义(P<0.05);而ECM-LDAM的抗拉强度和断裂伸长率明显高于与M-LDAM和F-LDAM,差异有统计学意义(P<0.05)。术后8周发现B组与A组相比FL评分降低,泪液分泌时间延长,角膜共焦显微镜下观察发现神经纤维密度、神经纤维分支及曲率评分显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ECM-LDAM作为一种新型安全的泪道修复材料,其丰富的生物活性因子和优越的柔韧性,可以更有效地改善兔干眼,营养修复受损的角膜神经。

自制染色干燥细胞外基质胶羊膜生物学特性及修补结膜缺损的实验研究

目的研究自制染色干燥细胞外基质胶羊膜(extracellular matrix amniotic membrane,ECM-AM)的生物活性因子表达情况、生物力学特征以及在兔结膜修补术中的应用效果。方法使用光镜和HE染色对自制染色干燥ECM-AM进行形态学观察,并通过免疫荧光染色对比其与单纯冻干羊膜中不同生物活性因子Laminin 5、β-catenin和CollagenⅣ的表达情况。利用负荷传感器对比自制染色干燥ECM-AM与单纯冻干羊膜的最大承受拉伸力、弹性模量和拉伸长度,且把保存12个月的自制染色干燥ECM-AM应用于兔羊膜-结膜修补术,并在术后2周观察兔结膜愈合情况。结果自制染色干燥ECMAM可以分辨羊膜的折叠处、皱褶及边缘,HE染色表明自制染色干燥ECMAM基底膜的完整度和厚度均优于保存相应天数(12个月)的冻干羊膜。保存12个月的自制染色干燥ECM-AM中Laminin 5、β-catenin和CollagenⅣ均比单纯冻干羊膜要高。自制染色干燥ECM-AM的最大承受拉伸力以及弹性模量均明显高于于单纯冻干羊膜(均为P<0.05),但二者平均拉伸长度上差异无统计学意义(P>0.05)。自制染色干燥ECM-AM常温保存12个月后应用于兔羊膜-结膜修补术,术后2周羊膜上有兔结膜上皮长入且K19分布于整个结膜上皮细胞,并无明显的排斥反应和炎症反应。结论自制染色干燥ECM-AM含有丰富的生物活性因子,具有优越的生物力学特性,为眼表重建提供了更加安全有效的材料。

用废弃混凝土中的基质胶凝组分作原料煅烧水泥熟料的研究

用废弃混凝土中的基质胶凝组分替代部分石灰质原料进行了煅烧水泥熟料的试验研究,探讨了基质组分在熟料煅烧过程中的作用机理。通过XRD和SEM研究了熟料的相组成和晶体结构。试验结果表明,与采用常规原料制备的试样相比,用基质胶凝组分配制的生料易烧性稍差,但二者无明显差异;熟料晶体结构及性能与对比试样相近。

脂肪干细胞基质胶(SVF-gel)临床应用的现状与展望

随着医疗技术的进展以及人们对躯体外观关注度的增加,自体脂肪移植技术被广泛应用于软组织填充和修复重建。脂肪干细胞基质胶(Stromal Vascular Fraction Gel,SVF-gel)是一种经过物理方法获得的浓缩脂肪产物,其因富含血管基质片段(Stromal Vascular Fraction,SVF)和细胞外基质(Extracellular Matrix,ECM),而具有炎症反应轻、不良反应少、保留率高等优点,现已逐渐代替传统自体脂肪移植,广泛应用于医疗美容及多种疾病治疗。学者们对当前SVF-gel的临床应用现状、作用机制和病例治疗结果展开综述。

基质胶对绒毛外细胞滋养层细胞体外侵袭的介导作用

目的探讨基质胶（Matrigel）在绒毛外细胞滋养层细胞（EVCT）的体外侵袭中的作用。方法取健康早孕妇女（孕7～9周）人工流产绒毛组织,利用Percoll梯度离心法及差速贴壁法,将纯化的绒毛外细胞滋养层细胞,按所需浓度接种于涂有Matrigel培养板或24孔Transwell侵入系统中培养。用细胞免疫荧光法检测TGFβ2、cytokeration7、integrinα1β1。用CCK-8评价细胞生长状况。用Transwell细胞侵入系统检测EVCT的体外侵袭作用。结果①EVCT在Matrigel包被的Petri皿培养4h,用细胞免疫荧光法显示有95%以上的细胞表达TGFβ2、cytokeration7和integrinα1β1;②EVCT在Matrigel培养不同时间后,其生长指数未有明显变化,提示Matrigel对EVCT的生长未有明显影响;③EVCT在Transwell侵袭系统中培养不同时间后,侵袭细胞的OD值提示48h细胞侵袭作用达到平台期。结论 Matrigel在EVCT体外侵袭中并不影响其细胞纯度及其生长曲线,其介导的体外侵袭在48h达到侵入平台期。

肥大细胞活化产物的类糜蛋白酶是促进小鼠基质胶栓中血管生成的主要介质

目的探讨肥大细胞活化产物的促进血管生成作用。方法分离SD大鼠腹腔肥大细胞(RPMC),用钙离子载体刺激使其活化,提取活化产物并检测其类糜蛋白酶活性。选取BALB/c小鼠30只,随机分为对照组、活化产物组和抑制剂组(每组10只),用基质胶栓模型来研究活化产物的血管生成作用。采用氰化高铁血红蛋白(HiCN)法测定胶体内血红蛋白(Hb)浓度,HE染色观察胶体内血管分布情况,并用CD34免疫组织化学染色法检测基质胶中血管密度(MVD)。结果分离获得的RPMC激活后可以检测到类糜蛋白酶活性。小鼠基质胶栓实验显示,活化产物注射组基质胶内的Hb水平约为对照组的7倍,而抑制剂组的Hb水平比实验组下降了80.8%。HE染色显示,实验组基质胶中可见新生血管,有些可以观察到血管腔。MVD检测结果显示活化产物组的MVD约为对照组的5倍,而抑制剂组比实验组下降66.2%。结论肥大细胞活化产物中类糜蛋白酶是促进小鼠基质胶栓中血管生成的主要介质。