脂肪组织中血管基质部分细胞向内皮细胞诱导分化的实验研究

目的探讨脂肪组织中血管基质部分(Stromal vascular fraction,SVF)细胞向内皮细胞诱导分化的方法。方法脂肪抽吸术获取人脂肪组织,消化法得到的细胞接种在FN包被的培养皿内,细胞培养,传至第2代,分诱导组和非诱导组进行培养。免疫细胞荧光分别检测诱导组和非诱导组的vWF表达;流式细胞仪分别检测诱导组和非诱导组的CD34、CD45、CD133和PECAM-1表达率;荧光显微镜观察细胞摄取DiI-ac-LDL的功能。结果诱导组细胞12d后呈现内皮细胞典型的铺路石样形态;免疫细胞荧光显示诱导组vWF表达阳性;荧光显微镜观察显示诱导组细胞具有摄取DiI-ac-LDL的功能;流式细胞仪检测显示诱导组PECAM-1阳性率为(67.41±13.35)%,明显高于非诱导组的(6.73±2.21)%(p<0.01),非诱导组CD34阳性率(72.39±13.45)%,明显高于诱导组的(16.06±3.86)%阳性率(p<0.01)。结论脂肪组织中血管基质部分细胞能够诱导分化为成熟内皮细胞,有望为血管组织工程提供新的种子细胞来源。

脂肪源性血管基质部分的研究进展

近年来,基质血管部分SVF(stromal vascular fraction)已进一步成为干细胞研究、再生医学和脂肪移植的热点。SVF是一个异质的细胞群,含有丰富的脂肪源性干细胞ADSCs(adipose-derived stem cells),一直以来多被当作ADSCs的载体,或提取ADSCs的中间步骤。但在某些条件下,SVF的作用可以优于ADSCs。本文就SVF的生理特性、作用机制、提取过程及临床应用做一综述。

脂肪组织血管基质部分中克隆形成细胞治疗膝骨关节炎的能力

背景:脂肪组织消化后得到的血管基质部分是多种细胞的混合体,其中以克隆样生长的细胞组分可能是真正具有"干性"维持能力的脂肪间充质干细胞。目的:分离、传代、培养脂肪组织血管基质部分中的克隆形成细胞,并检测其在动物模型中修复膝关节软骨的能力。方法:培养新鲜分离得到的脂肪组织血管基质部分,挑选其中以克隆样生长的贴壁细胞,消化、传代、培养至第3代。通过手术建立骨关节炎兔模型,将第3代克隆形成细胞移植入模型兔关节腔,与未进行细胞移植治疗的模型兔进行比较,观察兔膝关节软骨的再生情况。结果与结论:脂肪组织中血管基质部分细胞接种后第3天,贴壁细胞中出现克隆样生长的细胞集落,生长至第5天时,克隆样生长的细胞集落数和周围的单个细胞数均增加,传代至第3代时,仍然呈克隆样的集落生长,梭形形态。大体观察和MRI检查此类克隆形成细胞能在关节腔内帮助软骨修复,增加滑液分泌,同时有助于控制炎症,溃疡面积呈缩小趋势。实验结果有助于优化脂肪间充质干细胞的体外分离、培养体系,并为临床上治疗骨关节炎提供了新的思路。

血管基质部分与神经肽Y联合应用对颗粒脂肪移植存活率的影响

目的 观察脂肪组织中血管基质部分（SVF）与神经肽Y联合应用对颗粒脂肪移植存活率的影响.方法 从兔脂肪组织提取SVF,混合成熟颗粒脂肪组织,自体移植到兔背部皮下,同时种植含有或不含有神经肽Y的小球,于2周、1、3个月后通过大体观察、B超、组织学、免疫组织化学法分组对照来评价脂肪颗粒的存活情况;同法将人体SVF与脂肪颗粒混合物联合神经肽Y异体移植到无胸腺小鼠皮下,观察并评价人体脂肪细胞在无胸腺小鼠的存活.结果 联合应用组脂肪移植存活率（＞80％）明显高于其他对照组（＜66％）,SVF和神经肽Y可以刺激脂肪组织的生长,并且可以增加3个月兔和无胸腺小鼠异体脂肪移植物的存活和血供.结论 SVF与神经肽Y联合应用在体内脂肪生成中起关键作用,可增加脂肪移植存活或者刺激重新脂肪生成,明显提高颗粒脂肪移植的存活率.

自体脂肪移植治疗瘢痕的研究进展

皮肤受损伤或者感染后,局部会产生炎症反应,炎症因子促进成纤维细胞增殖及分泌胶原而形成瘢痕。瘢痕不仅可能引起疼痛、瘙痒等症状,还有可能影响外观,关节部位的瘢痕甚至会影响正常运动功能。目前,瘢痕的常用治疗方法有瘢痕内药物注射、放射治疗、压力疗法、光电治疗及手术治疗等,这些方法各有优缺点,人们对瘢痕的治疗方法仍在探索中。自体脂肪移植是将自体抽吸所得的脂肪,经过提纯处理后,植入治疗受区的一种方法,自体脂肪移植具有安全,简单,成本低和易于获得等优点。由于吸脂技术及提纯技术的提升,自体脂肪移植在整形外科领域得到了广泛的应用。研究发现脂肪组织、脂肪干细胞(ADSCs)及其分泌的细胞因子对瘢痕的治疗有积极作用,目前已成为一种有前景的治疗方法,现回顾近年文献,将自体脂肪移植治疗瘢痕的研究进展综述如下。

改良推注方法制备脂肪移植SVF胶的实验研究

目的探讨改良推注法与常规推注法制备基质血管成分(stromal vascular fraction, SVF)胶的效果。方法分别采用改良推注法和常规推注法从抽吸获取的脂肪组织中分离制备SVF胶,并对所获取的SVF胶进行细胞计数、增殖率、细胞成活率、细胞碎片率等生物学特性进行检测。结果改良推注法获取的SVF胶的细胞成活率较高(P<0.05),细胞凋亡、细胞碎片率显著低于常规推注法(P<0.05)。结论采用改良推注法制备脂肪移植SVF胶更加快捷、方便,并且可提高移植细胞的成活率、降低细胞碎片率,在疾病治疗及创伤修复中有较好的应用前景。

组织工程化脂肪填充材料的构建及脂肪颗粒存活研究

目的研究组织工程化脂肪填充材料的构建及脂肪颗粒存活情况。方法从兔脂肪组织提取血管基质部分（SVF）混合自体成熟脂肪颗粒，加或不加入生长因子神经肽Y（NPY），构建聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）组织移植复合体，并移植到兔背部皮下，同时进行对照实验。按不同组合分5组：A组为PLGA＋成熟脂肪颗粒＋无NPY小球；B组为PLGA＋成熟脂肪颗粒＋NPY小球；C组为PLGA＋SVF与成熟脂肪颗粒混合物＋无NPY小球；D组为PLGA＋SVF与成熟脂肪颗粒混合物＋NPY小球；E组为SVF与成熟脂肪颗粒混合物＋NPY小球。于2周、1个月、3个月后通过大体观察、组织学、荧光示踪等方法来评价不同构建方式的差异及脂肪颗粒的存活情况。结果D组1个月、3个月时在存活体积、质地、再血管化程度方面均优于A组、B组、C组、E组，脂肪平均存活率（57．5±2．5）%，脂肪细胞生长良好，前体细胞增殖分化活跃。结论以SVF，成熟脂肪颗粒，PLGA和NPY成功构建了性能良好的组织工程材料，明显提高脂肪颗粒移植效果。