FGF对兔关节软骨细胞基质胶原和蛋白多糖的影响

关节软骨的损伤与修复是目前骨科临床基础研究的一个重要课题。关节软骨损伤后的修复是极其有限的〔１〕。许多多肽生长因子在关节软骨损伤与修复中起着重要的调节作用，如成纤维细胞生长因子（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＦＧＦ）对中胚层来源的细胞...

p38MAPK参与高糖刺激大鼠肾小管上皮细胞产生细胞外基质胶原Ⅲ

目的:探讨p38MAPK信号通路在高糖刺激大鼠肾小管上皮细胞产生细胞外基质胶原Ⅲ中的作用。方法:采用体外培养和Westernblotting等方法,以不同浓度D-葡萄糖、p38MAPK信号通路特异性阻断剂SB203580以及用不同时间刺激正常大鼠肾小管上皮细胞NRK52E,分别检NRK52E细胞p38MAPK磷酸化水平和细胞外基质胶原Ⅲ的表达。结果:随D-葡萄糖浓度增加,p38MAPK磷酸化水平、胶原Ⅲ的产生也增加,SB203580可有效阻断高糖引起p38MAPK磷酸化水平的升高和细胞外基质胶原Ⅲ的表达的增高。结论:高糖引起p38MAPK磷酸化水平的升高可能在糖尿病肾病的肾间质纤维化中发挥重要作用。SB203580有潜在的糖尿病肾病防治的临床应用价值。

电针对颈椎病模型大鼠椎间盘细胞外基质胶原和代谢酶活动的影响

目的:观察电针"大椎"穴对颈椎病模型大鼠椎间盘细胞外基质(ECM)及胞内Ⅱ型胶原(COL-Ⅱ)、V型胶原(COL-V)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)和金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)的影响,探讨电针治疗颈椎间盘退变的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组和莫比可组,每组7只。建立动静力失衡性颈椎间盘退变大鼠模型。电针组取"大椎"穴,每次治疗30min,每天1次,14d为1个疗程,疗程之间间隔2d,共治疗2个疗程;莫比可组给予莫比可片每日0.75mg/kg灌胃治疗,共治30d。采用免疫组化法检测椎间盘中ECM、COL-Ⅱ、COL-V、MMP-13、TIMP-1的表达。结果:模型组ECM、COL-Ⅱ较假手术组明显减少(P<0.01),COL-V、MMP-13较假手术组明显增多(P<0.01,P<0.05);电针组、莫比可组ECM、COL-Ⅱ较模型组增多(P<0.01),COL-V、MMP-13较模型组减少(P<0.01,P<0.05);各组TIMP-1均无明显变化(P>0.05)。结论:电针"大椎"穴治疗颈椎间盘退变的机制可能与调控椎间盘细胞外基质系统有关。

血清对角膜基质细胞介导下绿脓杆菌引起的角膜胶原降解作用的实验研究

目的探讨血清在绿脓杆菌和角膜基质细胞介导的角膜胶原降解时的作用。方法Ⅰ型胶原凝胶,不混悬及混悬角膜基质细胞,在不同的血清浓度下(0、5%、10%、20%)与绿脓杆菌培养液共同培养24h,超滤去除天然原纤维,超滤液经过水解,分光光度计测定其羟脯氨酸(HYP)的量作为胶原降解的活性单位。结果不混悬角膜基质细胞组,随血清浓度增加绿脓杆菌所引起的胶原降解量无变化,差异无显著性(P>0.05);混悬角膜基质细胞组,随着血清浓度增加绿脓杆菌所引起的胶原降解量减少,差异有显著性(P<0.025orP<0.05);在相同的血清浓度(0、5%、10%)时,混悬角膜基质细胞组胶原降解量高于不混悬角膜基质细胞组,差异有显著性(P<0.025orP<0.05)。结论血清中的某些活性成分可抑制绿脓杆菌诱导的角膜基质细胞胶原降解。

开角型青光眼小梁切除术中应用胶原蛋白基质与MMC的疗效比较

目的:观察开角型青光眼行小梁切除术中应用胶原蛋白基质与MMC的临床效果,评价两组术后有效性及安全性。方法:选取2015-01/2016-12于我院诊断为开角型青光眼的患者24例32眼,随机分为两组,行小梁切除术中应用胶原蛋白基质12例14眼为研究组;行小梁切除术中应用MMC 12例18眼为对照组。观察两组患者术后1d,1wk,1、3、6mo眼压、手术成功率、术后应用降眼压药物情况及手术并发症情况。结果:术后1d两组患者眼压均数差异有统计学差异(P<0.05)。术后1wk,1 mo两组患者眼压均数差异无统计学差异(P>0.05),术后3、6mo两组患者眼压均数差异性有计学意义(P<0.05)。术后6mo两组患者手术成功率差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者术前眼压均值在术后1d有明显下降趋势,术后1wk^6mo眼压均数水平趋向平稳,术后3、6mo研究组平均眼压水平线较对照组低。术后6mo研究组有28%患者需要用降眼压眼液控制眼压,对照组有33%患者需要用降眼压眼液控制眼压,两组间比较无统计学意义(P>0.05)。研究组与对照组术后1d并发症发生率比较无统计学意义(P>0.05)。结论:开角型青光眼小梁切除术应用胶原蛋白基质的手术成功率与应用MMC的治疗效果相似,其降低眼压幅度较应用MMC明显,其避免术后发生低眼压、浅前房。

人巩膜成纤维细胞体外三维胶原基质培养系统的构建及其生物力学特性

背景眼轴的过度伸长和巩膜组织的扩张是高度近视发病机制研究的热点之一，建立合理的人巩膜成纤维细胞（HSFs）培养体系模型有助于进一步探讨HSFs在高度近视形成过程中与胶原基质相互作用的生物学机制。 目的构建HSFs与Ⅰ型胶原的三维培养系统，微观模拟在体巩膜，建立巩膜重塑模型。 方法采集新鲜供体巩膜组织，采用组织块培养法分离和培养HSFs，采用免疫荧光技术检测细胞中波形蛋白和角蛋白的表达以鉴定细胞；获取8周龄SPF级雄性SD大鼠鼠尾腱制备鼠尾胶原，400 μl胶原加入50 μl NaOH（0.1 mol/L）溶液中混匀，加入80 μl 10倍培养液，混匀，溶液pH值约为7。加入1 100 μl终浓度1×106/ml细胞悬液混合形成凝胶培养系统，于倒置相差显微镜下观察HSFs的增生情况和细胞形态，采用IPP-5软件对三维培养的含细胞胶原收缩面积进行测量以分析三维胶原系统的物理特性；采用生物力学试验机对三维胶原系统的生物力学特性进行测定。 结果培养的HSFs波形蛋白呈阳性表达，角蛋白表达阴性。未接种培养细胞的无成纤维细胞SD鼠鼠尾胶原凝胶透明，实验期间性状无明显变化，而含HSFs的三维胶原凝胶随着细胞培养时间的延长细胞数量增加，倒置相差显微镜下可观察到数十层成纤维细胞相互交错呈网状排列，培养后7～14 d凝胶块呈乳白色，凝胶面积保持在正常的10%左右，三维培养系统中的HSFs接种后24 h细胞产生多向性突起，呈双极形或纺锤形。HSFs胶原凝胶复合物的弹性材料蠕变曲线呈非线性（0～100 s）部分与线性（100～600 s）部分，前者是胶原凝胶在短暂应力的作用下本身的弹性变化，后者是胶原凝胶在定力的作用下随拉伸时间的延长而出现的蠕变变化。 结论鼠胶原凝胶对培养的HSFs有良好的生物相容性，HSFs胶原凝胶可形成三维复合物，可呈现机械性生物学特性，是研究成纤维细胞与细胞外基质之间以及细胞之间相互作用的良好模型，可用于巩膜重塑的模拟研究。

异种胶原蛋白基质与自体结缔组织移植瓣牙周软组织增量效果的系统评价与Meta分析

目的比较异种胶原蛋白基质(XCM)和自体结缔组织移植瓣(CTG)用于牙周软组织增量的效果。方法检索PubMed、Web of Science、EMBASE、Cochrane、CNKI、CBM、万方数据库、中文科技期刊全文数据库,查找利用XCM和CTG进行牙周软组织增量效果的临床随机对照研究。利用RevMan 5.3软件分析、比较两者牙周软组织增量的效果,包括角化龈宽度增量、角化龈厚度增量、平均根面覆盖率和手术时间。结果共纳入10篇临床随机对照研究。Meta分析结果显示,两组患者在术后6个月时角化龈宽度增量及根面覆盖率方面效果的差异无统计学意义(P>0.05),术后12个月时XCM效果不如CTG(P<0.05);术后12个月XCM的角化龈厚度增量效果不如CTG(P<0.05);XCM的手术时间短于CTG(P<0.05)。结论有限的证据表明,在增加角化龈宽度和提高根面覆盖率方面,XCM与CTG无差异;在增加角化龈厚度方面,无足够证据表明XCM不如CTG;但XCM的手术时间显著短于CTG。尚需随访时间更长的、多中心、大样本、前瞻性随机对照临床研究来进一步验证该问题。

视原^(TM)胶原蛋白基质的安全性与有效性能有效提升眼科手术成功率

青光眼(Glaucoma)的病程变化,眼压(Intraocular pressure,IOP)是最重要的风险因素,有效的控制眼压,能避免因视神经受到进一步的伤害而导致失明.青光眼小梁切除术(Trabeculectomy)是目前青光眼降压手术中,效果最显著,也是最直接的滤过性手术(filtering surgery)治疗方式,但常因手术伤口的结痂致使手术失败.癌症用抗代谢药物丝裂霉素(Mitomycin C)能抑制肿瘤细胞增生,被眼科非常规用于预防手术区的瘢痕化.但越来越多的长期追踪文献报导,丝裂霉素会引起许多的严重并发症,其中产生低眼压(Hypotony)和薄壁滤过泡(bleb thinning)及滤泡渗漏的情形为最严重的药物不良反应.为了预防结痂及组织修复,视原TM胶原蛋白基质被临床应用在青光眼手术上.视原TM胶原蛋白基质利用其去端天然胶原蛋白材料特性与三维多孔结构,引导细胞长入并同时避免因细胞紧密增生或线性排列所造成之瘢痕化,调控修复过程以提高青光眼手术的成功率.视原TM胶原蛋白基质的有效性与安全性,已被发表在44篇完整且具有指标性意义的国际文献,收录于5本眼科学术前瞻性国际教科书中.在国际眼科医学研讨会上,也成为各国医师讨论的焦点与议题.直至今年底和明年,包括正在美国八个临床医学研究中心进行的一项大型上市后研究试验案,累计有20个以上的试验案结果产出.从文献与临床试验报告结果,直接证实了视原胶原蛋白基质的有效性及安全性,可以取代丝裂霉素的使用.视原TM胶原蛋白基质的特性可成功应用于预防结痂及任何需要调控组织修复的眼科及其他手术中.

软骨脱细胞基质-Ⅱ型胶原纳米支架复合BMSC修复兔关节软骨缺损的实验研究

目的：观察软骨脱细胞基质（Cartilage acellular extracellular matrix,CAEM）-Ⅱ型胶原（CollagenⅡ,COLⅡ）纳米支架,复合骨髓基质干细胞（Bone marrow stem cells,BMSCs）修复兔关节软骨缺损的效果.方法：CAEM和COLⅡ按1：1比例混合,通过静电纺丝技术制备组织工程纳米支架.将第2代BMSCs种植到该支架上,培养箱内静置2小时.12只新西兰大白兔随机分为观察组和对照组,将细胞支架复合物植入观察组兔膝关节软骨缺损处,对照组仅行膝关节软骨缺损建模.12周后实验动物取材,大体观察修复效果,并行HE染色、Ⅱ型胶原染色观察.结果：大体观察见观察组软骨缺损修复良好,对照组软骨缺损处由肉芽样组织充填.HE染色显示,观察组关节软骨缺损处可见软骨陷窝形成,对照组关节软骨缺损处仅有纤维组织充填.观察组修复区Ⅱ型胶原染色为阳性,对照组为阴性.结论：CAEM-COLⅡ纳米支架复合BMSC,对兔关节软骨缺损具有较好的修复能力,具有潜在的临床应用价值.

氦氖激光对兔退变颞下颌关节髁突软骨基质表达的影响

目的:通过研究氦氖激光对退变颞下颌关节髁突软骨细胞外基质基质胶原2(Col-2)、蛋白多糖4(PRG-4)表达的影响,明确氦氖激光对颞下颌关节退变的保护作用与机制,为临床运用氦氖激光治疗颞下颌关节骨关节病提供依据。方法:将骨骼发育成熟的健康成年雄性新西兰大白兔随机分为正常组、假模型组、模型组和干预组,每组10只,组内又分为造模后第1天、第11天两个取材时间点。参照常嘉等的造模方法,建立颞下颌关节骨关节病动物模型并行CT检查证实造模成功后纳入。干预组采用氦氖激光照射患侧颊车、上关、下关、听宫、翳风穴,5min/穴/d,共10d;假模型组仅作关节囊切开后即缝合组织。各组于不同时间点取出颞下颌关节组织,采用HE染色观察干预前后形态学改变;Western Blot方法检测Col-2、PRG-4的表达水平。结果:退变髁突软骨HE染色可见纤维降解,增殖层及过度层细胞排列紊乱,细胞核出现皱缩,核浓染,经过氦氖激光治疗后的髁突软骨纤维层轻度松解,部分纤维合成,红染增强。Western Blot检测发现正常组及假模型组不同时间点之间Col-2、PRG-4蛋白表达差异无显著性意义;模型组第11天各细胞外基质蛋白表达明显降低;氦氖激光干预10天后各细胞外基质蛋白的表达明显增加。结论:氦氖激光干预可上调退变颞下颌关节软骨细胞外基质Col-2、PRG-4蛋白表达,纠正细胞外基质降解,从而防治颞下颌关节骨关节病。

基于基质金属蛋白酶2、9调控细胞外基质稳态的离心训练干预2型糖尿病研究进展

骨骼肌胰岛素抵抗是2型糖尿病的主要病理性特征,但其发生机制仍不十分清楚。近来研究证实,炎症反应引起的细胞外基质(ECM)胶原纤维沉积导致骨骼肌胰岛素抵抗症状发生,原因与基质金属蛋白酶2、9(MMP-2、9)表达失调有关。鉴于骨骼肌是胰岛素作用的主要靶点,能最大程度吸收和利用脂肪、葡萄糖转运供能,普遍认为运动是预防或治疗2型糖尿病的较好干预措施之一。然而,2型糖尿病患者通常伴有小血管和大血管疾病并发症,进行剧烈运动时很容易出现心血管负荷过载的风险。因此,在具备调控骨骼肌基质金属蛋白酶家族(MMPs)表达量,改善骨骼肌细胞外基质微环境的前提条件下,探讨既可以提高骨骼肌胰岛素敏感性又不诱发心血管负荷过载风险的运动方式具有非常重要的实践意义。本文探讨离心训练干预2型糖尿病的可行性及其运动风险预防优势。结果表明,离心训练能有效增加骨骼肌毛细血管密度、脂肪和葡萄糖代谢量,可能与离心训练通过调控MMP-2、9表达进而改善骨骼肌细胞外基质微环境有关,且由于离心训练时募集的运动单位较少,可以降低运动造成的心血管负荷过载的风险。离心训练干预对2型糖尿病尤其是2型糖尿病血管并发症患者具有独特的降低运动风险的优势。

针刺颈夹脊穴对大鼠退变颈椎间盘Ⅰ、Ⅱ型胶原及髓核超微结构的影响

目的观察针刺颈夹脊穴对大鼠退变颈椎间盘Ⅰ、Ⅱ型胶原及髓核超微结构的影响,探讨针刺治疗椎间盘退变的作用和机理。方法建立大鼠动静力失衡性颈椎间盘退变模型,随机分为对照组、针刺组、药物组,并设空白组对照,针刺组取颈部夹脊穴,药物组采用布洛芬加颈复康灌胃,治疗30d后,取部分椎间盘测Ⅰ、Ⅱ型胶原含量;取部分椎间盘在光镜和电镜下观察组织细胞学变化。结果与椎间盘退变正相关的Ⅰ型胶原含量测定,空白组少于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05),针刺组和药物组少于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);与椎间盘退变负相关的Ⅱ型胶原含量测定,空白组多于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05),针刺组和药物组多于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),其他组间比较无明显差异;光镜、电镜下椎间盘组织细胞学退变程度由轻至重顺序为空白组<针刺组<药物组<模型组;椎间盘胶原测定结果与镜下椎间盘组织细胞学退变程度相一致。结论针刺颈夹脊穴可以通过调控椎间盘细胞外基质胶原系统抑制椎间盘退变。

胶原蛋白Ⅵ在肿瘤中的作用研究进展

胶原蛋白Ⅵ是一种细胞外基质蛋白,在多种肿瘤中高度表达,且与临床不良预后相关。胶原蛋白Ⅵ参与肿瘤的转移与肿瘤的血管重塑,并且通过募集巨噬细胞促进肿瘤炎症。胶原蛋白Ⅵ通过与细胞外基质其他组分相互作用、刺激信号传导及促进肿瘤代谢重编程,有利于肿瘤的生长。通过肿瘤坏死因子β途径减弱肿瘤对程序性死亡[蛋白]-1抑制剂的反应或上调程序性死亡[蛋白]配体-1/程序性死亡[蛋白]-1,参与肿瘤的免疫逃逸。此外,胶原蛋白Ⅵ可以促进化疗耐药,这些发现均表明胶原蛋白Ⅵ在肿瘤进展中的重要作用,为癌症的诊断生物学标志物和癌症治疗靶点的研究提供另一条途径。

厄贝沙坦对糖尿病大鼠肺脏组织中胶原和基质金属蛋白酶相关因子的影响

目的观察厄贝沙坦是否对抗糖尿病大鼠肺损伤,探讨大鼠肺组织胶原和基质金属蛋白酶(MMPs)通路中相关因子的变化。方法雄性SD大鼠随机分为对照组(NC)、T2DM组、厄贝沙坦+糖尿病组(Ir+T2DM)。8周后测定各组FPG、TG和TC,HE和Masson染色观察肺组织形态、纤维化改变。ELISA测定肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2含量,Western blot检测MT1-MMP蛋白的表达。结果与NC组比较,T2DM组FPG、TG和TC水平增高,肺泡结构大部分消失,胶原增生,肺组织MMP-2、MMP-9水平下降,TIMP-1、TIMP-2水平升高,MT1-MMP蛋白表达较NC组增加(P<0.05或P<0.01)。与T2DM组比较,Ir+T2DM组肺组织形态和纤维增生改善,MMP-2、MMP-9水平增加,TIMP-1、TIMP-2水平降低,MT1-MMP蛋白表达降低(P<0.05)。结论 T2DM可诱导肺脏损伤,厄贝沙坦通过调节MMPs信号通路中的相关因子,减轻肺损伤。

结缔组织与肉质(下)

2.5.热学特性胶原蛋白在加热后变性,并因为它的部分结晶态特性而在65℃左右收缩形成不溶解的明胶.此时.胶原蛋白原有的不可伸张、组织紧凑的纤维转变成杂乱组成的弹性纤维.胶原蛋白的溶解、收缩而引起的张力强度是由其交联性质所决定.已证实,脱氢—HLNL交联遇热不稳定,在超过最高张力时容易断裂导致张力大幅度下隆。

胶原蛋白基质在青光眼滤过手术中作用的研究进展

滤过道瘢痕化是青光眼滤过性手术失败的最主要原因。胶原蛋白基质（视原）是由胶原蛋白及葡糖氨基葡聚糖聚合物组成的可降解的三维多孔结构，通过植入巩膜瓣上结膜下空间可调控伤口愈合，减少瘢痕形成，从而提高手术成功率，同时避免了使用抗代谢药物的毒副反应。本文将对其在抗青光眼术中的作用机制、使用方法、疗效及安全性及作一综述。

基质金属蛋白酶与主动脉夹层发病关系的研究进展

主动脉夹层是一种严重威胁人类生命健康的心血管疾病,常伴有较高的死亡率及并发症率,但目前其发病原因仍不明确。文献报道主动脉夹层的发病与主动脉中层退行变有关,而基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinase,MMP)在细胞外基质代谢过程中发挥重要作用,其活性或含量增加可引起主动脉中层结构蛋白的过度降解,参与主动脉中层退行变,初步表明基质金属蛋白酶在主动脉夹层发病过程中可能发挥重要作用。本文就近年来有关MMP与主动脉夹层发病关系的研究进行综述。