基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)是一种可以对多种微生物(包括细菌、酵母和丝状真菌)进行常规鉴定的强有力工具。具有快速、准确、高...基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)是一种可以对多种微生物(包括细菌、酵母和丝状真菌)进行常规鉴定的强有力工具。具有快速、准确、高通量及成本低廉等特点,逐渐被用于丝状真菌感染的实验室诊断中。在丝状真菌的MALDI-TOF MS分析中,从样本制备到获得准确的鉴定结果,每个步骤都决定了医技人员能否及时为临床医生提供准确结果。现就待测样品的制备及MALDI-TOF MS技术对丝状真菌分析(包括鉴定、分型、抗真菌敏感性测试方面)的应用及前景作一系统综述,也将对其一些未来发展进行展望。展开更多
目前，临床微生物实验室鉴定细菌主要依赖于传统的生物化学、分子生物学和形态学等方法［1］。基于单菌落的生化特征鉴定耗时长，不能满足临床对检测结果时效性的要求；基于分子生物学方法进行微生物鉴定大大地提高了灵敏度和时效性，...目前，临床微生物实验室鉴定细菌主要依赖于传统的生物化学、分子生物学和形态学等方法［1］。基于单菌落的生化特征鉴定耗时长，不能满足临床对检测结果时效性的要求；基于分子生物学方法进行微生物鉴定大大地提高了灵敏度和时效性，但对工作人员技术要求高，检测成本高，仅针对某些特定细菌，难以满足临床常规要求［2］。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption ／ionizationtime -of -flight mass spectrometry，MALDI -TOF MS）以其操作简便、自动化、快速、高通量等优势受到青睐，成为了一种新的微生物鉴定方法。由于仪器昂贵，一次性投入成本高，MALDI -TOF MS 在国外临床微生物实验室的应用尚未普及，而在国内临床微生物检验中的应用刚刚起步。MALDI -TOF MS 以其固有的优势进入临床微生物诊断，将彻底改变微生物实验室的面貌。因此，了解并引进该技术用于快速低成本鉴定临床分离菌株是国内临床微生物工作者的迫切需要。本文就该技术和两种常用质谱系统在临床微生物实验室用于鉴定各种常见或重要细菌和真菌纯菌落，以及应用该技术直接检测临床标本中的细菌和真菌等方面作一综述，以便国内临床微生物工作者初步了解MALDI -TOF MS 在临床微生物诊断的应用和价值，并且基于实验室情况选择合适的质谱系统。展开更多
表面辅助激光解吸附/离子化质谱(Surface-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry,SALDI-MS)是一种利用无机纳米粒子或纳米结构表面作为基质,辅助待测分子的解吸附和离子化的质谱技术。由于其具有灵敏度高、耐盐性好...表面辅助激光解吸附/离子化质谱(Surface-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry,SALDI-MS)是一种利用无机纳米粒子或纳米结构表面作为基质,辅助待测分子的解吸附和离子化的质谱技术。由于其具有灵敏度高、耐盐性好、操作简便、重现性好、检测通量高等优势,已经被广泛应用于食品安全、环境监测、生命科学等诸多领域。该文总结了近5年来,SALDI基质材料(金属及金属氧化物材料、碳材料、硅材料、金属有机骨架化合物材料等)的最新研究进展及其在生物检测领域中的应用,并对SALDI-MS基质材料的发展及应用进行了展望。展开更多
Erythropoietin (EPO) is a glycoprotein with three N-glycosylation sites and one O-glycosylation sites. According to the reference, all of the N-glyco-chains were acid complex type. The amount of sialic acid in rhEPO w...Erythropoietin (EPO) is a glycoprotein with three N-glycosylation sites and one O-glycosylation sites. According to the reference, all of the N-glyco-chains were acid complex type. The amount of sialic acid in rhEPO was determined and two N-glycosylation sites on it were confirmed by matrix-assisted laser desorption time of flight-time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF-TOFMS) in this paper. The total amount of sialic acid in rhEPO accounts for 12.97%. Two N-glycosylation sites (Asn38,Asn83) were identified successfully.展开更多
选用肽质量指纹谱(peptide mass fingerprint,PMF)技术鉴定质谱纯海兔肝铁蛋白(liver ferritin ofAplysia,ALF)。来源于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)仪中的激光和基质芥子酸协同解吸海兔肝铁蛋白(ALF)为带双电荷、...选用肽质量指纹谱(peptide mass fingerprint,PMF)技术鉴定质谱纯海兔肝铁蛋白(liver ferritin ofAplysia,ALF)。来源于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)仪中的激光和基质芥子酸协同解吸海兔肝铁蛋白(ALF)为带双电荷、单电荷[M+H]+和二聚体的亚基离子,并可供质谱分析。ALF亚基的质荷比m/z分别为9784.03[M+2H]2+、19678.42[M+H]+和39387.80[2M+H]+,其中亚基分子量[M+H]+略小于鲨鱼肝铁蛋白(liver ferritin of shark,SLF)。在弱碱介质(pH8.0)条件下,电子光谱技术研究指出,抗坏血酸以1/2级反应方式参与ALF释放铁全过程,同时又使ALF以一级反应动力学方式释放铁,呈现两种不同的速率。推测这一异常现象可能与ALF含低铁量、亚基调节能力和海兔的进化地位有关。展开更多
基金国家自然科学基金重点项目(No.81891012)国家重大新药创制专项(No.2018ZX09711001-009)+3 种基金国家重点研发计划(No.2017YFC1702504)中国医学科学院重点实验室课题(No.2018PT35030)国家重点研发项目(No.2018YFC1707408)CAMS Innovation Fund for Medical Sciences(CIFMS)(No.2016-I2M-1-012)。
文摘目前，临床微生物实验室鉴定细菌主要依赖于传统的生物化学、分子生物学和形态学等方法［1］。基于单菌落的生化特征鉴定耗时长，不能满足临床对检测结果时效性的要求；基于分子生物学方法进行微生物鉴定大大地提高了灵敏度和时效性，但对工作人员技术要求高，检测成本高，仅针对某些特定细菌，难以满足临床常规要求［2］。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption ／ionizationtime -of -flight mass spectrometry，MALDI -TOF MS）以其操作简便、自动化、快速、高通量等优势受到青睐，成为了一种新的微生物鉴定方法。由于仪器昂贵，一次性投入成本高，MALDI -TOF MS 在国外临床微生物实验室的应用尚未普及，而在国内临床微生物检验中的应用刚刚起步。MALDI -TOF MS 以其固有的优势进入临床微生物诊断，将彻底改变微生物实验室的面貌。因此，了解并引进该技术用于快速低成本鉴定临床分离菌株是国内临床微生物工作者的迫切需要。本文就该技术和两种常用质谱系统在临床微生物实验室用于鉴定各种常见或重要细菌和真菌纯菌落，以及应用该技术直接检测临床标本中的细菌和真菌等方面作一综述，以便国内临床微生物工作者初步了解MALDI -TOF MS 在临床微生物诊断的应用和价值，并且基于实验室情况选择合适的质谱系统。
文摘表面辅助激光解吸附/离子化质谱(Surface-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry,SALDI-MS)是一种利用无机纳米粒子或纳米结构表面作为基质,辅助待测分子的解吸附和离子化的质谱技术。由于其具有灵敏度高、耐盐性好、操作简便、重现性好、检测通量高等优势,已经被广泛应用于食品安全、环境监测、生命科学等诸多领域。该文总结了近5年来,SALDI基质材料(金属及金属氧化物材料、碳材料、硅材料、金属有机骨架化合物材料等)的最新研究进展及其在生物检测领域中的应用,并对SALDI-MS基质材料的发展及应用进行了展望。
文摘Erythropoietin (EPO) is a glycoprotein with three N-glycosylation sites and one O-glycosylation sites. According to the reference, all of the N-glyco-chains were acid complex type. The amount of sialic acid in rhEPO was determined and two N-glycosylation sites on it were confirmed by matrix-assisted laser desorption time of flight-time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF-TOFMS) in this paper. The total amount of sialic acid in rhEPO accounts for 12.97%. Two N-glycosylation sites (Asn38,Asn83) were identified successfully.
文摘选用肽质量指纹谱(peptide mass fingerprint,PMF)技术鉴定质谱纯海兔肝铁蛋白(liver ferritin ofAplysia,ALF)。来源于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)仪中的激光和基质芥子酸协同解吸海兔肝铁蛋白(ALF)为带双电荷、单电荷[M+H]+和二聚体的亚基离子,并可供质谱分析。ALF亚基的质荷比m/z分别为9784.03[M+2H]2+、19678.42[M+H]+和39387.80[2M+H]+,其中亚基分子量[M+H]+略小于鲨鱼肝铁蛋白(liver ferritin of shark,SLF)。在弱碱介质(pH8.0)条件下,电子光谱技术研究指出,抗坏血酸以1/2级反应方式参与ALF释放铁全过程,同时又使ALF以一级反应动力学方式释放铁,呈现两种不同的速率。推测这一异常现象可能与ALF含低铁量、亚基调节能力和海兔的进化地位有关。
