鸡堆型艾美尔球虫3-1E抗原表位的生物信息学预测

应用生物信息学分析和预测鸡堆型艾美尔球虫3-1E蛋白二级结构和抗原表位,为确定和筛选优势表位,研制安全、高效表位疫苗奠定基础。以克隆获得的鸡堆型艾美尔球虫3-1E蛋白氨基酸一级结构为基础,采用DNAStar软件和生物信息学在线分析程序Prot Param、SOSUI、IEDB、SYFPEITHI等预测3-1E蛋白理化性质和二级结构,并分析其序列跨膜区、可溶性、亲水性、可及性、柔韧性参数以及抗原指数,预测B细胞表位和T细胞表位的可能区域。3-1E蛋白由170个氨基酸组成,分子式C818H1257N213O272S3,分子质量18.5234 ku,理论等电点为4.25,半衰期为10 h;无跨膜区均为膜外区,是一种可溶性蛋白。其二级结构中α螺旋占31.76%,β转角为12.35%。B细胞表位预测区域:44-49、65-67、86-87、111-116;分值较高的T细胞表位区域:52-60、94-102、97-105、154-162、157-165。运用生物信息学方法确定3-1E存在多个抗原表位,对进一步研究3-1E的抗原性和研发优势表位疫苗具有重要意义。

帝克珠利对鸡堆型艾美尔球虫的药效实验

球虫病是威胁养鸡业的重要疾病之一，目前对该病的防治仍主要依赖药物［１］。但耐药虫株的出现使现有许多抗球虫药物疗效降低甚至丧失。因此，除了采取轮换用药及穿梭用药等方法以减少或延缓耐药性的产生外，开发评价和应用新型抗型抗球虫药物极为重要和必要。本文报道我...

堆型艾美尔球虫cSZ1基因在PMV361整合载体的构建

目的:构建PMV361-cSZ1载体,研制鸡球虫疫苗。方法:根据堆型艾美尔球虫基因序列,设计合成引物,扩增cSZ1基因,在pMD18-T Simple Vector表达后提取质粒,经过PCR鉴定和酶切鉴定。将cSZ1基因片段和PMV361载体由限制性内切酶PvuⅡ和ClaI双酶切后,进行DNA连接。结果:经PT-PCR扩增出cSZ1基因片段,大小为940bp,连接到整合表达载体PMV361中,成功构建PMV361-cSZ1的整合表达载体。结论:成功扩增了堆型艾美耳球虫cSZ1基因开放阅读框并构建了整合表达载体pMV361-cSZ1,为构建鸡球虫重组卡介疫苗内表达提供前期实验基础。

堆型艾美尔球虫的分离与病理学研究

采用单卵囊感染技术,从鸡球虫混合种中分离出一株堆型艾美尔球虫(Eimeria acervulina)。并对该株堆型艾美尔球虫的病理学做了进一步研究。利用堆型艾美尔球虫的寄生部位、肉眼病变、最小潜在期等生物学特性进行鉴定,并做回归试验,用此球虫卵囊1×105个感染雏鸡。取感染5d后有明显病理变化的十二指肠组织,采用石蜡切片技术,进行病理学观察。结果表明,虫体寄生于肠绒毛上皮细胞内,大量的肠绒毛遭到破坏、断裂和脱落。

禽巨噬细胞对不同类型艾美尔球虫产生特异性反应

球虫病被认为是禽类主要的寄生虫病，是由原生动物门顶复亚门的艾美尔球虫导致的。越来越多的证据显示宿主对艾美尔球虫的免疫应答是非常复杂的，微点阵技术作为一种功能强大的工具可用来研究如此复杂的生物过程。美国研究人员使用包含4906个独特基因片断的禽巨噬细胞微点阵检查了柔嫩艾美尔球虫，堆型艾美尔球虫，巨型艾美尔球虫孢子感染的巨噬细胞，发现重要的宿主基因表达发生了变化。除了诱导表达IL-1p、IL-6和IL-18外，抑制IL-16的表达，用艾美尔球虫处理的巨噬细胞通常被发现诱导CCL趋化因子家族成员巨噬细胞炎性蛋白（MIP）-1B（CCLiL）、K2O3（CCLi3）和ah221（CCLi7）的表达。但是，CXCL趋化因子K60（CXCLiL）被发现存在柔嫩艾美尔球虫时诱导表达，而暴露在巨型艾美尔球虫和堆型艾美尔球虫时则受到抑制。对禽趋化因子和细胞因子表达的基础分析有助于进一步了解禽类对这些相关的但生物学特性独特的病原体特异性的免疫应答。

艾美尔属球虫内生性发育阶段抗原性

研究艾美尔属(Ejmeria)球虫病病原不同发育阶段的抗原性,在建立较可靠的特异性诊断手段和疾病予防方面,不仅具有理论意义,同时具有实践意义。在目前的工作中,己取得内生性发育阶段免疫原性和抗原性的研究成果有三种艾美尔球虫。

鸡感染球虫后血清生化指标的进一步观察和病理损伤探讨

为了进一步观察球虫病鸡的病理损伤情况 ,将 2 3日龄雏鸡接种柔嫩艾美尔球虫 (E .t)卵囊 40万 /只或堆型艾美尔球虫 (E .a ) 1 0 0万 /只后 ,分别在E .t感染前、感染后 (pi) 5天、8天和E .a感染前、4、7天 (pi)采病鸡心血分离血清 ,检测血清生化指标。结果 ,血清γ_谷氨酰基转移酶活性在E .t和E .a感染前后无显著差异 ,血清α_羟丁酸脱氢酶活性在E .t组的 5dpi和E .a组的 4dpi显著降低 (p <0 .0 5 ) ,血清尿酸和肌酐含量在E .t组的 5dpi和 8dpi及E .a组的 4dpi呈同步极显著升高 (p<0 .0 1 ) ,表明 E .t和 E .a感染的病鸡心、肝没有可检测的病理损伤 ,肾有某种程度功能障碍。

RAPD技术在鸡球虫虫株鉴定上的应用

采用 RAPD 技术对 E.tenella 早熟株、鸡胚株、亲本毒抹和田间分离的抗药株进行研究,发现本研究选育的 E.tenella 早熟株与亲本毒株间 DNA 多态性存在着差异,证实该早熟侏已发生了遗传变异,但变异程度不大;而鸡胚株及抗药株却比早熟株的变异程度大。建议 RAPD 技术可用于艾美耳球虫株间差异及其球虫株间关系距离的检测.对经细胞培养的 E.acervulina 早熟株及其毒株和抗药株的基因组 DNA 进行多态性比较研究,发现该3株球虫间的变异程度大于 E.tenella 各虫株间的变异,即不同来源的 E.ac-ervulina 各虫株间的相似性小于 E.tenella 各虫株间的相似性,表明不同球虫其种内变异程度不一致。本研究结果表明 RAPD 技术可作为球虫株间变异的分子标记方法及其球虫株间关系距离的检测手段。

鸡球虫病的流行特点及防治对策

鸡球虫病是一种或几种球虫寄生于鸡肠粘膜上皮细胞而引起的一种急性流行性原虫病，目前分为巨型艾美尔球虫、变位艾美尔球虫、柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、堆型艾美尔球虫、早熟艾美耳球虫、布氏艾美尔球虫、哈氏艾美耳球虫、巨型艾美尔球虫，其中致病最强的是寄生于盲肠的柔嫩艾美耳球虫和寄生于小肠的毒害艾美耳球虫。临床上由于用药不当造成的耐药性、采食劣质饲料造成肠膜发育不良、

鸡球虫病的防治措施

鸡球虫病是鸡的一种常见原虫病，以3~6周龄的幼鸡最易感。发病率和死亡率很高。鸡体内已发现的球虫有9种。均为艾美耳属即柔嫩、毒害、巨型、布氏、和缓、早熟、变位、哈氏和堆型艾美尔球虫。

鸡球虫病的防治

鸡球虫病是危害养鸡业最严重的寄生虫病之一,本病分布广泛,世界各地均有发生,15～50日龄的雏鸡发病率高,死亡率可达80％.成年鸡多为带虫者,但增重和产蛋受到一定影响.1 病原体寄生于鸡的艾美尔球虫,全世界报道有9种,但被公认的有7种.最常见的有柔嫩艾美尔球虫,寄生于盲肠,致病力最强.巨型艾美尔球虫,寄生于小肠,以中段为主,有较强的致病作用.堆型艾美尔球虫,寄生于十二指肠和小肠前段,有较大的致病作用.毒害艾美尔球虫,寄生于小肠中三分之一段,致病力强.布氏艾美耳球虫,寄生于小肠后段、直肠和盲肠近端区,致病力较强.上述球虫卵囊的基本形态均为卵圆形,有的呈椭圆形等.卵囊壁淡绿黄色,有的呈浅黄色.原生质呈黄褐色或无色.

鸡球虫病的药物防治

鸡球虫病是危害养鸡业的一种重要寄生虫疾病，主要发生于温暖多雨的春夏季，秋冬季较少。目前已证实为有危害或致病性的球虫包括堆型艾美尔球虫、巨型艾美尔球虫、毒害艾美尔球虫、柔嫩艾美尔球虫和布氏艾美尔球虫。但生产中经常出现多种球虫的混合感染。在生产实际中，按实际危害的严重性排序为柔嫩、堆型、巨型、毒害和布氏艾美尔球虫，其中以柔嫩、堆型、巨型、毒害艾美尔球虫对鸡造成的侵害最为严重。

控制家禽球虫病的新进展

家禽球虫病分布于世界各地。在家禽产业中,由于球虫病引起的经济损失非常大,有时雏鸡的感染率可达80％～100％,死亡率达20％～50％,因球虫病造成鸡群生长滞缓,产蛋下降等所带来的经济损失,更是难以估量。感染家禽的9种艾美尔球虫(Eimeria spp)是:柔嫩艾美尔球虫(E.tenella)、布氏艾美尔球虫(E.brunetti)、毒害艾美尔球虫(E.necatrix)、堆型艾美尔球虫(E.acervulina),巨型艾美尔球虫(E.maxima)、哈氏艾美尔球虫(E.hagani)、变位艾美尔球虫(E.mivati)、和缓艾美尔球虫(E.mitis)和基前艾美尔球虫(E.praecox)。不管是在发达国家还是在发展中国家,球虫病一直是家禽中发病最高的疾病。为了防治球虫病,长期以来世界上普遍使用药物防治,在美国一年销售抗球虫药的金额就高达八千万美元以上,欧洲经济共同体是2700万英镑以上。