人前梯度蛋白2在垂体腺瘤中的表达及其与细胞内增殖抗原Ki-67和基质金属蛋白酶9及血管内皮生长因子的相关性

目的研究人前梯度蛋白2(AGR2)在垂体腺瘤组织中的表达及其与细胞内增殖抗原Ki-67、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)的相关性。方法收集2013年5月至2015年7月在新疆维吾尔自治区人民医院神经外科经手术切除的垂体腺瘤新鲜标本117例。行免疫组织化学染色观察AGR2在垂体腺瘤细胞中的表达,采用Pearson相关分析AGR2表达与Ki67、MMP-9、VEGF的相关性。结果 AGR2在垂体腺瘤不同分泌类型中的表达阳性率差异无统计学意义(x^2=6.537,P>0.05)。在117例垂体腺瘤组织标本中,AGR2表达阳性60例,AGR2在非侵袭性垂体腺瘤组织中的表达明显高于在侵袭性垂体腺瘤中的表达[30.8%(36/47)比20.5%(24/70)],差异有统计学意义(P<0.01);AGR2表达与Ki-67、MMP-9、VEGF表达呈负相关(r=-0.252、-0.883、-0.921,均P<0.05)。结论 AGR2在侵袭性垂体腺瘤和非侵袭性垂体腺瘤组织中含量有明显差异。AGR2表达量与Ki-67、MMP-9、VEGF表达量呈负相关,AGR2不仅可以作为研究垂体腺瘤侵袭性的一个靶标,还可以作为垂体腺瘤诊断、靶向治疗以及预后判断的一个重要的潜在指标。

基质金属蛋白酶-3促进骨肉瘤MG-63细胞的增殖、侵袭及其可能的机制

目的:研究基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)对骨肉瘤细胞增殖、侵袭的影响,并初步探讨MMP-3促进骨肉瘤侵袭和转移的机制。方法:收集2013年1月1日至2013年11月1日期间解放军第184医院骨科收治的骨肉瘤患者40例和健康人40名的血液标本,ELISA法检测其中MMP-3含量,并采用SPSS软件分析MMP-3含量与骨肉瘤Enneking分期的相关性。RT-PCR分别检测不同骨肉瘤细胞株U2-OS、HOS-143b、MG-63中MMP-3的表达。MTT法、Transwell侵袭实验观察50、100、200 ng/ml MMP-3刺激或转入MMP-3-shRNA慢病毒(MOI=50、100、200)对MG-63细胞增殖和侵袭的影响,Western blotting方法检测MMP-3过表达或沉默对MG-63细胞中侵袭、转移相关的蛋白p-AKT、核蛋白NF-κB表达的影响。结果:骨肉瘤患者血清中MMP-3的含量高于正常人(F=186.4,P=0.000);且MMP-3含量与骨肉瘤Enneking分期成正相关(r=0.736,P=0.043)。与其他3株细胞相比,MG-63细胞株中MMP-3表达最高(t=5.12,P<0.05)。MMP-3刺激导致MG-63细胞内MMP-3过表达,p-AKT和核内NF-κB表达升高,并促进MG-63细胞的增殖和侵袭;转入MMP-3-shRNA慢病毒导致MMP-3表达沉默,p-AKT和核内NF-κB表达降低,抑制MG-63细胞的增殖和侵袭。结论:MMP-3可能通过增加AKT磷酸化水平和促进NF-κB核转位来促进骨肉瘤细胞的增殖和侵袭。

基质金属蛋白酶-9和Ki-67在视网膜母细胞瘤中的表达和意义

视网膜母细胞瘤（RB）是婴幼儿最常见的眼内恶性肿瘤之一，对视力和生命有严重的损害和威胁[1]。大量研究表明，基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在多种恶性肿瘤中呈过表达，降解、破坏靠近肿瘤表面的细胞外基质，使肿瘤细胞能够沿着受损的基底膜向着周围组织浸润，最终导致肿瘤的侵袭和转移[2]。

基质金属蛋白酶-9对骨肉瘤增殖、侵袭及迁移能力的影响及其临床意义

目的:通过研究骨肉瘤组织中基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)的表达情况,及沉默MMP-9后对骨肉瘤细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响,阐明MMP-9对骨肉瘤进展的影响及其临床意义。方法:通过定量PCR分别检测5例原发性骨肉瘤及5例正常骨组织标本中MMP家族的表达情况;通过慢病毒载体介导shRNA-MMP-9转染至骨肉瘤细胞Saos2中,将实验分为空白对照组(磷酸盐缓冲液,PBS)、阴性对照组(转染shRNA-NC序列)及转染组(转染shRNA-MMP-9序列),检测MMP-9沉默后Saos2细胞增殖、侵袭及迁移能力的变化;根据MMP-9在患者骨肉瘤标本中的表达水平,对64例随访病例分组,进行生存分析。结果:筛查MMP家族基因,检测发现骨肉瘤组织中MMP-9的表达水平明显高于正常骨组织(t=12.040,P=0.000)。骨肉瘤细胞Saos2转染shRNA-MMP-9后,转染组细胞MMP-9 mRNA及蛋白表达水平均明显下降,提示在Saos2细胞中成功沉默MMP-9。在细胞增殖、侵袭及划痕实验中,空白对照组与阴性对照组均无统计学差异,但转染组的细胞相较于阴性对照组,其增殖、侵袭及迁移能力均明显减弱(t=4.954,P=0.008;t=6.360,P=0.003;t=3.965,P=0.017)。此外,对64例随访病例进行生存分析发现,MMP-9高表达组患者的总生存率明显低于MMP-9低表达组(χ^(2)=4.169,P=0.041)。结论:骨肉瘤组织中高表达MMP-9,其与骨肉瘤的增殖、侵袭、转移密切相关,且对骨肉瘤患者的临床预后具有重要提示作用。

表柔比星联合多西他赛新辅助化疗对乳腺癌患者Ki-67、基质金属蛋白酶-9水平的影响

目的:探讨表柔比星联合多西他赛新辅助化疗对乳腺癌患者细胞增殖核抗原Ki-67、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平的影响.方法:2016年5月至2017年5月在本院就诊的154例乳腺癌患者纳入本研究.根据化疗方案不同分为:观察组73例(表柔比星+多西他赛治疗)、对照组81例(5-氟尿嘧啶+表柔比星治疗).比较两组化疗前后Ki-67、MMP-9相对表达量,记录治疗过程中不良反应发生情况.结果:化疗后两组Ki-67、MMP-9相对表达量均明显下降,观察组更低(P<0.05).两组不良反应发生率(白细胞下降、恶心呕吐、肝功能指标异常、脱发、心律失常等)比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:表柔比星联合多西他赛新辅助化疗能降低乳腺癌患者Ki-67、MMP-9水平,是一种安全的治疗方案.

KISS-1基质金属蛋白酶-9和Ki67在宫颈鳞癌组织中的表达和意义

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤,它严重威胁着妇女的健康和生命。目前宫颈鳞癌的发病率有上升趋势和年轻化趋势,侵袭和转移是其重要的生物学行为。因此早期诊断宫颈癌,预测宫颈癌的侵袭与转移能力是极为重要的。

长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18通过微RNA-497-5p/细胞周期蛋白E1轴调节弥漫性大B细胞淋巴瘤的增殖、凋亡和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控微RNA-497-5p(miR-497-5p)/细胞周期蛋白E1(CCNE1)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹法分别检测2018年5月至2021年5月收集的恩施土家族苗族自治州中心医院DLBCL病人淋巴组织、良性淋巴结增生病人的淋巴组织、人正常B细胞永生化细胞HMy2.CIR、DLBCL细胞系SU-DHL-1、OCI-LY8、U2932中HCG18、miR-497-5p表达及CCNE1蛋白表达,将OCI-LY8细胞分为Ct组(正常培养的OCI-LY8细胞)、pcDNA组(细胞转染过表达物阴性对照)、pcDNA-HCG18组(细胞转染HCG18过表达物)、si-NC组(细胞转染小干扰RNA阴性对照)、si-HCG18组(细胞转染HCG18小干扰RNA)、si-HCG18+inhibitorNC组(细胞转染HCG18小干扰RNA和抑制物阴性对照)、si-HCG18+miR-497-5p inhibitor组(细胞转染HCG18小干扰RNA和miR-497-5p抑制物),CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,蛋白质印迹法检测CCNE1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达,双萤光素酶验证HCG18与miR-497-5p、miR-497-5p与CCNE1的关系。结果 在DLBCL淋巴组织和细胞中,HCG18、CCNE1蛋白高表达,miR-497-5p低表达,且在OCI-LY8细胞中HCG18、CCNE1蛋白表达上调最高,miR-497-5p表达下调最多(P<0.05),因此,以OCI-LY8细胞进行后续研究,与si-NC组比较,si-HCG18组HCG18(0.26±0.03比1.01±0.01)、CCNE1蛋白(0.45±0.03比1.44±0.19)表达降低,miR-497-5p(1.95±0.14比1.03±0.02)表达升高(P<0.05),与pcDNA组比较,pcDNA-HCG18组HCG18(1.96±0.23比1.02±0.01)、CCNE1蛋白(2.33±0.21比1.42±0.18)表达升高,miR-497-5p(0.28±0.02比1.02±0.02)表达降低(P<0.05),与siHCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组比较,miR-497-5p表达降低(1.21±0.09比1.95±0.14、1.94±0.13),CCNE1蛋白(0.87±0.08比0.45±0.03、0.44±0.04)表达上调(P<0.05),沉默HCG18可抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭行为及PCNA、MMP-9蛋白表达,诱导细胞凋亡及Bax蛋白表达,而上调HCG18则呈相反趋势,下调miR-497-5p逆转了沉默HCG18对OCI-LY8细胞增殖、侵袭、凋亡的影响,HCG18靶向调控miR-497-5p/CCNE1。结论 沉默HCG18可能通过调控miR-497-5p/CCNE1抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡。

基质金属蛋白酶对胃癌微环境调控作用的研究进展

目的介绍基质金属蛋白酶(MMPs)在胃癌发生、发展中的作用。方法收集近年来国内、外有关MMPs与胃癌关系的文献并作综述。结果胃癌的发生、发展是多步骤、多因素的复杂过程,其病因和发病机理仍未完全阐明。MMPs是一类蛋白水解酶,它们通过对肿瘤生长的微环境进行调控,进而在胃癌演进中的增殖、转移、新生血管形成和调控肿瘤细胞及其周围正常细胞凋亡的过程中均起着重要的作用。结论MMPs从不同的方面促进胃癌的演进,了解这些方面的机理可以为未来胃癌的治疗提供理论依据。

基质金属蛋白酶与膀胱癌分化和浸润的关系

[目的]探讨基质金属蛋白酶2(MMP 2)在膀胱移行细胞癌 (TCC)中的表达与肿瘤分化和浸润 ,以及与 p53和ki 67表达的关系。[方法]采用免疫组化DAKOEnVisionSystem方法 ,测定MMP 2、p53和ki 67在83例膀胱TCC中的表达。[结果]MMP 2在TCC中的阳性率为63.9% ,表达显著高于癌旁粘膜(P<0.01) ;MMP 2表达强度与TCC癌细胞的分化高低和浸润深度呈明显正相关(P<0.05) ,并与ki 67表达有显著意义的关联(P<0.01) ,但与 p53表达无明显相关(P>0.05)。[结论]MMP 2在TCC的发展和浸润过程中发挥重要作用 。

基质金属蛋白酶抑制剂的抗肿瘤作用研究

目的 研究基质金属蛋白酶抑制剂 (ZX 18)对肿瘤的体内体外抑制作用。方法 采用MTT法 ,观察ZX 18对前列腺PC 3细胞、肝癌细胞、大肠癌Lovo细胞体外增殖的抑制作用。通过小鼠腋下接种S180 肿瘤细胞 ,观察ZX 18对实体瘤重的影响。结果 ZX 18在 0 .1、0 .2、2 .0mmol·L-1时 ,在体外对前列腺PC 3细胞、肝癌细胞、大肠癌Lovo细胞的增殖有明显的抑制作用 ,且呈浓度依赖关系 ;体内ZX 18在 5 0mg·kg-1的情况下 ,对肿瘤有明显的抑制作用。结论 ZX 18对肿瘤细胞的体外体内增殖有明显抑制作用 ,提示对肿瘤的治疗可能有一定的应用价值。

胃肠道间质瘤组织中Ki-67、CyclinD1、ICAM-1、Livin及MMP-9蛋白表达与危险度分级

目的:探讨胃肠道间质瘤组织中Ki-67、细胞周期素D1(CyclinD1)、细胞间黏附分子(ICAM-1)、凋亡抑制蛋白(Livin)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达与Fletcher分级的相关性。方法:应用免疫组化SP法检测67例胃肠道间质瘤存档蜡块标本中各蛋白的表达情况,单因素和多因素分析各蛋白表达与Fletcher分级的关系。结果:单因素分析结果显示,不同危险度分组中,Ki-67、CyclinD1、Livin及MMP-9蛋白表达的差异有统计学意义(P均<0.05)。有序Logistic回归多因素分析结果显示,CyclinD1和MMP-9对Fletcher分级影响显著,是Fletcher分级的独立影响因子,CyclinD1和MMP-9的优势比分别为3.51和3.29。结论:CyclinD1、MMP-9蛋白在胃肠道间质瘤组织中的表达与Fletcher分级具有明确的相关性,可作为判定恶性程度的参照因素。

人脑胶质瘤MMP2、MMP9和Ki-67的表达及其相关性的探讨

目的:探讨人脑胶质瘤基质金属蛋白酶MMP2、MMP9和Ki-67的表达及其相关性。方法:应用MMP2、MMP9表达水平代表胶质瘤的侵袭活性,应用Ki-67标记指数代表胶质瘤的增殖活性;用免疫组化方法观察了6例正常脑组织、50例胶质瘤标本和2例恶性胶质瘤体外细胞系的MMP2、MMP9和Ki-67表达,并分析其相关性。结果:在胶质瘤中MMP2、MMP9的阳性表达率和Ki-67LI均随肿瘤恶性程度增加而增加并与胶质瘤分级呈正相关;相关分析发现,MMP2、MMP9和Ki-67LI的表达两两相关。结论:增殖和侵袭在恶性胶质瘤的分子生物学演进过程中相互协同、共同促进肿瘤细胞的恶性进展。

川楝素通过MMP9抑制肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的:基于网络药理学方法探讨川楝素治疗肾癌的靶点及作用机制,并通过体外内实验进行验证。方法:通过SwissTarget数据库和TargetNet数据库获取川楝素的作用靶点,GeneCards数据库获取肾癌疾病相关靶点;采用DAVID数据平台对靶点进行GO分析;利用基因表达汇编(GEO)数据库的组织芯片分析靶点基因在肾癌组织的表达水平;基于肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析靶点基因与肾癌临床表型的关系。采用CCK-8实验及异种移植实验观察川楝素对肾癌细胞体内外增殖的影响;采用Transwell侵袭和迁移实验观察川楝素对肾癌细胞侵袭和迁移的影响;构建基质金属蛋白酶9(MMP9)过表达质粒并转染人肾癌细胞系ACHN和769-P,观察上调MMP9表达对肾癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响。结果:基于网络药理学分析结果,川楝素作用于肾癌的靶点包括MMP9在内共有13个靶点;TCGA数据库的临床数据表明,MMP9在肾癌组织中的表达较正常肾组织表达上调(P<0.05),且其高表达与肾癌临床分期晚、分化程度低、复发及预后差密切相关(P<0.05)。功能实验中,川楝素呈时间和剂量依赖性抑制MMP9蛋白表达(P<0.05),显著抑制肾癌细胞ACHN、769-P的增殖、迁移和侵袭(P<0.05),并能明显抑制裸鼠肾癌皮下移植瘤的生长(P<0.05),使用MMP过表达质粒上调MMP9表达则明显逆转川楝素的抑癌作用(P<0.05)。结论:MMP9在肾癌中表达上调,并与肾癌的恶性临床表型和不良预后密切相关,川楝素可通过抑制MMP9抑制肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

CD44s、MMP-9、Ki-67的表达与骨肉瘤侵袭、转移、复发的关系

背景及目的:近期研究表明,细胞表面粘附分子CD44和基质金属蛋白酶类(MMPs)在多种肿瘤组织中有高水平表达,且与肿瘤的侵袭转移关系密切;Ki-67是一种细胞增殖核抗原,表示肿瘤细胞的增殖速率;但三者与骨肉瘤的局部侵袭、远处转移及术后是否复发之间的关系尚不清楚,本研究拟探讨细胞表面粘附分子标准型CD44蛋白(CD44s)以及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和细胞增殖核抗原(Ki-67)在骨肉瘤中的表达情况及其与骨肉瘤侵袭、转移、复发的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测了62例骨肉瘤(初发性骨肉瘤51例、复发性骨肉瘤11例,确诊时即伴有肺转移者9例、不伴有肺转移者53例)以及骨纤维结构不良和正常对照组织中CD44s、MMP-9、Ki-67的表达,并根据阳性瘤细胞占肿瘤细胞总数的比率进行半定量量化分析和非参数秩和检验。结果:CD44s、MMP-9、Ki-67在骨肉瘤中的阳性表达率分别为71.0%、75.8%和35.5%,与三种分子在骨良性病变和正常对照组织中的阳性表达率相比,其表达水平显著性升高(P值均小于0.05)。CD44s和MMP-9在初发性和复发性骨肉瘤之间的表达差异无显著性意义,但Ki-67在术后复发的骨肉瘤中的阳性率为81.8%,比初发性骨肉瘤中的阳性率显著性升高。CD44s和Ki-67在伴有肺转移的骨肉瘤中的阳性率分别为88.9%和66.7%。

miR-222基因转染对人非小细胞肺癌细胞增殖与侵袭的影响

目的 miR-222基因转染对人非小细胞肺癌细胞增殖与侵袭的影响。方法采用qRT-PCR检测miR-222在A549、16HBE细胞中的表达;将miR-222 mimics、scramble、TIMP3-siRNA与si-control分别转染于A549细胞(设为实验1组、实验2组、实验3组、实验4组),Western blotting法检测细胞中的TIMP3蛋白,MTT法和Transwell侵袭实验分别检测细胞增殖与侵袭能力。结果 miR-222在A549、16HBE细胞的表达分别为0.767±0.086、0.405±0.034,两者比较,P<0.01。实验1组、实验2组、实验3组、实验4组A549细胞中TIMP3蛋白表达分别为0.416±0.023、0.732±0.019、0.430±0.020与0.803±0.025,实验1组与实验2组比较,实验3组与实验4组比较,P均<0.05。在A549细胞中过表达miR-222或沉默TIMP3 48、72、96 h后,细胞的增殖能力明显增强(P均<0.05)。实验1组、实验2组、实验3组、实验4组A549细胞48 h后穿过基质胶的细胞数分别为(104±5)、(204±8)、(99±4)、(188±7)个,实验1组与实验2组比较,实验3组与实验4组比较,P均<0.05。结论 miR-222基因转染的人非小细胞肺癌细胞增殖与侵袭能力增强,其可能与miR-222靶向调控TIMP3作用有关。

microRNA134对胶质瘤U87细胞增殖及侵袭的影响

目的研究微小RNA-134（miRNA-134）对人脑胶质瘤细胞系U87在侵袭、迁移方面的作用并探讨可能的作用机制。方法通过人工合成miR-134 mimic瞬时转染脑胶质瘤细胞系U87,实时定量荧光聚合酶链式反应（PCR）检测细胞miR-134的表达水平;并通过四唑盐比色法（MTT）检测U87细胞增殖情况;Transwell小室法检测各组U87细胞株迁移和侵袭能力;实时定量荧光PCR及蛋白质印迹法（Western blot）检测各组基质金属蛋白酶3（MMP-3）的表达水平。统计学数据处理釆用SPSS 19.0软件处理,组间比较采用单因素方差分析,P〈0.05有统计学意思。结果荧光显微镜下观察转染效率90%以上,实时定量荧光PCR结果显示与未处理的空白对照组（control）及空白转染组（Mock）比较,miR-134转染组的miR-134表达水平明显上调,可达到对照组的5-6倍（P〈0.05）;MTT实验结果表明miR-134转染组细胞增殖能力明显下降（P〈0.05）,同时Transwell实验也显示miR-134转染组细胞的迁移能力明显降低（P〈0.05）;实时定量荧光PCR及Western blot分析MMP-3表达情况发现,过表达miR-134可以明显减少MMP-3基因及蛋白的表达水平（P〈0.05）。结论本研究表明miR-134能够抑制胶质瘤U87细胞的增殖及侵袭迁移能力,其机制可能与抑制MMP-3的表达有关,提示miR-134可能成为胶质瘤治疗的新靶点。

裙带菜多糖抑制肝癌细胞增殖和迁移的机制

目的探讨裙带菜多糖(sulfated polysaccharide from Undaria pinnatifida,SPUP)对肝癌细胞增殖、迁移的影响及潜在机制。方法MTT和克隆形成实验检测SPUP对肝癌细胞HepG2、SMMC-7721增殖的影响;Hoechst 33258染色和Western blot法检测SPUP干预后对HepG2、SMMC-7721细胞凋亡的影响;Transwell和划痕法检测HepG2、SMMC-7721细胞的迁移和侵袭;免疫荧光和Western blot法检测SPUP对肝癌细胞自噬、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、MMP-9蛋白的影响。结果SPUP对HepG2、SMMC-7721细胞有短期和长期的抑制增殖作用,对正常肝细胞L-02无明显抑制作用,SPUP可促进两种肝癌细胞凋亡和自噬水平。同时,SPUP可以抑制肝癌细胞的迁移侵袭能力,降低EMT和MMPs水平。结论SPUP通过促进凋亡和自噬、抑制EMT和MMPs,进而抑制肝癌细胞的增殖和迁移。