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基质辅助激光解吸附飞行时间质谱分析缩合单宁的阳离子化问题 被引量:13
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作者 向平 林益明 +1 位作者 林鹏 向成 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第7期1019-1022,共4页
以单价金属离子Cs+和Na+作为离子化试剂,对3种缩合单宁进行基质辅助激光解吸附飞行时间(MALD I-TOF)质谱分析。加入Na+作为阳离子化试剂,能得到较高质量的质谱图。但由于实验通道中几乎不可能完全去除的K+的干扰而会高估棓儿茶酚/表棓... 以单价金属离子Cs+和Na+作为离子化试剂,对3种缩合单宁进行基质辅助激光解吸附飞行时间(MALD I-TOF)质谱分析。加入Na+作为阳离子化试剂,能得到较高质量的质谱图。但由于实验通道中几乎不可能完全去除的K+的干扰而会高估棓儿茶酚/表棓儿茶酚单元的组成比例,从而影响对棓儿茶酚/表棓儿茶酚单元存在与否的判断;选择Cs+作为阳离子化试剂可以避免此问题,但在复杂的缩合单宁分析中,同样因为杂质离子Na+和K+的干扰而使得质谱图变得更复杂;未去离子处理直接对缩合单宁进行MALD I-TOF质谱分析与去离子并加入Cs+的处理比去离子并加入Na+能检测到更高聚合度的高聚物,检测到离子峰强度最高的聚合物随离子不同而不同。 展开更多
关键词 缩合单宁 辅助激光吸附飞行时间 黄烷-3-醇单元 聚合度
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基质辅助激光解析电离-串联飞行时间质谱与电喷雾离子化-四极杆-飞行时间质谱分析蛋白质 被引量:3
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作者 倪国新 朱镭 +4 位作者 马小土 徐学敏 胡晓芳 刘建华 李伟 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1291-1296,共6页
为比较基质辅助激光解析电离-串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF)和电喷雾离子化-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF)在蛋白质定性和定量分析方面的性能,分别利用两种仪器对用于相对和绝对定量的等量异位标签(iTRAQ)标记的雌激素刺激前后MCF... 为比较基质辅助激光解析电离-串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF)和电喷雾离子化-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF)在蛋白质定性和定量分析方面的性能,分别利用两种仪器对用于相对和绝对定量的等量异位标签(iTRAQ)标记的雌激素刺激前后MCF7细胞内的蛋白质水解产生的多肽进行了定性和定量分析。结果表明,用MALDI-TOF-TOF和ESI-Q-TOF方法分别鉴定出1086种和848种蛋白质,其中相同的蛋白质为633种;MALDI-TOF-TOF和ESI-Q-TOF方法分别找到38种和33种表达差异在0.5倍以上的蛋白质,其中3种为相同的蛋白质。实验数据说明,两种仪器在蛋白质定性和定量分析方面有很大的互补性,将两种仪器结合使用,不仅能够显著提高蛋白质定性和定量分析的覆盖率,而且可提高分析的置信度。 展开更多
关键词 等量异位标签 辅助激光析电离-串联飞行时间 电喷雾离子化-四极杆-飞行时间 定性分析 定量分析
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联合磁性微球和基质辅助的激光解吸/离子化-飞行时间质谱筛选肾细胞癌血清差异蛋白 被引量:2
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作者 柳金顺 李汉忠 +4 位作者 张玉石 王澎 严维刚 谢静 董德鑫 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期287-291,共5页
目的采用联合磁性微球和基质辅助的激光解吸/离子化-飞行时间(MALDI-TOF-MS)技术筛选肾细胞癌患者血清差异蛋白峰。方法采用弱阳离子磁性微球从99份血清标本(肾细胞癌62份,肾脏良性占位病变37份)捕获血清蛋白,MALDI-TOF-MS质谱仪检测蛋... 目的采用联合磁性微球和基质辅助的激光解吸/离子化-飞行时间(MALDI-TOF-MS)技术筛选肾细胞癌患者血清差异蛋白峰。方法采用弱阳离子磁性微球从99份血清标本(肾细胞癌62份,肾脏良性占位病变37份)捕获血清蛋白,MALDI-TOF-MS质谱仪检测蛋白峰,Biomarker Wizard 3.1和Biomarker Patterns Software 5.0分析数据,以47例肾细胞癌及26例肾脏良性占位病变标本建立肾细胞癌诊断模型,15例肾细胞癌和11例肾脏良性占位病变标本进行盲法验证。结果发现7个蛋白峰具有统计学差异(P<0.05),以质荷比2945.35、15340.8、6984.51、5819.23的4个蛋白峰建立肾细胞癌诊断模型,该模型区分肾细胞癌与肾脏良性占位病变的敏感性为83.0%,特异性为84.6%;盲法验证,该模型诊断肾细胞癌的敏感性为80.0%,特异性为81.8%。结论采用磁性微球与MALDI-TOF-MS技术可以检测肾细胞癌血清中的差异蛋白峰,并建立敏感性、特异性较高的肾细胞癌诊断模型。 展开更多
关键词 肾细胞癌 磁性微球 辅助激光/离子化-飞行时间
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新型表面辅助激光解吸附/离子化质谱基质及其在生物检测中的应用 被引量:3
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作者 马雯 白玉 刘虎威 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期1-9,共9页
表面辅助激光解吸附/离子化质谱(Surface-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry,SALDI-MS)是一种利用无机纳米粒子或纳米结构表面作为基质,辅助待测分子的解吸附和离子化的质谱技术。由于其具有灵敏度高、耐盐性好... 表面辅助激光解吸附/离子化质谱(Surface-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry,SALDI-MS)是一种利用无机纳米粒子或纳米结构表面作为基质,辅助待测分子的解吸附和离子化的质谱技术。由于其具有灵敏度高、耐盐性好、操作简便、重现性好、检测通量高等优势,已经被广泛应用于食品安全、环境监测、生命科学等诸多领域。该文总结了近5年来,SALDI基质材料(金属及金属氧化物材料、碳材料、硅材料、金属有机骨架化合物材料等)的最新研究进展及其在生物检测领域中的应用,并对SALDI-MS基质材料的发展及应用进行了展望。 展开更多
关键词 表面辅助激光吸附/离子化谱(SALDI-MS) 生物检测 纳米材料
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基质辅助激光解吸附电离-飞行时间串联质谱研究重组人促红细胞生成素一级结构 被引量:9
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作者 卢庄 王杉 +7 位作者 代景泉 王京兰 张养军 应万涛 徐友宣 钱小红 吴侔天 蔡耘 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第5期591-597,共7页
建立了生物质谱研究rhEPO一级结构的系列方法,包括分子量、唾液酸含量以及N-糖含量等糖基化性质的测定方法,并用于4种国产rhEPO样品的分析;在此基础上优化酶切条件,使测定的肽质量指纹谱(PMF)的覆盖率均达到98%,成功鉴定了4个样品中的全... 建立了生物质谱研究rhEPO一级结构的系列方法,包括分子量、唾液酸含量以及N-糖含量等糖基化性质的测定方法,并用于4种国产rhEPO样品的分析;在此基础上优化酶切条件,使测定的肽质量指纹谱(PMF)的覆盖率均达到98%,成功鉴定了4个样品中的全部N-糖基化位点以及对分子中两对二硫键进行了结构确证,测定4个样品分子量分别为27754.1±27.4Da、27941.4±23.2Da、27682.5±22.0Da和27914.7±22.5Da;唾液酸含量分别为5.0%、4.8%、5.6%和5.4%;糖含量分别为34.3%、34.7%、34.1%和34·6%。此外还对4种产品在O-连接糖型及N-连接糖型上的区别做了初步探讨。 展开更多
关键词 辅助激光吸附电离-飞行时间串联 重组人促红细胞生成素 量指纹谱 二硫键 N-连接糖化位点 糖型结构
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基质辅助激光解吸附飞行时间质谱方法分析山竹果皮缩合单宁 被引量:6
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作者 周海超 魏淑东 +1 位作者 李敏 林益明 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1492-1496,共5页
在反射模式(Reflectron modes)下,去离子处理后,引入Cs+(CsCl,1.52g/L)作为阳离子化试剂,得到清晰的山竹果皮缩合单宁的MALDI-TOF质谱图。解析该质谱图能得到完整的山竹果皮缩合单宁的结构信息:山竹果皮缩合单宁是从三聚体(m/z999)到十... 在反射模式(Reflectron modes)下,去离子处理后,引入Cs+(CsCl,1.52g/L)作为阳离子化试剂,得到清晰的山竹果皮缩合单宁的MALDI-TOF质谱图。解析该质谱图能得到完整的山竹果皮缩合单宁的结构信息:山竹果皮缩合单宁是从三聚体(m/z999)到十一聚体(m/z3303)分布的多聚物,离子峰最强的为五聚体(m/z1575);同时存在3种结构单元:(表)儿茶素(C/EC)、(表)棓儿茶素(GC/EGC)和(表)阿福豆素(AC/EAC),且C/EC、AC/EAC和GC/EGC的离子峰强度依次降低,同时在四聚体(m/z1440)到七聚体(m/z2303)均存在棓酰基;从四聚体(m/z1285)到八聚体(m/z2436),不同的聚合物中普遍存在A型连接。本研究优化了获取植物缩合单宁结构信息的基质辅助激光解吸附飞行时间质谱方法。 展开更多
关键词 山竹果皮 缩合单宁 辅助激光吸附飞行时间 离子化试剂 多聚物
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基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱在临床病毒学中的应用 被引量:2
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作者 程敬伟 王贺 徐英春 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期685-686,共2页
基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是一种新型的微生物鉴定技术,具有准确、快速、高通量等特点,目前在细菌和真菌的鉴定方面已比较成熟,但在病毒方面应用较少。本文从病毒的诊断、分型及耐药基因检测3个方面对MALDI-TOF... 基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是一种新型的微生物鉴定技术,具有准确、快速、高通量等特点,目前在细菌和真菌的鉴定方面已比较成熟,但在病毒方面应用较少。本文从病毒的诊断、分型及耐药基因检测3个方面对MALDI-TOF MS在临床病毒学中的应用作一综述。 展开更多
关键词 辅助激光吸附电离飞行时间 病毒 诊断 分型
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3,4-二氨基苯基苯甲酮在基质辅助激光解析离子化质谱分析磷脂中的应用 被引量:3
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作者 苗楠 张宇 +1 位作者 张建业 邹汉法 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2011年第5期605-610,共6页
考察了3,4-二氨基苯基苯甲酮(DABP)作为基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)新型基质分析磷脂的能力。与传统基质2,4,6-三羟基苯乙酮(THAP)、2,5-二羟基苯甲酸(DHB)、α-氰基-4-羟基肉桂酸(CHCA)相比,用优化后的DABP基质... 考察了3,4-二氨基苯基苯甲酮(DABP)作为基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)新型基质分析磷脂的能力。与传统基质2,4,6-三羟基苯乙酮(THAP)、2,5-二羟基苯甲酸(DHB)、α-氰基-4-羟基肉桂酸(CHCA)相比,用优化后的DABP基质溶液体系MeOH-H2O-HCl(80∶20∶3,V/V)分析不同种类的磷脂,可以有效抑制碱金属离子加成现象,得到单一的质子加成峰。样品信号强,所需激光能量低,卵磷脂(PC)的检出限可达到500 fmol。在实际样品鸡蛋和大豆提取物分析过程中,DABP基质对磷脂分子具有良好的分辨率,碎片峰少,谱图背景干净,样品制备方法简单省时。 展开更多
关键词 辅助激光离子化飞行时间 3 4-二氨苯甲酮 磷脂
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术研究人血清转铁蛋白稳定性及裂解产物 被引量:5
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作者 卓慧钦 金宏伟 +2 位作者 黄河清 黄慧英 蔡宗苇 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第6期791-796,共6页
制备质谱纯人血清转铁蛋白(HTF),供分子结构分析。选用SDS-PAGE、胶外酶解、基质辅助激光解吸/电离质谱技术(MALDI-TOF)、数据库检索和比对技术鉴定铁饱和HTF、双铁HTF(HTF-2Fe3+)、单铁HTF(HTF-Fe3+)和脱铁HTF(apoHTF)的稳定性和裂解... 制备质谱纯人血清转铁蛋白(HTF),供分子结构分析。选用SDS-PAGE、胶外酶解、基质辅助激光解吸/电离质谱技术(MALDI-TOF)、数据库检索和比对技术鉴定铁饱和HTF、双铁HTF(HTF-2Fe3+)、单铁HTF(HTF-Fe3+)和脱铁HTF(apoHTF)的稳定性和裂解产物。以乙腈溶液作为洗脱相,发现铁饱和HTF在RP-HPLC分离纯化过程中产生裂解现象。铁饱和HTF和HTF-2Fe3+经乙腈处理后均能产生不同分子量的短肽裂解产物,指出HTF结构稳定性与络合铁离子数量有关。铁组分改善了HTF分子结构的稳定性。采用比对法,研究在乙腈作用下HTF裂解成为各种各样短肽的规律,初步阐明其裂解机理。在乙腈作用下,HTF可能通过蛋白质去折叠途径,形成不同多聚态HTF或多肽裂解产物。推测目前用于临床诊断先天性糖基化紊乱(CDG)和慢性酒精滥用(CAA)疾病低准确率的起因可能是受HTF裂解产物或多聚体的干扰。 展开更多
关键词 血清转铁蛋白 辅助激光吸电离飞行时间 胶内酶 反相高效液相色谱 标志蛋白
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基质辅助激光解吸附飞行时间串联质谱法测定rhEPO唾液酸含量及鉴定糖基化位点
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作者 卢臣 蔡耘 +3 位作者 代景泉 王京兰 张养军 钱小红 《质谱学报》 EI CAS CSCD 2004年第B10期139-140,共2页
Erythropoietin (EPO) is a glycoprotein with three N-glycosylation sites and one O-glycosylation sites. According to the reference, all of the N-glyco-chains were acid complex type. The amount of sialic acid in rhEPO w... Erythropoietin (EPO) is a glycoprotein with three N-glycosylation sites and one O-glycosylation sites. According to the reference, all of the N-glyco-chains were acid complex type. The amount of sialic acid in rhEPO was determined and two N-glycosylation sites on it were confirmed by matrix-assisted laser desorption time of flight-time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF-TOFMS) in this paper. The total amount of sialic acid in rhEPO accounts for 12.97%. Two N-glycosylation sites (Asn38,Asn83) were identified successfully. 展开更多
关键词 辅助激光吸附飞行时间串联 唾液酸 含量测定 化位点鉴定 重组促红细胞生成素 糖蛋白
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对分枝杆菌液体培养系统菌种鉴定的临床研究 被引量:7
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作者 杜岩青 秦中华 张丽霞 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期871-877,共7页
目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)对Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养出的阳性培养物进行高通量、快速、准确的菌种鉴定,为... 目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)对Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养出的阳性培养物进行高通量、快速、准确的菌种鉴定,为临床早期、精准治疗提供病原学依据。方法选取我院Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960分枝杆菌快速液体培养的阳性培养物为研究对象,通过不同的孵育时间、不同大小的研磨珠处理、不同的破壁方式摸索出MALDI-TOF MS对Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960阳性培养物鉴定的"最优处理方法",并将所有结果与基因芯片法菌种鉴定做参照进行比对,鉴定不一致的结果通过基因测序确认。结果Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养报阳性后增加孵育时间可提高检出率及鉴定分值,同时使用0.5 mm的氧化锆珠研磨,使用超声震荡混匀处理,鉴定效果最佳。鉴定结果方面,液体系统报阳的420份阳性标本,基因芯片法鉴定结果为结核分枝杆菌占69.05%(290/420),非结核菌占28.81%(121/420),9例未鉴定出,未鉴定占2.14%(9/420),错误鉴定占0.95%(4/420),总鉴定率为97.86%(411/420);采用MALDI-TOF MS质谱鉴定420份阳性标本中鉴定出419例,其中结核分枝杆菌占69.05%(290/420),非结核占30.00%(126/420),星型奴卡菌0.48%(2/420),巴西奴卡菌占0.24%(1/420),1例未鉴定出,总鉴定率为99.76%。质谱鉴定分值≥2.0的400例占95.24%,分值在1.7~2.0的19例占4.52%,分值<1.7的1例占0.24%。结论本实验实现了Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养阳性培养物的直接质谱鉴定,缩短了培养鉴定的时间,将分枝杆菌鉴定到种水平,能区分出结核菌与非结核菌,同时也能将与分枝杆菌相似的奴卡菌鉴定出来,对临床疾病的鉴别诊断起到了积极的作用。 展开更多
关键词 Bactec^(TM)MGIT^(TM)960液体培养 辅助激光吸附电离飞行时间谱技术 结核分枝杆菌 非结核分枝杆菌
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糖基转移酶反应的基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法监测 被引量:2
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作者 周大炜 刘斌 +2 位作者 吴俊丽 胡波 齐源远 《质谱学报》 EI CAS CSCD 2011年第4期193-199,共7页
以wabD(大肠杆菌O77中O抗原基因簇内)编码的α-1,3-甘露糖转移酶、wfgD(大肠杆菌O152中O抗原基因簇内)编码的β-1,3-葡萄糖转移酶和wfeD(志贺氏菌鲍氏O14中O抗原基因簇内)编码的β-1,4-半乳糖基转移酶酶促反应产物为研究对象,尝试应用... 以wabD(大肠杆菌O77中O抗原基因簇内)编码的α-1,3-甘露糖转移酶、wfgD(大肠杆菌O152中O抗原基因簇内)编码的β-1,3-葡萄糖转移酶和wfeD(志贺氏菌鲍氏O14中O抗原基因簇内)编码的β-1,4-半乳糖基转移酶酶促反应产物为研究对象,尝试应用碰撞诱导解离(CID)负离子模式基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术建立简单、高效的糖基转移酶监测方法。该方法首先直接用质谱分析0.3μL未经色谱分离、除盐处理的反应混合物,随后应用CID串联质谱技术对酶活反应产物进行结构表征,实现酶活反应的快速检测。研究结果表明,CID MALDI-TOF MS平台适用于新建克隆的糖基转移酶酶活反应的监测,与现有的高通量方法相比,在速度、灵敏度、重现性、自动化和溶剂消耗方面具有绝对优势。 展开更多
关键词 脂寡糖 转移酶 辅助激光离子化-飞行时间谱(MALDI-TOFMS)
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基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱在高分子研究中的应用 被引量:9
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作者 孙畅 《现代科学仪器》 2011年第4期109-111,共3页
在质谱学的发展过程中,如何获得大分子物质的质谱信息一直是最具有挑战性的课题。在过去的20年里,大分子的质谱研究取得了很大进展,发展出快原子轰击(FAB)、液质联用(LC-MS)、基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF)以及质谱/质... 在质谱学的发展过程中,如何获得大分子物质的质谱信息一直是最具有挑战性的课题。在过去的20年里,大分子的质谱研究取得了很大进展,发展出快原子轰击(FAB)、液质联用(LC-MS)、基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF)以及质谱/质谱串联(MALDI-TOF/TOF)等技术,并在生物大分子的结构测定、高聚物的结构及端基测定、共聚物的序列结构及组成等方面对高分子科学的发展作出了突出贡献。本文结合具体实例着重介绍了MALDI-TOF MS在大分子分析中的技术优势及应用。 展开更多
关键词 辅助激光吸电离-飞行时间 源后裂 高分子
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法区分大肠杆菌糖基转移酶基因
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作者 周大炜 刘斌 +2 位作者 吴俊丽 胡波 齐源远 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2011年第1期99-102,共4页
采用高能碰撞诱导解离(CID)-负离子模式基质辅助激光解吸离子化-飞行时间质谱技术(MALDITOF MS)区别wfgD(大肠杆菌O152中O抗原基因簇内)编码的β-1,3-葡萄糖转移酶和wfgD(大肠杆菌O77中O抗原基因簇内)编码的α-1,3-甘露糖转移酶酶促反... 采用高能碰撞诱导解离(CID)-负离子模式基质辅助激光解吸离子化-飞行时间质谱技术(MALDITOF MS)区别wfgD(大肠杆菌O152中O抗原基因簇内)编码的β-1,3-葡萄糖转移酶和wfgD(大肠杆菌O77中O抗原基因簇内)编码的α-1,3-甘露糖转移酶酶促反应产物-两个脂寡糖非对应异构体。结果表明:由高能CID-MALDI TOF质谱图中产物离子[B3]/[Y3]丰度比率的差别可明确区别两个酶促反应产物。并发现碰撞能量为1.0kV时,碰撞靶气的压力变化可影响产物离子[B3]/[Y3]的丰度比率。推断MALDI-TOF质谱图中,两个脂寡糖非对应异构体的磷酸二脂键部分和糖苷键的裂解依赖于糖基给予体的立体化学。 展开更多
关键词 脂寡糖 转移酶 辅助激光离子化-飞行时间
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基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法检测罕见单糖合成酶
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作者 周大炜 刘斌 +1 位作者 吴俊丽 齐源远 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第1期115-118,共4页
以VioF(普罗威登斯菌O30中O抗原基因簇内)编码的甲酰基转移酶酶促反应产物为研究对象,采用碰撞诱导解离(CID)负离子模式基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术建立简单、高效的罕见单糖合成酶监测方法。本方法首先直接... 以VioF(普罗威登斯菌O30中O抗原基因簇内)编码的甲酰基转移酶酶促反应产物为研究对象,采用碰撞诱导解离(CID)负离子模式基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术建立简单、高效的罕见单糖合成酶监测方法。本方法首先直接质谱分析0.3μL未经色谱分离、除盐处理的酶促反应混合物,随后应用CID串联质谱技术对酶活反应产物进行结构表征,实现酶活反应的快速监测。结果表明:高能CID MALDI-TOF/TOF-MS平台适用于新建克隆的单糖合成酶酶活反应的监测,与现有的监测方法相比,在速度、灵敏度、重现性、自动化和溶剂消耗方面具有绝对优势。 展开更多
关键词 罕见单糖 单糖合成酶 辅助激光离子化-飞行时间
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基于双向凝胶电泳/基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱技术的腐蹄病奶牛血浆蛋白质组学轮廓分析 被引量:4
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作者 郑家三 舒适 +4 位作者 夏成 徐闯 张洪友 刘云 王洪斌 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第7期682-687,共6页
目的利用双向凝胶电泳/基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(two-dimensional electrophoresis matrixassisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,2DE/MALDI-TOF-MS)技术,筛选、鉴定腐蹄病奶牛血浆差异表... 目的利用双向凝胶电泳/基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(two-dimensional electrophoresis matrixassisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,2DE/MALDI-TOF-MS)技术,筛选、鉴定腐蹄病奶牛血浆差异表达蛋白,并进行血浆蛋白质组学轮廓分析。方法选取20头腐蹄病奶牛为实验组,20头健康奶牛为对照组,采血,分离血浆,2DE筛选差异表达蛋白点,MALDI-TOF-MS鉴定差异表达蛋白,并对其进行生物信息学分析(GO分析和KEGG pathway数据库)。根据2DE及MALDI-TOF-MS的实验结果,选取纤维蛋白原进行Western blot验证试验。结果患腐蹄病奶牛血浆中共筛选出63个差异蛋白点,其中表达上调蛋白点14个,表达下调蛋白点49个,选取33个点进行质谱分析,得到26个阳性结果,鉴定为11种蛋白,差异表达蛋白多与炎症反应过程相关。Western blot对差异表达蛋白的验证结果与2DE结果一致。结论奶牛腐蹄病使血浆蛋白的表达发生了变化,机体蛋白质组参与炎症反应、补体通路、凝血过程等多个机体生理和病理过程,为进一步探索奶牛腐蹄病发病机制提供理论依据。 展开更多
关键词 奶牛 腐蹄病 双向凝胶电泳 辅助激光离子化飞行时间 蛋白组学
原文传递
基质辅助激光解吸/离子化飞行时间质谱分析多态性遗传标记 被引量:10
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作者 唐剑频 侯一平 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期185-188,共4页
随着人类基因组测序工作的完成,多态性遗传标记及其检测手段日益受到重视。基质辅助激光解吸/离子化飞行时间质谱作为一种高通量的单核苷酸多态性分型技术受到关注,它不仅可以分析单核苷酸多态性,还可以进行微测序、分析短串联重复序列... 随着人类基因组测序工作的完成,多态性遗传标记及其检测手段日益受到重视。基质辅助激光解吸/离子化飞行时间质谱作为一种高通量的单核苷酸多态性分型技术受到关注,它不仅可以分析单核苷酸多态性,还可以进行微测序、分析短串联重复序列。目前的分析方法有:引物延伸法、连接酶反应法、肽核酸法、侵入法等。 展开更多
关键词 辅助激光 多态性遗传标记 离子化 谱分析 单核苷酸多态性 短串联重复序列 飞行时间 人类因组 测序工作 检测手段 分型技术 引物延伸 高通量 反应法 连接酶 肽核酸
原文传递
人肺腺癌细胞系A549细胞双向电泳-飞行时间质谱研究 被引量:4
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作者 杨拴盈 田应选 +3 位作者 南岩东 卜丽娜 霍树芬 阮禹松 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期422-426,共5页
目的初步分析人肺腺癌细胞系A549细胞蛋白质表达情况,从蛋白组水平探讨肺腺癌发病的分子机制。方法应用2-DE技术对人肺腺癌细胞系A549细胞总蛋白进行分离,获得蛋白质表达谱;应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)结合生... 目的初步分析人肺腺癌细胞系A549细胞蛋白质表达情况,从蛋白组水平探讨肺腺癌发病的分子机制。方法应用2-DE技术对人肺腺癌细胞系A549细胞总蛋白进行分离,获得蛋白质表达谱;应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)结合生物信息学进行蛋白质鉴定。结果3块胶平均蛋白斑点数为1 138±49,平均匹配点数为986±32,匹配率为85.8%。随机选取背景清晰、分辨清楚、蛋白含量较高的20个斑点进行MALDI-TOF-MS分析,共获得了18个肽质量指纹图谱(PMF)。将PMFs质量数据通过Aldente软件查询SWISS-PROT数据库,根据匹配片段及氨基酸序列覆盖率等,初步鉴定出15种蛋白质。根据功能,这些蛋白质可分为:①基本代谢相关的酶类:果糖2-磷酸醛缩酶、视网醛脱氢酶1(RALDH1)、吡多醛激酶;②细胞骨架类:蛋白细胞角蛋白8(CK8)、-β2链微管蛋白;③应激相关蛋白:蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3);④信号转导分子:膜联蛋白1(ANX1)、膜联蛋白4(ANX4);⑤分子伴侣:热休克蛋白60(HSP60)、热休克蛋白-β1、抑制素(PHB);⑥转录及翻译相关蛋白:不均一性核糖核蛋白H(hnRNP H);⑦杂类:Rgr protein、NPM、PCBP1。结论应用2-DE/MALDI-MS方法获得了较为理想的人肺腺癌细胞系A549细胞2-DE蛋白质表达谱,初步鉴定了15种蛋白质。 展开更多
关键词 人肺腺癌细胞系 蛋白组学 双向电泳 辅助激光离子化电离飞行时间 肽指纹图谱
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应用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析宫颈鳞癌早期浸润蛋白质 被引量:1
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作者 邱晓菲 李昌 徐娟 《中华妇幼临床医学杂志(电子版)》 CAS 2011年第4期261-263,共3页
目的探讨基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization ti me of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)对宫颈鳞癌(squamous carcinoma of thecervix,SCC)组织切片直接分析,获取宫颈鳞癌早期浸... 目的探讨基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization ti me of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)对宫颈鳞癌(squamous carcinoma of thecervix,SCC)组织切片直接分析,获取宫颈鳞癌早期浸润的分子标志物的有效性。方法利用超微量点样枪将化学基质直接点样到宫颈鳞癌组织切片上,然后利用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱直接扫描宫颈鳞癌组织切片,分析宫颈鳞癌组织蛋白质分子。结果获得的25种蛋白质质谱峰强度比较,差异有显著意义(P<0.05)。其中7种差异蛋白质有分类意义,其质/核(M/Z)分别为:m/z3433,m/z4786,m/z10092,m/z10835,m/z15114,m/z15854和m/z16345。差异蛋白质m/z3433,m/z15114,m/z15854在宫颈鳞癌鳞状上皮组织高度表达,可作为宫颈鳞癌早期诊断的标志蛋白;差异蛋白质m/z16345在宫颈鳞癌的间质组织高度表达,可作为宫颈鳞癌早期间质浸润和扩散诊断的标志蛋白。结论利用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱技术成功获取一组差异蛋白质。该差异蛋白组可望作为宫颈鳞癌早期诊断的标志蛋白。 展开更多
关键词 宫颈鳞癌 早期浸润 差异蛋白 辅助激光吸附电离飞行时间
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基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱技术对痤疮患者痤疮丙酸杆菌的鉴定 被引量:11
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作者 凌勇活 孙菲 +2 位作者 李明 党文强 阮建波 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期98-99,103,共3页
目的了解基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术鉴定痤疮丙酸杆菌的效果。方法应用MALDI-TOF MS技术对痤疮患者皮损分离的91株菌株进行鉴定。结果 70株为痤疮丙酸杆菌,19株为其他厌氧菌或兼性厌氧菌(表皮葡萄球菌8株、... 目的了解基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术鉴定痤疮丙酸杆菌的效果。方法应用MALDI-TOF MS技术对痤疮患者皮损分离的91株菌株进行鉴定。结果 70株为痤疮丙酸杆菌,19株为其他厌氧菌或兼性厌氧菌(表皮葡萄球菌8株、颗粒丙酸杆菌3株、头状葡萄球菌2株、蜡样芽胞杆菌1株、产芽孢梭状芽孢杆菌1株、贪婪丙酸杆菌1株、克氏柠檬酸杆菌1株、毗邻颗粒链菌1株、结核硬脂酸棒状杆菌1株),2株无鉴定结果。结论 MALDI-TOF MS技术鉴定痤疮丙酸杆菌快速而准确,值得选用。 展开更多
关键词 辅助激光吸附电离飞行时间 痤疮丙酸杆菌
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