MMP-3、MMP-9和TIMP-1的动态平衡可作为心肌基质重构的重要标志

目的从基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMps)的动态平衡着手探寻其对心肌基质的组织修复和再生作用,为心肌损伤后基质重构造成的心肌肥大、增厚等引起的心力衰竭提供的有效的生物检测方法及治疗。方法利用广州市红十字会医院(暨南大学第四附属医院)的心脏病患者作为研究对象,按照随机区组分组的方法根据进行的心脏手术不同,将研究对象分为3个组,第1组为先天性心脏病组(CHD组);第2组为风湿性心脏病组(PHD组);第3组为冠心病组(COR组),由于其房室大小,心功能正常,设其为对照组。Elisa法对患者术前血液中的mmps和timps进行定量测定,寻求它们之间的动态平衡关系;术中切取心肌组织,用免疫组化方法测定心肌基质的胶原形态和分布;rt-PCR技术对心肌组织中mmps和timps的m RNA进行检测,查看其m RNA表达情况。结果CHD组、PHD组术前血液中的MMP-3、MMP-9、TIMP-1含量均较COR组高,MMP-9增多更为显著,差异有统计学意义(P<0.05),而CHD组和PHD组差异不显著,无统计学意义;免疫组化结果显示,CHD组、PHD组中MMP-3、MMP-9、TIMP-1均较COR组分布广泛,PCR结果显示CHD组、PHD组患者MMP-1、MMP-9、TIMP-1的m RNA表达较COR组升高,差异有统计学意义(P<0.05),同样CHD组和PHD组差异不显著,无统计学意义。结论 MMP-1、MMP-9和TIMP-1的动态平衡可作为心肌基质重构的重要标志,调节MMPs和TIMPs的活性有望成为心脏病治疗的新方向。

肝细胞癌R0切除术后患者预后与细胞外基质重构相关蛋白和缝隙连接蛋白水平相关性研究

目的:本研究对肝细胞癌R0切除术后患者预后与血清中细胞外基质重构酶和缝隙连接蛋白(Connexins)水平相关性进行研究,为临床诊断和治疗提供实验依据。方法:回顾性分析2006年1月至2016年12月我院接受肝R0切除的120例患者的临床资料,检测患者血清中细胞外基质重构相关蛋白和Connexins蛋白水平与患者预后的相关性。结果:肝细胞癌R0切除术后患者预后与MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP2、Connexin40、Connexin43、淋巴细胞计数、AFP和CEA水平密切相关,且随着MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP2、AFP和CEA蛋白表达的增强及Connexin40、Connexin43、淋巴细胞计数的降低,患者的预后变差。结论:肝细胞癌R0切除术后患者预后与基质金属蛋白酶及其抑制剂表达呈负相关,而与Connexins水平呈正相关。

倍他乐克联合右美托咪啶对心肌缺血再灌注大鼠NADPH氧化酶亚基-细胞外基质重构的机制研究

目的探讨倍他乐克联合右美托咪啶对心肌缺血再灌注大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-oxidase,NADPH oxidase)亚基、单核细胞趋化因子-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)水平及细胞凋亡相关蛋白的影响。方法 SD大鼠随机分为4组:假手术组(sham operation group,SO)、缺血再灌注组(ischemic perfusion group,IP)、NADPH氧化酶抑制剂apocynin治疗组(apocynin treatment group,AT)及倍他乐克联合右美托咪定组(metoprolol combined dexmedetomidine group,MD)。采用大鼠冠状动脉左前降支结扎方法建立大鼠心肌缺血再灌注模型。Real-time PCR及Western blot方法分析各组大鼠血浆和心肌组织中NADPH亚基、MCP-1、MMP-2、MMP-9以及细胞凋亡相关蛋白—半胱氨酸天冬氨酸蛋白-3(cysteine aspartic acid proteinase-3,Caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白-9(cysteine aspartic acid proteinase-9,Caspase-9)的表达变化。结果与SO组相比,IP组大鼠血浆和心肌组织的NADPH氧化酶亚基、MCP-1、MMP-2及MMP-9的表达均显著增高(P<0.01),同时细胞凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-9的表达也显著增高(P<0.01),而AT组和MD组可部分恢复上述蛋白的异常表达。结论倍他乐克联合右美托咪定通过抑制心肌组织中NADPH氧化酶的过渡激活介导的MCP-1上调表达及细胞外基质重构缓解缺血再灌注引起的大鼠心肌损伤。

细胞外基质重构与炎症性肠炎的相关性分析

结肠炎是临床上的常见病,是指各种原因引起的结肠炎症性病变,表现为腹痛、腹泻、脓血便及黏液便等[1-2]。炎症性结肠炎是病理及病因机制尚未完全阐明的自身免疫性疾病,主要是由环境因素、肠道菌群及食物抗原或半抗原引起的肠屏障性功能异常[3-4]。基质金属蛋白酶是细胞内降解胶原蛋白IV的最主要的酶,基质金属蛋白酶及其抑制剂通过调节细胞外基质的降解与重构参与了细胞内的多种病理及生理过程,

博来霉素性肺纤维化大鼠NADPH氧化酶介导的细胞外基质重构机制研究

目的探讨博来霉素性肺纤维化大鼠NADPH氧化酶介导的细胞外基质重构机制。方法 40只SD大鼠随机分为4组:对照组、模型组、乙酰香草素低剂量和高剂量组。一次性气管注入博来霉素复制大鼠肺纤维化模型,乙酰香草低剂量组灌胃乙酰香草素1μmol/L,高剂量组灌胃乙酰香草素10μmol/L治疗,对照组大鼠给予等剂量的生理盐水。分析各组大鼠肺组织羟脯氨酸及丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,Western Blotting法分析各组大鼠肺组织NADPH氧化酶亚基及细胞外基质重构相关酶系的表达。结果模型组大鼠肺组织羟脯氨酸及MDA水平明显增高,SOD水平明显降低;模型组大鼠肺组织NADPH氧化酶亚基p22phox及p47phox表达明显增强,且MMP2/9及TIMP1/2的表达也明显增强。低剂量和高剂量的乙酰香草素均可以明显改善上述指标的异常(P<0.05,P<0.01),且具有剂量依从性效果。结论乙酰香草素通过抑制NADPH氧化酶的过度激活及细胞外基质重构改善博来霉素性肺纤维化损伤。

小儿炎症性肠炎与细胞外基质重构相关性分析

目的通过在对患有炎症性肠炎的幼儿的临床治疗中,探讨分析幼儿患炎症性肠炎与细胞外基质重构之间的相关性。方法选取80例患有炎症性肠炎的患儿作为观察组,其中男性幼儿患者为44例;女性幼儿患者为36例;本组患儿的疾病类型包括溃疡性结肠炎35例以及克罗恩病患儿45例,同时选取同时期在我院接受体检的健康儿童40名,将其设定为对照组。比较三组的炎症因子水平。结果炎症性肠炎患儿血清炎症水平高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论小儿炎症肠炎发病时细胞外基质降解和重构发挥着重要作用。

MMPs 和TIMPs 的动态平衡在心肌损伤后基质重构中的研究

分析基质金属蛋白酶(MMPs)以及基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)动态平衡在心肌损伤后基质重构中的作用。方法:选择在本院进行风湿性心脏疾病治疗的40例病患为实验组,其治疗时间均在2019年5月至2020年5月之间。另选择同时期在本院开展治疗的40例冠心病病患为常规组,因其心功能以及房室大小正常,故将其作为常规组。使用酶联免疫吸附法在手术前对每组MMPs以及TIMPs实施定量检测,了解两项指标之间动态平衡关系。手术过程中采集心肌组织,利用逆转录聚合酶链式反应对心肌组织内MMPs以及TIMPs的mRNA水平实施检测,分析其mRNA表达情况。比较每组病患左心房末径(LAD)、左心室末径(LEVD)、左心室射血分数(LVEF)、室间隔厚度(IVS)水平以及mRNA表达情况。结果:实验组IVS、LEVD以及LAD水平均高于常规组,LVEF水平低于常规组(P<0.05)。实验组在MMP-3、MMP-9、TIMP-1方面mRNA表达均高于常规组(P<0.05)。结论:MMPs和TIMPs的动态平衡能够作为判断心肌损伤后基质重构的重要标志。

胞外基质重构及TNF-α上调表达参与的哮喘大鼠模型机制及孟鲁斯特钠的干预作用

目的:本文分析胞外基质重构及TNF-α上调表达参与的哮喘大鼠模型机制及孟鲁斯特钠的干预作用。方法:清洁剂SD大鼠随机分为3组:对照组、模型组和药物干预组。采用致敏剂注射和雾化激发复制大鼠哮喘模型,药物干预组给予孟鲁司特钠治疗。Western Blotting或荧光定量PCR法分析各组大鼠肺组织中炎症因子TNF-α、基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9及其抑制剂TIMP1/2的表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠的TNF-α、基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9及其抑制剂TIMP1/2的表达均明显增强,差异具有统计学意义(P<0.01);孟鲁司特钠药物干预组大鼠肺组织的上述蛋白的异常表达得到明显恢复,且与模型组相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:胞外基质重构及TNF-α上调表达参与的哮喘大鼠模型的发病过程,孟鲁斯特钠主要通过改善细胞外基质降解与重构及TNF-α的上调表达发挥改善哮喘大鼠肺组织异常。

肾去交感神经对心力衰竭犬心室基质重构的影响

目的 探讨肾去交感神经（RSD）对心力衰竭（心衰,HF）犬心室基质重构的影响.方法 19只犬按照随机数字表法随机分为3组：假手术组（n=7）,心衰组（n=6）和RSD组（n=6）.假手术组植入起搏器不起搏;心衰组植入起搏器后行右室快速起搏3周;RSD组先行双侧肾动脉消融再行右室快速起搏3周,实验前后监测血流动力学变化,采用Masson染色、ELISA和Western印迹等方法检测心室间质纤维化、脑钠肽（BNP）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、醛固酮和转化生长因子-β（TGF-β）的变化.结果 心衰组和RSD组犬的左右心室舒张末期内径均明显增大[左室：（27.0±2.4）mm 比（37.0±2.8） mm,P＜0.01和（30.0±2.5） mm比（36.0±2.8） mm,P＜0.05;右室：（11.0±1.5）mm比（14.0±1.7） mm,P=0.03和（12.0±1.1） mm比（14.0±1.2） mm,P＜0.05].与RSD组相比,心衰组犬左室舒张末期压力升高[（25.0±3.7） mmHg比（3.3±1.6） mmHg,P＜0.01],且心室肌组织纤维化程度明显升高（左室：24.1％±4.8％比8.5％±1.9％,P＜0.01;右室：17.2％±5.2％比11.8％±3.9％,P＜0.01）.与假手术组和RSD组相比,心衰组犬心室中TGF-β表达明显增加,心室肌组织及血清中BNP,AngⅡ和醛固酮水平明显升高.结论 RSD可抑制长期快速心室起搏引起的心室肌基质重构.

雷米普利对心肌梗死后室性心动过速大鼠基质重构的影响

目的构建Wistar大鼠心肌梗死（MI）模型，利用血管紧张素Ⅰ转化酶抑制剂．雷米普利进行药物干预，观察其对MI后室性心动过速（VT）大鼠基质的影响。方法对成功行左前降支（LAD）结扎的Wistar大鼠（n=78只）随机分成两组：MI组和雷米普利（Ramipril）干预组。同时，选取12只LAD结扎未成功的大鼠作为对照组。第18周后对三组大鼠进行ECG监测，左心室腔内采血；利用ELISA（R＆D，USA）方法测定血清中肿瘤坏死因子（TNF-α）水平，同时采集心脏客观指标；再取MI边缘区或对照组相应区域的心室肌，通过电镜观察基质变化的情况。结果MI大鼠用雷米普利干预18周后，VT的发生数明显比MI组减少（P〈0．05），而且血清中TNF-α的下降幅度也较大（P〈0．05）。左心室最薄处和最厚处比值（min／max）在MI组与对照组间 有统计学意义（P=0．001），而在雷米普利组与对照组间无差异性。线性回归分析证实，在MI组和雷米普利组中的TNF-α水平与MI后VT发生有密切相关性（P=0．005）。电镜显示，MI组的心肌细胞间有大量的纤维细胞，基质细胞排列紊乱；雷米普利组的心肌细胞间基质排布相对整齐，且有线粒体生成；对照组的心肌细胞间仅有少量的纤维细胞，基质细胞排列整齐。结论雷米普利可能通过减少左室血清中TNF-α的含量，抑制心肌基质重构，从而降低VT发生的敏感性。

酚妥拉明对心肌重构大鼠心肌细胞外基质的影响

目的探讨酚妥拉明对去甲肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚心肌细胞外基质(ECM)重塑的影响及可能机制。方法 24只雄性SD大鼠随机分为对照组、去甲肾上腺素造模组(模型组)和去甲肾上腺素+酚妥拉明组(治疗组)。采用超声心动图观察心脏结构及功能变化,测定胶原容积积分(CVF)、羟脯氨酸、心肌胶原含量,用免疫组织化学法检测心肌组织基质金属蛋白酶2和胶原蛋白Ⅰ的蛋白表达。结果模型组大鼠发生左心室肥厚,其羟脯氨酸含量、CVF值显著高于对照组(P<0.01),基质金属蛋白酶2和胶原蛋白Ⅰ蛋白表达上调(P<0.01)。治疗组心肌肥大明显改善,羟脯氨酸、CVF降低,基质金属蛋白酶2和胶原蛋白Ⅰ蛋白表达下降(P<0.05)。结论酚妥拉明可有效减轻SD大鼠心肌肥厚的发生及ECM重塑;酚妥拉明缓解ECM重塑可能与其降低心肌组织中基质金属蛋白酶2和胶原蛋白Ⅰ的表达有关。

Survivin和Smac/Diab介导的细胞凋亡信号通路与胎膜早破的相关性

目的探讨Survivin和Smac/Diab与胎膜早破的相关性,为相关的临床治疗提供参考。方法对收治的单活胎孕妇60例进行分析,其中胎膜早破患者30例(观察组),正常孕妇(对照组)30例。免疫组织化学法检测Survivin与Smac/Diab的表达,ELISA法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2及MMP-9的表达。结果两组患者胎膜组织中均有Survivin与Smac/Diab的表达,胎膜早破患者中Smac/Diab的表达明显高于对照组,而Survivin表达明显低于对照组;胎膜早破患者中MMP-2及MMP-9的表达也明显高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论胎膜早破患者中Smac/Diab及MMP表达均明显增强,而Survivin表达明显降低,提示胎膜早破可能与Smac/Diab介导的细胞凋亡信号通路及细胞外基质降解与重构有关。

人参皂甙对老年痴呆性大鼠模型心功能的影响

目的研究人参皂甙对老年痴呆性大鼠模型心功能的影响及机制。方法采用AlCl_3溶液背部皮下注射复制慢性铝中毒老年痴呆性大鼠模型,并进行人参皂甙灌胃治疗,分析大鼠治疗前后心功能变化及心肌氧化酶类、内质网功能调控蛋白表达。结果老年痴呆性大鼠模型记忆过程明显受到影响,且心肌组织中MDA、LVEDP、内质网功能调控蛋白和MMP2/9、TIMP1/2表达明显增强而SOD、CAT、LVSP水平明显降低(P<0.05);人参皂甙干预后上述指标得到明显恢复(P<0.05)。结论老年痴呆性大鼠心功能存在异常,人参皂甙可以通过调控内质网功能蛋白的表达而改善心功能异常。

皮肤桥蛋白在肥胖小鼠脂肪中的表达

目的:观察细胞外基质成员皮肤桥蛋白(dermatopontin,DPT)基因的组织表达谱,以及在饮食诱导肥胖小鼠脂肪中的表达变化;探讨罗格列酮对3T3-L1脂肪细胞DPT基因表达的调控。方法:运用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测6周龄小鼠主要组织的DPT mRNA和蛋白表达,以及正常和高脂饮食小鼠脂肪中的DPT表达;检测DPT在小鼠脂肪组织血管基质细胞和脂肪细胞中的表达差异。将3T3-L1细胞诱导分化为脂肪细胞,并以0.25、0.5、1、2μmol/L罗格列酮处理24 h,或以2μmol/L罗格列酮处理4、12、24、48 h,检测分化过程中及罗格列酮处理后DPT的表达。结果:DPT在小鼠脂肪中高度表达,高脂饮食16周后明显增加;DPT主要来源于脂肪细胞,且在3T3-L1细胞分化过程中的表达逐渐增加;不同剂量罗格列酮处理脂肪细胞24 h可降低DPT的表达量;2μmol/L罗格列酮处理脂肪细胞24、48 h后,DPT表达量明显降低。结论:肥胖状态下,脂肪组织中DPT的表达明显增加,罗格列酮对3T3-L1脂肪细胞DPT的表达具有调控作用,提示DPT可能参与肥胖的发生。

肿瘤相关成纤维细胞促癌作用的研究进展

肿瘤的发生、进展、侵袭和转移不仅依赖于癌细胞自身特性,也深受肿瘤间质反应的影响,因此受到严格的环境控制,然而在形成肿瘤微环境的基质细胞中,肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)是数量最多的,并且在癌症进展中起着至关重要的作用。CAFs能够分泌各种细胞因子和趋化因子等相关物质,通过细胞间接触发挥生物学功能,并对细胞外基质进行合成和重构,促进肿瘤的发生、进展、侵袭和转移。

调控肥胖脂肪组织炎症的靶点研究进展

肥胖作为一种机体能量代谢紊乱和脂肪过度累积的慢性代谢性疾病,是胰岛素抵抗、2型糖尿病、心脑血管疾病的重要致病因素之一,甚至与衰老、寿命缩短、肿瘤发生、神经退变密切相关[1]。调查显示,肥胖已在全球范围内广泛流行,成为全球最大、增长最快的公共卫生危机,截至2016年,全球肥胖人口超过6.5亿,预计到2030年将达11.2亿,而每年因肥胖死亡至少280万人[2]。在中国,肥胖的发病率也在迅速增加,《The Lancet》的一项新近报告显示,中国肥胖人口已达9000万,成为全球肥胖人口最多的国家[3]。脂肪组织既是能量代谢器官,亦是内分泌及免疫器官,在肥胖的发生、发展中扮演关键角色,肥胖时机体脂肪组织发生病理性扩张,除脂肪细胞稳态包括生成、形态、功能等失调外,更多的表现为炎症浸润、纤维化等脂肪基质重构现象,因此,研究脂肪基质重构的机制并探寻其重塑的潜在调控靶点对肥胖及其相关代谢性疾病的防治具有深远意义。

干旱区石灰岩矿山遗迹地生态修复模式对比研究

矿山遗迹地的生态修复是促进人与自然和谐共生、实现绿色低碳发展的重要举措。干旱区矿山遗迹地立地条件差,植被覆盖率低,采矿活动造成的土壤侵蚀强烈,确定科学合理的恢复模式是生态修复成功与否的关键。以宁夏中卫市的典型石灰岩矿山遗迹地为研究对象,通过对比7种生态修复植物在不同土壤基质重构措施下的土壤温、湿度和有机质,以及植物的存活率和新生枝相对生长速率(Relative growth rate of new shoots,RGRs)等指标,筛选出适宜干旱区石灰岩矿山遗迹地生态修复的最优模式,构建了土壤改良-植被重建联合的生态恢复方案。结果表明:(1)土壤基质重构措施是石灰岩矿山生态修复的前提条件,有效地改善了植物定植环境,不同土壤基质重构模式的植物存活率表现为:土+有机肥>砂+土+有机肥>砂+土+复合肥;(2)土壤有机质的范围为0.56~2.84 g·kg^(-1),植物种和土壤基质及二者的交互作用对土壤有机质含量具有极显著影响(P<0.001);(3)RGRs的范围为1.51~1.87 mm·cm^(-1)·month^(-1),不同植物种的RGRs存在显著性差异;(4)通过系统聚类分析得到本研究区最适宜的生态修复模式为砂+土+有机肥(沙拐枣或短穗柽柳)。本研究从土壤改良-植被重建角度提出的联合生态修复方案可为干旱区矿山生态修复提供理论依据和实践参考。

缬沙坦对心力衰竭大鼠心肌中解聚素-金属蛋白酶的干预作用

目的探讨缬沙坦对心肌梗死（MI）后心力衰竭（HF）发生过程中心肌解聚素-金属蛋白酶（ADAMs10，ADAMsl7）表达的干预作用。方法由哈尔滨医科大学附属第一医院实验动物中心购买雄性Wistar大鼠，体质量（200±30）g，行左冠状动脉前降支结扎，根据MI后多普勒超声心动图的检测结果，连续地选取LVEF〈45％的大鼠45只，随机（随机数字法）分成3组：心力衰竭组（HF组）、安慰剂组（Pla组）、缬沙坦干预组（Val组）。同时，选取同龄大鼠作为空白对照组（Con组）。Pla组和Val组在分组后即给予同体积的生理盐水和缬沙坦（50mg·kg^-1·d^-1，由Novartis公司提供）灌胃。第16周后，进行心功能指标和心室腔内TNF-α的测定；取缺血区心室肌，利用免疫印迹法来检测缺血区心肌中ADAMsl0，ADAMsl7和TNF-R1的表达变化。所有计量数据以均数±标准差（x-±s）表示，用叫金验评估。结果16周后，与HF组相比，Val组大鼠的左心功能水平（LVdp／dtmax、LVdp／dtmin和LVSP）均有所提高（P=0．006，P=0．015，P=0．003），LVEDP显著地降低（P=0．002），其心室腔内TNF-α下降幅度也较大（P=0．023）。Val组缺血区心室肌中ADAMl7和TNF-R1表达也比HF组显著地降低（P=0．011，P=0．022）。然而，ADAMIO表达在四组间差异无统计学意义。结论缬沙坦通过抑制缺血区心肌中ADAMl7和TNF-R1表达，降低心室腔内TNF-α的含量和功能，从而缓解心肌基质重构、改善MI后左室功能。

大鼠子宫内膜异位症的细胞外信号调节激酶信号通路参与机制及来曲唑的改善作用

目的分析大鼠子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)的细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号通路参与机制及来曲唑的改善作用。方法将40只雌性SD大鼠随机分为4组,每组10只,即假手术(Sham)组、子宫内膜异位症模型(EMs)组、PD98059(PD)组及来曲唑(LE)组。自体移植法手术建立EMs模型,PD98059组及来曲唑组进行对应灌胃治疗。采用Western Blotting分析各组大鼠异位组织中ERK信号通路的关键蛋白甲基乙基酮(Methyl Ethyl Ketone,MEK)、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase,ERK1/2)、p MEK(extracellular regulated protein kinase)及p ERK1/2蛋白的表达及参与细胞外基质重构的基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase,MMP2)及细胞凋亡蛋白Caspase3的表达。结果 EMs模型大鼠的ERK信号通路关键蛋白MEK、p MEK、ERK1/2及p ERK1/2的表达均增高(分别为123.6%、136.4%、144.7%、141.2%);MMP2及Caspase3的表达增强(分别为187.6%、134.7%);来曲唑组大鼠的上述蛋白的异常表达得到显著恢复,且较子宫内膜异位症模型组降低(P<0.05)。结论激活的ERK信号通路及其所诱导的细胞外基质重构和细胞凋亡参与了大鼠EMs的发生过程,来曲唑通过抑制激活的ERK通路改善EMs的异常。