TIMP-2基因转染豚鼠巩膜成纤维细胞基质金属蛋白酶2及其抑制剂表达

目的观察转染基质金属蛋白酶2抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase2,TIMP-2)基因的豚鼠巩膜成纤维细胞不同时间增生能力及基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP-2)和TIMP-2的表达,探讨基因治疗近视的可行性。方法随机选取三色健康豚鼠,组织块法体外培养原代巩膜成纤维细胞,免疫组织化学法进行波形蛋白的鉴定,取第3～6代细胞进行实验。分子克隆构建携带TIMP-2基因的真核表达载体,转染豚鼠巩膜成纤维细胞,MTT法观察转染后12h、24h、48h、3d、5d、7d细胞增生能力。提取总RNA,二步法逆转录-聚合酶链反应检测MMP-2mRNA及TIMP-2mRNA的表达水平。结果豚鼠巩膜成纤维细胞原代、传代培养生长良好,波形蛋白鉴定阳性。转染3d、5d、7d TIMP-2基因转染组成纤维细胞的增生速度分别为0.6724±0.0092、0.7963±0.0060、0.8462±0.0064,明显快于正常对照组成纤维细胞(0.5810±0.0120、0.6525±0.0072、0.7129±0.0132),差异均具有显著统计学意义(均为P<0.01)。转染48h MMP-2mRNA表达即开始减少,转染3d时表达明显减少,达到最低,除转染12h与24h之间外,转染组与正常对照组、各转染不同时间组间MMP-2mRNA表达差异均有统计学意义(均为P<0.05)。TIMP-2mRNA表达在转染48h时即开始增加,除12h与24h外,转染组与正常对照组、各转染不同时间组间TIMP-2mRNA表达差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论转染TIMP-2基因对豚鼠巩膜成纤维细胞有促增生作用,TIMP-2基因转染豚鼠巩膜成纤维细胞抑制MMP-2mRNA的表达,可在一定程度上阻止近视发展中巩膜组织的丢失与重塑。

载脂蛋白A-I对基质金属蛋白酶-2的抑制作用机理

为了分离纯化鲢鱼基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)的内源性抑制剂,克隆并表达了鲢鱼MMP-2的催化结构域(rHm-MMP-2c),并将其作为筛选内源性抑制剂的靶标酶。通过60℃加热、50%~90%的硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose和Phenyl-Sepharose柱层析等手段,从鲢鱼肌肉中纯化了一种MMP-2内源性抑制剂,该抑制剂相对分子质量为28 ku,能有效抑制rHm-MMP-2c在4℃冷藏过程中对I型胶原的降解。质谱鉴定结果表明,纯化的抑制剂为载脂蛋白A-I(Apo A-I)。抑制动力学显示,Apo A-I对rHm-MMP-2c呈现竞争性抑制,抑制常数K_(i)为1.31μmol/L,半抑制浓度(IC_(50))为3.33μmol/L。分子对接结果显示,酶和抑制剂结合的主要作用力为氢键相互作用,抑制原因可能是Apo A-I与MMP-2纤连蛋白结合区结合形成了空间位阻,阻碍了底物与酶的结合。

红芪黄酮对肺纤维化模型大鼠基质金属蛋白酶-2及其抑制剂-1蛋白表达的影响

目的探讨红芪黄酮防治肺纤维化的作用机制。方法 SPF级Wistar大鼠216只,分为正常组、模型组、强的松组及红芪黄酮高、中、低剂量组。采用气管内滴注博莱霉素法建立肺纤维化模型,从造模后第2日起,各药物组分别给予相应剂量药物,按时间点连续灌胃治疗7、14、28 d,免疫组化法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1蛋白的表达。结果红芪黄酮高剂量组第7、14、28日及红芪黄酮中剂量组第14日MMP-2蛋白的表达较模型组明显减轻,差异有统计学意义(P<0.05),红芪黄酮高剂量组表达水平与强的松组相似;红芪黄酮高、中剂量组第14日及红芪黄酮高剂量组第28日TIMP-1蛋白表达均较模型组明显减轻,差异有统计学意义(P<0.05)。结论红芪黄酮在各个时点调整MMP-2和TIMP-1的蛋白表达,使MMPs/TIMPs趋于平衡,可能是其抑制肺纤维化进程的一种有效机制。

基质金属蛋白酶抑制剂LY52对人卵巢上皮癌细胞SKOV3中MMP-2,MMP-9表达及其侵袭转移能力的抑制作用

背景与目的:研究表明,肿瘤细胞MMP-2,MMP-9表达升高与其侵袭和转移能力有密切关系。因而,研究设计新的MMPs特异性抑制剂得到广泛重视。根据MMP-2,MMP-9结构特点,本实验设计合成全新结构的N1-取代咖啡酰吡咯烷类MMPs抑制剂——LY52,并观察该化合物对MMP-2,MMP-9表达的抑制作用及对人卵巢粘液囊腺上皮癌细胞SKOV3侵袭转移能力的影响。方法:MTT和细胞克隆法检测LY52对细胞生长抑制作用;明胶酶直接降解琥珀酰明胶法测定LY52抑酶作用活性;SDS-PAGEzymography分析对SKOV3细胞MMP-2,MMP-9表达的抑制作用;MTT法测定细胞与FN,LN和matrigel的粘附能力;Transwell小室法观察化合物对SKOV3细胞侵袭人工基底膜的抑制作用。结果:直接与细胞接触,LY52具有较弱的肿瘤细胞生长抑制作用。LY52直接抑制明胶酶活性,抑制作用IC50为11.9!g/ml。同时,LY52抑制SKOV3细胞MMP-2,MMP-9表达。以0.1、1、10、100、1000μg/ml剂量与SKOV3细胞孵育24h,对培养上清液MMP-2表达的抑制率为10.66%～31.47%;对MMP-9表达的抑制率为22.56%～56.71%。按上述剂量孵育1h,对SKOV3细胞与FN,LN和matrigel粘附能力的最大抑制率分别为29.79%,48.94%,50.92%。LY52显著抑制SKOV3细胞穿过人工基底膜能力,按上述剂量,LY52与细胞孵育24h,抑制率分别为7.5%,42.07%,66.54%,72.15%,82.84%。结论:LY52通过抑制SKOV3细胞MMP-2,MMP-9的表达,降低癌细胞侵袭转移能力。

社区获得性肺炎患者血清和肺泡灌洗液基质金属蛋白酶-2、-29和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1检测

目的:通过检测社区获得性肺炎(CAP)患者血清和肺泡灌洗液(BALF)的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的水平,探讨它们在CAP发病中的可能机制。方法:60例CAP患者分为2组:重症CAP组20例;普通CAP组40例,其中20例收集BALF,所有患者均收集血清。健康志愿者26例为对照组,收集血清和BALF。用ELISA法检测血清及BALF中MMP-2、MMP-9和TIMP-1的水平,同时进行CAP组患者外周血中性粒细胞计数。结果:①CAP组血清MMP-2、MMP-9和TIMP-1水平均高于对照组(t值分别为4.874、9.961和4.500,P均<0.001)。②CAP组BALFMMP-2和MMP-9水平高于对照组(t值分别为4.513和8.165,P均<0.001),而2组TIMP-1差异无统计学意义(t=1.717,P=0.093)。③重症CAP组血清MMP-2及MMP-9水平高于普通CAP组(t=3.995,P=0.002;t=3.539,P=0.008),而2组的TIMP-1差异无统计学意义(t=0.759,P=0.080)。④CAP组血清MMP-9水平与外周血中性粒细胞计数呈正相关(r=0.855,P<0.001)。结论:MMP-2、MMP-9和TIMP-1参与了CAP的发病过程;血清MMP-2、MMP-9可以作为CAP诊断和判断病情的血清学指标;在CAP中中性粒细胞可能是MMP-9的主要来源。

芪叶保肝饮对慢性乙型肝炎早期肝硬化患者血清基质金属蛋白酶-2和金属蛋白酶组织抑制剂-2的影响

目的探讨在西医治疗基础上联合芪叶保肝饮对慢性乙型肝炎早期肝硬化患者的治疗效果以及对血清基质金属蛋白酶(MMP)-2和金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-2的影响。方法根据随机数字表,将70例慢性乙型肝炎早期肝硬化患者随机分两组,每组35例。两组患者均进行常规西医治疗,口服恩替卡韦抗病毒治疗,观察组则在此基础上联合芪叶保肝饮治疗,3个月为1个疗程,连续服用2个疗程。观察临床治疗效果,并检测肝纤维化指标和血清MMP-2、TIMP-2的变化。结果观察组和对照组总有效率分别为91.4%(32/35)和71.4%(25/35),两组差异显著(P<0.05);治疗前,血清肝纤维化指标比较两组间无统计学差异(P>0.05);治疗后,两组肝纤维化指标均好转(P<0.05),观察组优于对照组(P<0.05);治疗前,两组血清MMP-2和TIMP-2水平无统计学差异,治疗后,观察组MMP-2水平较治疗前降低,并且低于对照组(P<0.05);TIMP-2水平较治疗前升高,并且高于对照组(P<0.05)。结论西医治疗基础上联合芪叶保肝饮有效抗病毒的同时,可抑制肝纤维化过程,并且可对MMP-2、TIMP-2水平有一定调节作用。

肝门胆管癌基质金属蛋白酶MMP-2及其组织抑制因子TIMP-2表达及意义的研究

目的 :探讨基质金属蛋白酶MMP 2及其组织抑制因子TIMP 2在肝门胆管癌的表达及其与肝门胆管癌浸润、转移及预后间的关系。方法 :采用免疫组化S P法对 78例肝门胆管癌的MMP 2及其组织抑制因子TIMP 2的表达进行了检测。对MMP 2及TIMP 2的表达与肝门胆管癌的组织分化程度、浸润转移及预后之间的关系进行分析。结果 :MMP 2和TIMP 2表达阳性率分别为 72 %和 76 %。MMP 2的阳性表达率有淋巴结浸润的肝门胆管癌高于无淋巴结浸润的肝门胆管癌 ,低分化的肝门胆管癌高于高分化的肝门胆管癌。TIMP 2阳性表达率与以上相反。MMP 2表达与肝门胆管癌术后生存期呈负相关 (r =- 0 .713,P <0 .0 1) ,TIMP 2表达与肝门胆管癌术后生存期呈正相关 (r =0 .6 5 2 ,P <0 .0 1)。MMP 2与TIMP 2具有负相关关系 ,(r =- 0 .70 8,P <0 .0 1)。结论 :MMP 2与TIMP 2是反映肝门胆管癌浸润。

基质金属蛋白酶-2,-9及其抑制剂1在肺癌侵袭转移中的作用

目的 探讨基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )、MMP 9及基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP 1)在肺癌侵袭转移机制中的作用。方法 收集30例经病理证实的肺癌患者和15例健康志愿者,将肺癌患者分为两组:无远处转移组(Ⅱ～Ⅲ期) 15例,远处转移组(Ⅳ期) 15例,分别用逆转录聚合酶链(RT PCR)方法测定各组患者静脉血白细胞中MMP 9、TIMP 1mRNA的表达;用聚丙烯酰胺明胶电泳法测定各组患者血浆中MMP 2、MMP 9含量,分析其与肺癌分期的关系,以及白细胞中MMP 9的mRNA表达与血浆中MMP 9蛋白水平的相关性。结果 肺癌患者外周血白细胞中MMP 9的mRNA表达和MMP 9/TIMP 1比值与正常对照组相比均显著升高(P <0 0 0 0 1) ;Ⅳ期肺癌患者比Ⅱ～Ⅲ期明显升高(P <0 0 0 0 1)。肺癌患者外周血白细胞中TIMP 1的mRNA表达与正常对照组相比无明显差异(P >0 0 5 )。肺癌患者各组血浆中MMP 9蛋白水平与正常对照组比较均升高(P <0 0 0 0 1) ;Ⅳ期肺癌患者比Ⅱ～Ⅲ期明显升高(P <0 0 0 5 )。肺癌患者各组血浆中MMP 2蛋白水平表达与正常对照组相比无明显差异(P >0 0 5 )。外周血白细胞中MMP 9mRNA表达与血浆中MMP 9蛋白水平呈正相关(r=0 4 15 ,P <0 0 5 )。结论 MMP 9/TIMP

基质金属蛋白酶-2信号调节及其抑制剂的研究进展

基质金属蛋白酶-2（matrixmetalloproteinase-2，MMP-2）是基质金属蛋白酶家族中的重要成员之一。其表达及作用广泛，对其研究已越来越深入，本文就其结构功能、主要在心血管疾病中的调节及其药物抑制剂的研究进展做一综述。

基质金属蛋白酶-2,9及其抑制剂与大肠腺瘤癌变的关系

目的:探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)在不同性质的大肠黏膜中的表达情况及MMP-2/TIMP-2、MMP-9/ TIMP-1与大肠腺瘤向大肠癌转变的相关性及临床意义. 方法:用酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法对MMP-2, MMP-9及其抑制剂TIMP-2、TIMP-1在大肠腺瘤轻、中、重度不典型增生以及大肠腺癌中进行定量检测. 结果:MMP-2在大肠腺瘤重度不典型增生与中含量明显高于轻、中度不典型增生及正常大肠黏膜(91.391±23.551 vs 19.461±8.836,42.313±14.094,27.330±8.405,P<0.05);MMP-9在正常肠黏膜中未见表达, 在大肠腺瘤轻中重度不典型增生及大肠癌中表达依次增强,两两间有显著性差异(11.260±4.104 vs 31.520±7,433 vs 57.803±19.060 vs 202.17±33.344,P<0.05); TIMP-2重度不典型增生组与正常大肠黏膜有显著性差异(136.279±19.539 vs 81.363±26.252,P<0.05); MMP-2/TIMP-2比率在腺瘤轻、中度不典型增生, 重度不典型增生及大肠腺癌中两两之间均有显著性差异(0.206±0.128 vs 0.360±0.129 vs 0.665±0.100 vs 1.136±0.300,P<0.05);TIMP-1在腺瘤轻中度不典型增生中表达与大肠腺癌中表达有显著性差异(227.413±208.497,654.854±339.005 vs 1136.271±607.029 P<0.05); MMP-9/TIMP-1比率在腺瘤轻中度不典型增生,重度不典型增生及大肠腺癌中两两之间均无显著性差异(P>0.05). 结论:MMP-2可能是大肠腺瘤向大肠腺癌转变过程中的早期事件.MMP-9可作为区别大肠肿瘤良恶性的一项重要指标.MMP-2/TIMP-2比率与大肠腺瘤恶变有相关性,而MMP-9/TIMP-1的比率与大肠腺瘤向大肠腺癌的转变无相关性.MMP-2、MMP-9的定量监测可以作为大肠腺瘤向大肠腺癌转变过程中重要的生物学指标.

胃癌组织中基质金属蛋白酶-2和组织基质金属蛋白酶抑制剂-2的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和组织基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)在人胃癌组织中的表达,及其与胃癌临床病理特征的关系。方法选取100个胃癌手术切除标本中胃癌组织、癌旁组织及正常胃组织,采用免疫组织化学法检测MMP-2和TIMP-2蛋白的表达,并分析两者的表达及其与胃癌临床病理特征之间的相关性。结果胃癌组织中的MMP-2蛋白阳性率为77.0%,显著高于癌旁组织的33.0%和正常胃组织的8.0%(P值均<0.01),癌旁组织又显著高于正常胃组织(P<0.01)。胃癌组织中的TIMP-2蛋白阳性率为29.0%,显著低于癌旁组织的62.0%和正常胃组织的76.0%(P值均<0.01),癌旁组织又显著低于正常胃组织(P<0.01)。随着肿瘤浸润深度的增加(Tis～T4)、周围淋巴结转移的增多(N0～N3)、临床分期的进展(0～Ⅳ期),MMP-2蛋白阳性率逐渐升高,TIMP-2蛋白阳性率逐渐降低,且差异有统计学意义(P值均<0.01)。结论MMP-2和TIMP-2的表达可能与胃癌的发生、侵袭和转移有关,检测MMP-2和TIMP-2的表达有助于预测胃癌转移。

口服枸杞多糖对小鼠肝纤维化组织基质金属蛋白酶-2及基质金属蛋白酶-2抑制剂水平影响的实验研究

目的:观察口服枸杞多糖(LBP)后肝纤维化小鼠肝组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶-2抑制剂(TIMP-2)水平的变化,探究LBP干预肝纤维化的机制。方法:结扎12只小鼠胆总管造成其肝纤维化,并分为肝纤维化组和LBP组,各6只。将6只健康小鼠做为正常组。LBP组服用含有LBP 25μg/L三蒸水200 ml,正常组和肝纤维化组仅服用三蒸水200 ml, 1次/d,连续服用30 d。HE染色后比较三组小鼠肝组织结构。检测三组小鼠血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平并进行比较。Western blot检测肝组织中MMP-2及TIMP-2相对表达量。结果:正常组肝脏里的每个小叶结构分界清楚,其中央为中央静脉;肝纤维化组肝脏中有轻重程度不一、面积大小不同的组织坏死,小叶轮廓不清,只见结缔组织范围扩大,内含数量较多的小叶间胆管;LBP组肝组织坏死程度减轻,坏死面积也有所减小,结缔组织范围缩小,其内的小叶间胆管数目变少。与正常组比较,肝纤维化组小鼠血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平均升高(均P<0.05)。与肝纤维化组比较,LBP组小鼠血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平均下降(均P<0.05)。与正常组比较,肝纤维化组MMP-2相对表达量略微上升(P>0.05),TIMP-2相对表达量升高明显(P<0.05),MMP-2/TIMP-2下降(P<0.05)。与肝纤维化组比较,LBP组MMP-2相对表达量升高,TIMP-2相对表达量下降,MMP-2/TIMP-2上升(均P<0.05)。结论:LBP通过改变肝纤维化组织MMP-2及TIMP-2含量促使MMP-2/TIMP-2上升,从而减轻肝纤维化损伤。

阿霉素肾病大鼠肾小球中基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)在阿霉素肾病大鼠中的表达和意义。方法 25只Sprague-Dawlay(SD)雄性大鼠,随机分为对照组10只和观察组15只,观察组尾静脉内一次性注射阿霉素7.5 mg.kg-1(以生理盐水稀释至3 mL),对照组尾静脉内一次性注射等量生理盐水,对照组和观察组每日1次按10 mL.kg-1给予生理盐水灌胃,灌胃共8周。采用反转录聚合酶链式反应法检测肾组织MMP-2和TIMP-2 mRNA的表达。结果实验8周时与对照组比较,观察组的24 h尿蛋白定量、肌酐和尿素氮水平均显著上升(P<0.01),血白蛋白显著降低(P<0.01)。对照组大鼠肾皮质区肾小球毛细血管襻开放较好,无细胞外基质(ECM)聚集;观察组大鼠肾组织可见部分毛细血管腔变窄甚至完全闭塞,肾小囊扩张,囊壁增厚,球囊粘连。观察组MMP-2和TIMP-2 mRNA的表达较对照组明显下降(P<0.01),观察组中MMP-2/TIMP-2 mRNA半定量比值较对照组明显降低(P<0.01)。结论 MMP-2和TIMP-2在阿霉素肾病大鼠肾小球硬化中起到重要的作用;MMP-2/TIMP-2的比值失调使肾小球ECM降解减少,导致ECM过度积聚,参与肾小球硬化的发生发展。

基质金属蛋白酶组织抑制剂-2过表达对人成釉细胞瘤鸡胚尿囊膜移植瘤的抑制作用

目的探讨基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)基因过表达对人成釉细胞瘤鸡胚尿囊膜(CAM)移植瘤的抑制作用。方法建立成釉细胞瘤的鸡胚尿囊膜移植瘤模型。将实验分组:空白对照组(Empt),脂质体转染组(Lipo),质粒转染组(P)。TIMP-2基因转染成釉细胞CAM移植瘤细胞后,测定移植瘤体积和瘤重;将移植瘤侵袭能力分为4个级别进行移植瘤病理检查。Western blot分析移植瘤基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及TIMP-2蛋白的表达。结果移植瘤能在鸡胚绒毛尿囊膜上生长。接种后第9天,转染质粒组的0级侵袭为7例、2级侵袭为1例、3级侵袭为0例。TIMP-2基因转染可以显著抑制成釉细胞CAM移植瘤的局部侵袭能力。质粒转染组TIMP-2表达明显高于空白组TIMP-2的表达(P<0.05);质粒转染组MMP-2表达明显低于空白组MMP-2的表达(P<0.05)。结论成功建立成釉细胞瘤的CAM移植瘤模型。TIMP-2基因转染后,成釉细胞瘤CAM移植瘤的侵袭性生长被抑制。移植瘤的侵袭性生长被抑制的可能原因是由于特异性抑制MMP-2蛋白引起的。

基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1与2型糖尿病亚临床大血管病变的相关性

糖尿病大血管病变的本质是动脉粥样硬化（AS），AS的形成过程也是细胞外基质（ECM）重构的过程。基质金属蛋白酶（MMP）-9对ECM有极强的降解作用，而基质金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）-1是MMP-9的特异抑制物，调节MMP-9的活性。本研究联合检测2型糖尿病中尚无临床表现的亚临床大血管病变患者的血清MMP-9及TIMP-1水平，以期找到能尽早反映糖尿病相关血管活性异常的标志物，从而采取干预措施。

携载人基质金属蛋白酶组织抑制剂-2基因重组腺病毒载体的构建

目的 构建携载人基质金属蛋白酶组织抑制剂 2 (hTIMP 2 )基因的重组腺病毒载体 ,为基因治疗提供实验基础。方法 利用基因重组技术将腺病毒骨架质粒 pAdEasy 1以及线性化的重组穿梭质粒 pTrack CMV hTIMP 2共转化BJ5 183受体菌并在其中发生同源重组 ,利用重组前后抗性的改变筛选出重组子 ,重组腺病毒质粒AdhTIMP 2经过 2 93细胞的包装 ,扩增和纯化后 ,测定病毒滴度。一步法提取细胞总RNA ,RT PCR检测hTIMP 2的mRNA。收集细胞上清 ,进行Western杂交检测TIMP 2蛋白。结果 得到了携带hTIMP 2基因的重组腺病毒 ,纯化后滴度为 4× 10 11pfu/ml,应用RT PCR和Westernblot方法 ,在转染 2 93细胞后 2 4h即可检测到hTIMP 2的表达。结论 成功地构建了携带hTIMP 2的重组腺病毒载体 ,为下一步的基因治疗提供了基础。

裸鼠肝部分切除后肝癌组织基质金属蛋白酶-2及其抑制剂表达

［目的］观察肝部分切除后裸鼠肝癌组织基质金属蛋白酶-２(MMP-２)及其抑制剂(TIMP-２)表达的变化，以探讨肝部分切除促肿瘤生长的机制。［方法］２０只裸鼠随机分成２组：对照组和肝切除组，每组１０只，对照组仅将人肝癌组织种植于右肝叶，肝切除组切除肝左叶和中叶后于右肝叶种植人肝癌组织，２组动物于３５天后处死，检测肿瘤大小和重量，采用免疫组化和图像分析法检测肝癌组织微血管密度(MVD)、MMP-２和TIMP-２的表达。［结果］肝切除组肿瘤重量和体积、MVD和MMP-２表达较对照组明显增加(P＜０．０５)，TIMP-２则明显减低(P＜０．０５)。［结论］肝部分切除后MMP-２表达上调、TIMP-２表达下调导致肿瘤新生血管形成增多，可能为其促肿瘤生长的机制。

甲状腺乳头状癌原发灶与淋巴结转移灶中基质金属蛋白酶-2、组织金属蛋白酶抑制剂-2的表达对比分析

目的:探讨基质金属蛋白酶-2(MMP2),组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP2)在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达。方法:采用免疫组织化学方法检测86例PTC原发灶及其中40例颈部淋巴结转移性癌灶中MMP2、TIMP2的表达。结果:伴有颈部淋巴结转移的PTC原发灶中MMP2的表达强度高于无淋巴结转移者,而前者TIMP2的表达强度低于后者,差异均有统计学意义(P<0.05);PTC原发灶中MMP2的表达强度高于转移灶,差异有统计学意义(P<0.05),而TIMP2在原发灶与转移灶中表达强度的差异无统计学意义(P>0.05);两者在PTC原发灶和转移灶中表达强度的自身对比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:PTC癌组织中的MMP2/TIMP2表达比例失衡,MMP2起着主导作用,这可能是导致PTC淋巴结转移的因素之一,高MMP2/TIMP2比例蛋白组成的PTC癌细胞亚克隆在转移过程中发挥着重要的作用。

丹参酮ⅡA对腹膜透析患者基质金属蛋白酶-2及金属蛋白酶组织抑制剂-1的影响

目的基质金属蛋白酶-2（matrix metalloprote inase-2,MMP-2）及金属蛋白酶组织抑制剂-1（tissue inh ib itor of m et-alloprote inase-1,TIMP-1）失衡可导致细胞外基质沉积,是组织纤维化包括腹膜组织纤维化发生发展的重要机制之一。通过体外细胞培养,观察丹参酮ⅡA对人腹膜间皮细胞增殖活性及MMP-2、TIMP-1表达的影响,并通过在腹膜透析液（peritoneal dial-ysis solution,PDS）中添加丹参酮ⅡA了解其对腹膜透析（peritoneal dialysis,PD）患者腹腔MMP-2和TIMP-1的影响。方法取6例择期手术患者的网膜体外培养腹膜间皮细胞,第3代细胞用于实验,细胞同步后分成对照组、PDS组、丹参酮ⅡA 1mg/L组（丹参酮ⅡA终浓度为1mg/L）、丹参酮ⅡA 5mg/L组（丹参酮ⅡA终浓度为5mg/L）、丹参酮ⅡA 10 mg/L组（丹参酮ⅡA终浓度为10 mg/L）5组（每组6例）进行干预。ELISA法检测各组上清液中MMP-2、TIMP-1的含量,RT-PCR检测各组细胞MMP-2、TIMP-1mRNA的表达。前瞻性观察38例持续非卧床PD患者,随机分为实验组和对照组,每组19例,进行为期6周的研究。实验组在前3周使用添加丹参酮ⅡA注射液（10mg/2L）的PDS治疗,4~6周使用常规PDS治疗,对照组均不加药治疗6周,分别在开始时、第3周末和第6周末检测2组患者透出液MMP-2、TIMP-1的浓度,并进行比较。结果与对照组比较,PDS组人腹膜间皮细胞产生MMP-2明显增加（P〈0.05）,MMP-2/TIMP-1比值明显升高（P〈0.05）,表达MMP-2 mRNA明显升高（P〈0.05）;添加丹参酮ⅡA干预后,丹参酮ⅡA 1 mg/L组、5 mg/L组、10 mg/L组MMP-2产生与PDS组比较有显著下降（P〈0.05）,MMP-2/TIMP-1比值明显下降（P〈0.05）,MMP-2mRNA表达水平显著下调（P〈0.01）,TIMP-1mRNA表达水平显著上调（P〈0.05）。用药后实验组患者透出液MMP-2较用药前有明显降低（P〈0.05）,透出液TIMP-1无明显变化,停药3周后,透出液MMP-2较用药3周后明显升高（P〈0.05）。结论丹参酮ⅡA可影响人腹膜间皮细胞MMP-2、TIMP-1mRNA的表达,调节MMP-2/TIMP-1平衡,改善人腹膜间皮细胞的增殖活性,显著降低PD患者腹腔内高MMP-2状态。

基质金属蛋白酶-2组织抑制剂基因多态性与慢性阻塞性肺病易感性研究

目的:研究基质金属蛋白酶-2组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases-2,TIMP-2)基因多态性与慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)易感性。方法:采用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测92例COPD患者(COPD组)及80例健康对照者(对照组)TIMP-2基因启动子区域(-418位点)和外显子3区域(+853位点)单核苷酸多态性(SNPs),统计各基因型频率进行分析比较。结果:TIMP-2基因+853位点COPD组基因型频率为G/G83.7%、G/A15.2%、A/A1.1%,基因型分布两组间差异有显著性(P=0.002);等位基因G在COPD组为91.3%,对照组为78.1%,等位基因频率相比两组差异有显著性(P=0.001);-418位点基因型和等位基因频率分布在两组间差异无显著性(P>0.05)。结论:(1)TIMP-2基因+853位点G/A等位基因改变在吸烟时与COPD易感性相关。(2)TIMP-2基因-418位点等位基因G/C的改变与COPD易感性无关。