血管生成素-1对人绒毛膜外滋养细胞基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9表达的调控作用

目的分析血管生成素-1(Ang-1)对人绒毛膜外滋养细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的调控作用。方法将体外培养的人绒毛膜外滋养细胞株HTR8/SVneo分为空白对照组(未转染)、NC-siRNA组(转染阴性对照siRNA)及Ang-1-siRNA组(转染Ang-1 siRNA)。采用实时定量PCR法检测3组细胞中Ang-1 mRNA的表达,采用Western blot法检测Ang-1、MMP-2及MMP-9蛋白的表达,采用Transwell小室法检测细胞侵袭能力。结果转染48 h后,空白对照组Ang-1 mRNA表达水平为(1.36±0.04),NC-siRNA组Ang-1 mRNA表达水平为(0.98±0.07),Ang-1-siRNA组Ang-1 mRNA表达水平为(0.24±0.02),3组比较差异有统计学意义(F=257.128,P<0.001)。空白对照组Ang-1蛋白水平为(0.54±0.03),NC-siRNA组Ang-1蛋白水平为(0.49±0.07),Ang-1-siRNA组Ang-1蛋白水平为(0.12±0.06),3组比较差异有统计学意义(F=84.326,P<0.001)。转染48 h后,空白对照组MMP-2蛋白表达水平为(0.78±0.03),NC-siRNA组MMP-2蛋白表达水平为(0.71±0.04),Ang-1-siRNA组MMP-2蛋白表达水平为(0.39±0.02),3组比较差异有统计学意义(F=89.532,P<0.001)。空白对照组MMP-9蛋白表达水平为(0.86±0.06),NC-siRNA组MMP-9蛋白表达水平为(0.83±0.04),Ang-1-siRNA组MMP-9蛋白表达水平为(0.41±0.02),3组比较差异有统计学意义(F=121.327,P<0.001)。空白对照组、NC-siRNA组及Ang-1-siRNA组穿膜细胞数分别为(69.43±5.67)个、(65.83±5.78)个及(25.89±5.38)个,3组比较差异有统计学意义(F=85.609,P<0.001)。结论Ang-1在子宫螺旋动脉重铸过程中发挥着重要作用,Ang-1可能通过上调MMP-2和MMP-9的表达,促进绒毛膜外滋养细胞的侵袭。

低氧环境下转染血管内皮生长因子165对人胃癌细胞体外侵袭转移的影响

目的:探讨低氧环境下血管内皮生长因子165(VEGF-165)对人胃癌细胞侵袭转移的影响及可能的机制。方法:实验分为4组:以利用腺病毒作为载体并已构建成功含VEGF-165基因的重组腺病毒(Ad-VEGF-165)进行瞬时转染,同时用低氧诱导剂氯化钴进行低氧干预的人胃癌细胞株BGC-823为低氧转染(D)组;单纯用低氧诱导剂氯化钴进行低氧干预的人胃癌细胞株BGC-823为单纯低氧干预(B)组;以利用腺病毒作为载体并已构建成功含VEGF-165基因的重组腺病毒(Ad-VEGF-165)进行瞬时转染的人胃癌细胞株BGC-823为单纯转染(C)组;以未转染未行低氧干预的正常细胞作为空白对照(A)组。应用Transwell小室分析低氧环境下VEGF165转染前后胃癌细胞迁移能力的变化;利用半定量RT-PCR方法对4组细胞中尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)、基质金属蛋白质酶2(MMP-2)的mRNA表达水平进行分析。结果:D组胃癌细胞的侵袭能力及uPA、MMP-2的mRNA表达明显高于A、B、C组(P<0.05)。结论:低氧环境和VEGF-165因子共同作用能够明显提高人胃癌细胞BGC-823的侵袭能力及细胞中uPA、MMP-2的mRNA的表达,表明低氧环境下VEGF-165促进肿瘤细胞的侵袭转移。

血管生成素1基因转染对胃癌细胞侵袭能力的影响

目的探讨人血管生成素1(Ang-1)对人胃癌细胞BGC-823基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达情况的影响。方法利用腺病毒作为载体将已构建成功的含Ang-1基因的重组腺病毒(Ad-Ang-1)瞬时转染人胃癌细胞BGC-823为实验组,转染编码绿色荧光蛋白的复制缺陷型腺病毒重组体(Ad-GFP)为阴性对照组,未转染的正常细胞为对照组。应用RT-PCR和Western blot印迹检测三组细胞中MMP-2在mRNA和蛋白表达的情况。结果MMP-2在实验组中表达明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。结论Ang-1能显著提高人胃癌细胞BGC-823的MMP-2的表达,提示Ang-1可能具有促进肿瘤细胞侵袭的作用。